Để tăng độ chính xác khi so sánh, chúng tôi cũng chia mật độ trung bình làm ba nhóm (< 40 triệu/ml, từ 40-100 triệu/ml và > 100 triệu/ml). Sau khi đánh giá mật độ tinh trùng theo ba phương pháp ở ba nhóm, chúng tôi thấy rằng ở cả ba nhóm, đánh giá bằng ba phương pháp đều có số mẫu giống nhau (bảng 3.4).
Bảng 3.4. Phân bố mật độ tinh trùng ở các nhóm của ba phương pháp Mật độ TT (triệu/ml) Buồng đếm Makler n % Buồng đếm Neubauer n % Máy phân tích TT tự động SQA-IIB n % < 40 6 20 6 20 6 20 40 – 100 9 30 9 30 9 30 >100 15 50 15 50 15 50 Tổng 30 100 30 100 30 100
Nhóm < 40 triệu/ml, có số mẫu là 6, chiếm tỉ lệ 20%, nhóm từ 40 – 100 triệu/ml, có số mẫu là 9, chiếm tỉ lệ 30%, và có số mẫu cao nhất (n=15), chiếm tỉ lệ 50%, là nhóm có mật độ > 100 triệu/ml.
Bảng 3.5. Mật độ tinh trùng trung bình của ba phương pháp
Phƣơng pháp Mật độ triệu/ml Buồng đếm Neubauer Buồng đếm Makler Máy đếm TT tự động SQA-IIB X ± SD 108,0 ± 75,1 111,4 ± 76,5 90,4 ± 55,4
Bảng 3.5 cho thấy : mật độ trung bình ở máy đếm SQA-IIB là thấp nhất (90,4 ± 55,4), cao nhất là ở buồng đếm Makler (111,4 ± 76,5) và ở giữa là buồng đếm Neubauer (108,0 ± 75,1).
178.3 173 135.3 67.3 66.5 72.4 25.5 19 11.2 0 50 100 150 200 250 Mật độ TB > 100 triệu/ml Mật độ TB từ 40 -100 triệu/ml Mật độ TB < 40 triêu/ml Buồng đếm Makler Buồng đếm Neubauer Máy SQA-IIB
Biểu đồ 3.1. Mật độ trung bình ở ba nhóm của ba phƣơng pháp: buồng đếm Makler, buồng đếm Neubauer và máy phân tích tự động SQA-IIB
Nhận xét:
Trong bảng 3.4 và biểu đồ 3.1 cho thấy.
- Trong các mẫu nghiên cứu, những mẫu có mật độ > 100 triệu tinh trùng /ml chiếm ưu thế với tỉ lệ vượt trội là 50%. Mật độ trung bình của ba phương pháp Makler, Neubauer, SQA-IIB đều cao (178,3 ± 56,3; 173,0 ± 54,2; 135,3 ± 33,2).
- Nhóm có mật độ tinh trùng từ 40-100 triệu/ml, chiếm tỉ lệ 30%, mật độ trung bình của ba phương pháp: Makler, Neubauer, SQA-IIB là (67,3 ± 19,3; 66,5 ± 13,4; 72,4 ± 13,30).
- Nhóm ít nhất là nhóm có mật độ tinh trùng < 40 triệu/ml (20%), mật độ trung bình của ba phương pháp : Makler, Neubauer, SQA-IIB là ( 25,5 ± 8,3; 19,0 ± 8,4, 11,2 ± 5,4). Trong nhóm này (n=6), kết quả thu được bằng buồng đếm Neubauer có 3 mẫu ở mức bất thường (chiếm
50%), và bằng máy phân tích TT tự động SQA-IIB có 4 mẫu có kết quả ở mức bất thường (chiếm 66,7%). 3.2.2. Tỉ lệ tinh trùng di động: 36.9 7.8 55.3 38 7.5 55.5 23 17.1 59.9 0 10 20 30 40 50 60 70 80 Buồng đếm Neubauer
Buồng đếm Makler M áy SQA-IIB
Tỷ lệ %
Tinh trùng không di động (IM)
Tinh trùng di động không tiến tới (NP)
Tinh trùng di động tiến tới (PR)
Biểu đồ 3.2: Tỉ lệ tinh trùng di động đƣợc đánh giá bằng buồng đếm Neubauer, buồng đếm Makler và máy phân tích tự động SQA-IIB.
Qua biểu đồ 3.2 ta nhận thấy:
- Kết quả ở buồng đếm Neubauer. Tỉ lệ TT di động tiến tới (PR), cao gần gấp đôi so với tỉ lệ TT không di động (IM), (55,3 so với 36,9),và gấp 7 lần so với TT di động không tiến tới (NP), (55,3 so với 7,8).
- Kết quả ở buồng đếm Makler. Tỉ lệ TT di động tiến tới (PR), có tỉ lệ cao nhất (55,5 ± 12,1), tiếp theo là tỉ lệ TT không di động (IM) chiếm 37,0± 10,7, tỉ lệ di động thấp nhất là TT di động không tiến tới (NP) là 7,5 ± 3,0.
- Kết quả ở máy đếm TT tự động SQA-IIB. Tỉ lệ TT di động tiến tới (PR) có tỉ lệ cao nhất 59,9 ± 14,2, tỉ lệ TT di động không tiến tới (NP) là 17,1 ± 5,5, tỉ lệ TT không di động (IM) là 23,0 ± 14,9.
3.3. So sánh kết quả giữa các phƣơng pháp.
3.3.1. So sánh kết quả mật độ tinh trùng theo ba nhóm giữa các phương pháp: Buồng đếm Makler, buồng đếm Neubauer và máy SQA-IIB. pháp: Buồng đếm Makler, buồng đếm Neubauer và máy SQA-IIB.
Bảng 3.6. So sánh mật độ trung bình ở ba nhóm bằng buồng đếm Makler và buồng đếm Neubauer Kết quả Mật độ TT Buồng đếm Makler X± SD Buồng đếm Neubauer X± SD So sánh < 40 (tr/ml) 25,5 ± 8,3 19,0 ± 8,4 P < 0,001 40 - 100 (tr/ml) 67,3 ± 19,3 66,5 ± 13,4 P > 0.05 >100 (tr/ml) 178,3 ± 56,3 173,0 ± 54,2 P > 0,05 Nhận xét:
- Ở nhóm mật độ tinh trùng < 40 triệu/ml, mật độ trung bình ở buồng đếm Makler cao hơn so với mật độ tinh trùng ở buồng đếm Neubauer (25,5 ± 8,3 so với 19,0 ± 8,4). Sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với P < 0,001. - Với nhóm có mật độ tinh trùng từ 40 – 100 triệu/ml, mật độ trung bình ở cả hai buồng đếmMakler và Neubauer gần tương đương nhau (67,3 ± 19,3 so với 66,5 ± 13,4). Không có sự khác biệt giữa hai buồng đếm (P> 0,05).
- Ở nhóm có mật độ tinh trùng > 100 triệu/ml, mật độ trung bình ở buồng đếm Neubauer cũng gần như ở buồng đếm Makler (173,0 ± 54,2 so với 178,3 ± 56,3). Không có sự khác biệt giữa hai buồng đếm (P> 0,05).
Bảng 3.7. So sánh mật độ tinh trùng ở ba nhóm bằng buồng đếm Makler và máy đếm tự động SQA-IIB. Kết quả Mật độ TT Buồng đếm Makler X± SD Máy đếm tự động SQA-IIB X± SD So sánh < 40 (tr/ml) 25,5 ± 8,3 11,2 ± 5,4 P < 0,05 40 - 100 (tr/ml) 67,3 ± 19,3 72,4 ± 13,3 P > 0,05 >100 (tr/ml) 178,3± 56,3 135,3 ± 33,2 P < 0,05
Qua bảng 3.7. cho thấy:
- Với nhóm mật độ tinh trùng < 40 triệu/ml. Mật độ trung bình ở buồng đếm Makler cao hơn so với máy đếm tinh trùng tự động SQA-IIB (25,5 ± 8,3 so với 11,2 ± 5,4), sự khác biệt giữa hai phương pháp có ý nghĩa thống kê với P < 0,05.
- Với nhóm có mật độ tinh trùng từ 40 -100 triệu /ml. Mật độ trung bình ở máy đếm tinh trùng tự động SQA-IIB cũng tương đương như ở buồng đếmMakler (72,4 ± 13,3 so với 67,3 ± 19,3).Cũng không có sự khác biệt giữa hai phương pháp với P > 0,05.
- Với nhóm có mật độ tinh trùng > 100 triệu /ml. Mật độ trung bình ở buồng đếm Makler cao hơn máy đếm tinh trùng tự động SQA-IIB (178,3 ± 56,3 so với 135,3 ± 33,2).Sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với P < 0,05.
Bảng 3.8. So sánh mật độ tinh trùng ở ba nhóm bằng buồng đếm Neubauer và máy đếm tự động SQA-IIB. Kết quả Mật độ TT Buồng đếm Neubauer X± SD Máy đếm tự động SQA-IIB X± SD So sánh < 40 (tr/ml) 19,0 ± 8,4 11,2 ± 5,4 P < 0,05 40 - 100 (tr/ml) 66,5 ± 13,4 72,4 ± 13,3 P > 0,05 >100 (tr/ml) 173,0± 54,2 135,3 ± 33,2 P < 0,05 Bảng 3.8 cho thấy:
- Ở nhóm có mật độ tinh trùng < 40 triệu /ml, mật độ trung bình ở máy phân tích tinh trùng tự động SQA-IIB thấp hơn so với mật độ trung bình ở buồng đếm Neubauer (11,2 ± 5,4 so với 19,0 ± 8,4 ), sự khác biệt giữa hai phương pháp ở nhóm này có ý nghĩa thống kê (P< 0,05).
- Ở nhóm có mật tinh trùng từ 40 – 100 triệu/ml, mật độ trung bình ở buồng đếm Neubauer và máy đếm tinh trùng tự động SQA –IIB là tương đương nhau (66,5 ± 13,4 so với 72,4 ± 13,3). Không có sự khác biệt giữa hai phương pháp ở nhóm này với P >0,05.
- Ở nhóm có mật độ TT > 100 triệu/ml, mật độ trung bình giữa buồng đếm Neubauer và máy phân tích tự động SQA-IIB, có sự chênh lệch rõ (173,0 ± 54,2 so với 135,3 ± 33,2). Sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê P < 0,05.
3.3.2. So sánh kết quả mật độ và độ di động của 3 phương pháp.
Bảng 3.9. So sánh kết quả mật độ và độ di động của tinh trùng bằng 2 phương pháp: Buồng đếm Makler và Máy đếm tự động SQA-IIB
Kết quả Chỉ số chất lƣợng TT Máy đếm tự động SQA- IIB X± SD Buồng đếm Makler X± SD So sánh Mật độ TT (triệu/ml) 90,4 ± 55,4 111,4 ± 76,5 P < 0,05 TT di động tiến tới (PR) % 59,9 ± 13,8 55,5 ± 12,1 P <0,05
TT di động không tiến tới (NP) % 17,1 ± 5,5 7,5 ± 3,0 P < 0,001
TT không di động (IM) % 23,0 ± 14,9 37,0 ± 10,7 P < 0,001
Bảng 3.9 cho thấy:
- Mật độ tinh trùng ở máy đếm tự động SQA-IIB thấp hơn so với buồng đếm Makler (90,4 ± 55,4 so với 111,4 ± 76,5). Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (P <0,05).
- Tỉ lệ tinh trùng di động tiến tới (PR) của máy đếm SQA-IIB cao hơn so với buồng đếm Makler (59,9 ± 13,8 so với 55,5 ± 12,1). Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với P < 0,05.
- Tỉ lệ tinh trùng di động không tiến tới (NP) ở máy đếm SQA-IIB cao hơn gấp đôi so với buồng đếm Makler (17,1 ± 5,5 so với 7,5 ± 3,0). Sự khác biệt trên đều có ý nghĩa thống kê với P < 0,001.
- Tỉ lệ TT không di động của máy SQA-IIB thấp hơn so với buồng đếm Makler (23,0 ± 14,9 so với 37,0 ± 10,7). Sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với P < 0,001.
Bảng 3.10. So sánh kết quả mật độ và độ di động bằng 2 phương pháp: Buồng đếm Neubauer và buồng đếm Makler
Kết quả Chỉ số chất lƣợng TT Buồng đếm Neubauer X± SD Buồng đếm Makler X± SD So sánh Mật độ TT (tr/ml) 108,0 ±75,1 111,4 ±76,5 P > 0,05 TT di động tiến tới (PR) % 55,3 ± 12,0 55,5 ± 12,1 P > 0,05
TT di động không tiến tới (NP) % 7,8 ± 3,4 7,5 ± 3,0 P > 0,05
TT không di động (IM) % 36,9 ± 10,7 37,0 ± 10,7 P > 0,05
Nhận xét:
- Mật độ tinh trùng ở buồng đếm Makler và buồng đếm Neubauer là tương đương nhau (108,0 ± 175,1 so với 111,4 ± 76,5). Không có sự khác biệt giữa hai buồng đếm (P > 0,05).
- Tỉ lệ tinh trùng di động tiến tới (PR), tinh trùng di động không tiến tới (NP), và tinh trùng không di động (IM), của cả hai buồng đếm Neubauer và buồng đếm Makler là tương đương nhau (55,3 ± 12,0 so với 55,5 ± 12,1; 7,8 ± 3,4 so với 7,5 ± 3,0 và 36,9 ± 10,7 so với 37,0 ± 10,7). Tất cả đều không có sự khác biệt với P > 0,05.
Bảng 3.11. So sánh mật độ và độ di động của tinh trùng bằng 2 phương pháp: Máy đếm tự động SQA-IIB và buồng đếm Neubauer:
Kết quả Chỉ số chất lƣợng TT Máy đếm tự động SQA- IIB X± SD Buồng đếm Neubauer X± SD So sánh Mật độ TT (tr/ml) 90,4 ± 55,4 108,0 ± 75,1 P < 0,05 TT di động tiến tới (PR) % 59,0 ± 13,8 55,3 ± 12,0 P < 0,05
TT di động không tiến tới (NP) % 17,1 ± 5,5 7,8 ± 3,4 P < 0,001
TT không di động (IM) % 23,0 ± 14,9 36,9± 10,7 P < 0,001
Nhận xét:
- Mật độ trung bình của buồng đếm Neubauer cao hơn so với máy đếm SQA-IIB (108,0 ± 75,1 so với 90,4 ± 55,4). Sự khác biệt này có nghĩa thống kê với P < 0,05.
- Tỉ lệ tinh trùng di động tiến tới (PR), và tinh trùng di động không tiến tới của máy đếm tự động SQA-IIB đều cao hơn so với buồng đếm Neubauer (59,0 ± 13,8 so với 55,3 ± 12,0). Sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với P < 0,05.
- Tỉ lệ tinh trùng không di động (IM) ở máy đếm SQA-IIB thấp hơn so với buồng đếm Neubauer (23,0 ± 14,9 so với 36,9 ± 10,7). Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (P < 0,001).
Chƣơng 4 BÀN LUẬN
Trong những năm gần đây tình hình vô sinh ở Việt Nam cũng như trên thế giới ngày càng gia tăng. Tỉ lệ vô sinh do nam cũng ngang bằng vô sinh do nữ. Trong các bước tiến hành khám vô sinh nam thì xét nghiệm tinh dịch đồ là một xét nghiệm quan trọng để đánh giá chất lượng tinh dịch mà chủ yếu là chất lượng tinh trùng.
Trên thế giới đã có nhiều tác giả đã nghiên cứu, so sánh các phương pháp xét nghiệm tinh dịch đồ, kết quả cho thấy có sự khác biệt đáng kể về mật độ và độ di động của các phương pháp. Theo tác giả David Mortimer (1994), cho rằng do dặc tính của máy đếm tự động và các thuật toán cài ở máy cho nên các thế hệ máy thử tinh dịch đồ hiện nay chưa đạt được độ chính xác tương đương với quy trình chuẩn do người thực hiện [37]. Ngược lại theo tác giả Yeung và CS (1997) lại cho rằng phương pháp thủ công (bằng buồng đếm Makler và buồng đếm Neubauer) để đánh giá mật độ và độ di động là thiếu chính xác do tính chủ quan của người quan sát [69]. Điều này nhấn mạnh sự cần thiết phải tiêu chuẩn hoá và kiểm soát chất lượng để đảm bảo độ chính xác của các phương pháp đếm tinh trùng
Đến nay tổ chức Y tế thế giới (WHO), vẫn đang khuyến cáo phân tích tinh dịch bằng buồng đếm Neubauer “ Tiêu chuẩn vàng”. Nhưng thực tế hiện nay trên thế giới nói chung và ở Việt Nam nói riêng, ở mỗi trung tâm xét nghiệm vẫn làm theo một phương pháp riêng. Trong nghiên cứu này, chúng tôi so sánh mật độ và độ di động của những mẫu được các chuyên gia xét nghiệm ở Bộ môn Mô Phôi đánh giá là bình thường (theo tiêu chuẩn của WHO 2010), các mẫu được đánh giá bằng ba phương pháp, các phương pháp
này hiện nay đang được làm ở nhiều phòng xét nghiệm, đó là buồng đếm Neubauer, buồng đếm Makler và máy phân tích tự động SQA-IIB.
Do thời gian và kinh phí có hạn, chúng tôi chỉ tiến hành nghiên cứu được 30 mẫu tinh dịch.
4.1. Một số đặc điểm của đối tƣợng nghiên cứu
4.1.1. Về tuổi.
Trong 30 mẫu nghiên cứu , độ tuổi trung bình của bệnh nhân lấy mẫu là 32,4 ± 5,3, độ tuổi trung bình này cũng phù hợp với tuổi nam giới ở Việt Nam kết hôn hiện nay, trong đó người cao tuổi nhất là 45 và thấp nhất là 26, nhóm tuổi này cũng giống như độ tuổi trung bình trong nghiên cứu của tác giả Trevor G.và CS năm 2009 là 32,6 [62].
Trong nghiên cứu này có 43,3% bệnh nhân ≤ 30 tuổi và 50% bệnh nhân từ 31 – 40 tuổi và > 40 tuổi có 6,7%, có độ chênh lệch như vậy là do những mẫu nghiên cứu của chúng tôi chọn là những mẫu ở trong giới hạn bình thường, mà trong quá trình chọn mẫu chúng tôi thấy rằng những bệnh nhân > 40 tuổi phần lớn bất thường về mật độ và di động, hoặc có mật độ TT bình thường nhưng lại bất thường về di động, nhận xét này cũng phù hợp với nghiên cứu của tác giả Rachel Gurevich (2010), tác giả cho rằng chất lượng tinh dịch đạt tốt về mật độ và độ di động ở độ tuổi từ 25 đến 35, sau 45 tuổi thì chất lượng tinh dịch sẽ giảm đi rất nhiều [58].
4.1.2. Lấy tinh dịch và cách lấy mẫu nghiên cứu.
4.1.2.1. Cách lấy tinh dịch.
Thời gian kiêng xuất tinh trước xét nghiệm từ 3-5 ngày mà chúng tôi lấy mẫu làm nghiên cứu, được các tác giả thống nhất là khoảng thời gian hợp lý để cho một mẫu tinh dịch có kết quả xét nghiệm chính xác nhất.
Có nhiều phương pháp để lấy tinh dịch: tự lấy bằng tay (thủ dâm), giao hợp gián đoạn hoặc giao hợp bằng bao cao su chuyên dụng. Trong mỗi phương pháp có những ưu, nhược điểm riêng.
Phương pháp lấy tinh dịch bằng giao hợp gián đoạn thường chỉ dùng cho những trường hợp lấy tinh dịch bằng tay thất bại. Phương pháp này thường khó lấy đủ lượng tinh dịch xuất ra, và tinh dịch sau khi lấy không đảm bảo độ vô trùng. Theo nghiên cứu của tác giả Valli Dehghani và CS năm 2004, khi so sánh chất lượng tinh dịch bằng hai phương pháp là thủ dâm và giao hợp gián đoạn, kết quả là tinh trùng di động tiến tới của phương pháp thủ dâm là 58,76, ± 13,5%, còn của phương pháp giao hợp gián đoạn là 46,81 ± 15,7% (P< 0,001), về hình thái phương pháp thủ dâm là 63,36 ± 13,4%, còn phương pháp giao hợp gián đoạn là 54,03 ± 25%, (P< 0,001), về mật độ TT ở phương pháp thủ dâm cũng cao hơn (P< 0,05), tác giả đã kết luận chất lượng tinh dịch lấy bằng phương pháp thủ dâm cao hơn lấy tinh dịch bằng giao hợp gián đoạn [64].
Phương pháp giao hợp bằng bao cao su chuyên dụng, tinh dịch được dễ