Tinh dịch đồ là xét nghiệm cơ bản có thể cung cấp các thông tin chi tiết về các chỉ số của tinh trùng trong tinh dịch nam giới. Chất lượng mẫu tinh dịch có thể được đánh giá bằng máy phân tích tự động hoặc bằng các phương pháp thủ công (sử dụng buồng đếm). Hiện nay có nhiều loại buồng đếm và nhiều loại máy phân tích tự động. Trong số đó buồng đếm Makler, buồng đếm Neubauer và máy phân tích tự động SQA-IIB vẫn đang được nhiều trung tâm xét nghiệm sử dụng.
1.4.3.1. Buồng đếm Makler[55].
Buồng đếm Makler được phát minh bởi nhà khoa học Israel, Makler vào năm 1978, được thiết kế đặc biệt cho tinh dịch không pha loãng và đã được sử dụng trong nhiều phòng thí nghiệm trên thế giới.
Buồng đếm TT Makler có chiều sâu chỉ 10 µm, bằng 1/10 chiều sâu của buồng đếm tế bào thông thường, đây là loại buồng có chiều sâu nhỏ nhất hiện nay.
■Buồng đếm được làm từ hai mảnh kính quang học phẳng:
a. Thân buồng đếm có nền tảng là khối kim loại tròn (A) và 2 tay cầm (H). Trong phần trung tâm của phần đáy là một đĩa thủy tinh tròn (D), là nơi đặt mẫu. Ở phần ngoại vi của đĩa là 4 cọc có chất liệu bằng thạch anh (P), nâng cao hơn so với bề mặt của phần trung tâm là 10 μm.
b. Nắp buồng đếm là một tấm kính tròn, gắn bên trong của một vòng kim loại. Mặt dưới của tấm kính được khắc chìm với 100 ô vuông, diện tích mỗi ô vuông là 0,1x0,1mm, tổng diện tích 1mm2 .
Khi đặt nắp buồng đếm vào đúng vị trí của thân buồng đếm - tựa trên 4 cọc thạch anh, sẽ tạo ra khoảng trống dày 10 µm giữa hai bề mặt thủy tinh (của thân và nắp buồng đếm). Đây là vùng chứa mẫu tinh dịch để đọc kết quả.
Hình 1.5. Buồng đếm Makler
Thể tích của mỗi ô vuông nhỏ của buồng đếm là : 0,1 x 0,1 x 0,01mm = 1 x 10- 4mm3 = 1 x 10- 7 ml Tổng thể tích vùng đếm là 100 x 1 x 10- 7
= 10- 5 ml ■ Chuẩn bị buồng đếm:
Trước khi sử dụng, lớp kính phải hoàn toàn sạch sẽ và không bị bụi bẩn. ■ Phương pháp đếm: Trình bày ở phần phương pháp nghiên cứu.
1.4.3.2. buồng đếm Neubauer [61].
Buồng đếm Neubauer cải tiến được chia làm 2 buồng riêng biệt, mỗi buồng được khắc trên bề mặt những lưới ô vuông cực nhỏ có kích thước 3×3 mm, Neubauer được dùng với lam phủ đặc biệt, dày (0,44mm) dán chặt trên hai gờ của buồng đếm.
Hình 1.6. Buồng đếm Neubaer
Mỗi buồng đếm được chia thành 9 lưới ô vuông kích thước 1×1mm và được đánh số từ 1-9, thể tích 1 lưới ô vuông 100nl. Chiều sâu buồng đếm 100µm.
Bốn lưới ô vuông mang số 1, 3, 7 và 9, mỗi lưới có 4 hàng, mỗi hàng chia thành 4 ô vuông lớn có thể tích 6,25nl/ ô vuông.
Hai lưới ô vuông mang số 2 và 8, mỗi lưới có 4 hàng, mỗi hàng chia thành 5 ô vuông lớn, có thể tích 5nl/ ô vuông.
Lưới ô vuông số 5 (ô trung tâm) có 25 ô vuông lớn, một ô vuông lớn có 16 ô vuông nhỏ. Mỗi ô vuông lớn được giới hạn bởi 3 đường kẻ song song. Lưới ô vuông số 5 có 5 hàng, mỗi hàng được chia thành 5 ô vuông lớn có thể tích 4nl/ ô vuông.
Lưới ô vuông số 4, 5, 6 mỗi lưới có 5 hàng, thể tích một hàng 20nl
1.4.3.3. Máy đếm tinh trùng tự động SQA-IIB [56].
Hình 1.7. Máy phân tích tinh trùng tự động SQA-IIB.
SQA (Sperm Quality Analysis), máy phân tích chất lượng TT, là một thiết bị kết hợp một loạt các thuật toán để tính toán đánh giá các thông số của tinh dịch.
SQA có một tế bào quang điện phát hiện sự biến đổi về mật độ quang học gây ra bởi sự vận động của TT. Các tín hiệu tương tự được chuyển đổi kỹ thuật số để cung cấp các chỉ số của tinh trùng .
Các thông số được thực hiện trên máy phân tích TT tự động SQA-IIB. + Tổng số mật độ tinh trùng chức năng (TFSC- Total Funcitional Sperm Concentration). Đơn vị tính 0,1 triệu/ml. Thời gian trong 40 giây.
+ Tổng số mật độ tinh trùng triệu/ml.
+ Chỉ số di động của tinh trùng (SMI - Sperm Mobility Index).Là chỉ số tinh trùng có khả năng di động.
+ Tỉ lệ % tinh trùng có hình dáng bình thường.