- Chỉ tiêu theo dõi:
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THAỎ LUẬN
3.4.5. Ảnh hưởng của nồng ựộ chất ựiều tiết sinh trưởng trong môi trường lây nhiễm và trong mơi trường đồng ni cấy tới hiệu quả chuyển gen
nhiễm và trong mơi trường đồng ni cấy tới hiệu quả chuyển gen
để ựánh giá ảnh hưởng của nồng ựộ chất ựiều tiết sinh trưởng trong môi trường lây nhiễm và trong mơi trường đồng ni cấy tới hiệu quả chuyển gen chúng tôi sử dụng kết quả tối ưu của thắ nghiệm tái sinh để bố trắ thắ nghiệm nàỵ 300 mẫu ựược lây nhiễm với vi khuẩn Ạ Bacterium tumefaciens trong 80 phút ở ựiều kiện mật ựộ vi khuẩn OD600=0,5 trong môi trường cơ bản pH 5,5, nồng độ AS tối ưu 100ộM/l, nhiệt ựộ 260C. Sau đó, tiến hành ựồng ni cấy trong 3-4 ngày rồi chuyển sang môi trường diệt khuẩn 7 ngày sẽ tiến hành nhuộm Gus. Kết quả thu ựược như sau:
Bảng 3.11: Ảnh hưởng của nồng ựộ chất ựiều tiết sinh trưởng trong môi trường lây nhiễm và trong mơi trường đồng ni cấy tới hiệu quả chuyển gen
CT Nồng ựộ chất đTST Số mẫu nhuộm Gus Số mẫu có ựốm xanh Tỷ lệ mẫu biểu hiện tạm thời (%) 1 8ộM Zeatin: 5ộMIAA 300 49 16,33 2 8ộM Zeatin: 8ộMIAA 300 41 13,67
Kết quả ở Bảng 3.11 cho thấy môi trường lây nhiễm và mơi trường đồng ni cấy bị ảnh hưởng bởi nồng ựộ chất ựiều tiết sinh trưởng. Khi bổ sung 8ộM Zeatin: 5ộMIAA vào mơi trường lây nhiễm và mơi trường ựồng nuôi cấy, tỷ lệ biểu hiện tạm thời của gen Gus cao hơn so với việc bổ sung 8ộM Zeatin: 8ộMIAẠ điều đó thể hiện sự ảnh hưởng của nồng độ chất điều tiết sinh trưởng trong mơi trường lây nhiễm và trong mơi trường đồng ni cấy tới hiệu quả chuyển gen. Từ đó chúng tơi lựa chọn bổ sung 8ộM Zeatin: 5ộMIAA vào mơi trường lây nhiễm và mơi trường đồng ni cấỵ