KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.4. Kết quả khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng đến quá trình sinh tổng hợp protease của nấm mốc F1 và R5 trong môi trường dịch thể
protease của nấm mốc F1 và R5 trong môi trường dịch thể
Từ kết quả tuyển chọn sơ bộ các chủng có khả năng sinh tổng hợp protease, ta thấy chủng F1 và R5 có hoạt tính protease cao. Do đó ta chọn hai chủng này đi khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình sinh tổng hợp protease của chúng.
Để thu được nguồn enzyme dồi dào từ vi sinh vật, người ta phải nuôi cấy chúng trên các môi trường đặc hiệu. Về nguyên tắc, có hai phương pháp ni cấy vi sinh vật để thu enzyme: phương pháp nuôi cấy bề mặt và phương pháp nuôi cấy bề sâu. Việc nghiên cứu sản xuất enzyme bằng phương pháp bề mặt đã được tiến hành và cho kết quả tốt. Tuy nhiên, do sản xuất enzyme theo phương pháp bề mặt có nhiều nhược điểm hơn so với phương pháp ni cấy bề sâu. Chính vì vậy, trên thế giới việc sản xuất enzyme theo phương pháp bề mặt chỉ chiếm 10%, còn lại 90% được thay thế bằng phương pháp chìm. Do đó ta tiến hành nghiên cứu khả năng sinh tổng hợp enzyme protease của nấm mốc cũng từ môi trường lỏng (phương pháp chìm).
Qui trình thu nhận enzyme protease từ nấm mốc F1 và R5 như sau:
Nhân giống Môi trường lên men Thanh trùng (t = 121OC, τ = 30phút) Làm nguội về nhiệt độ phòng Lên men (t = 30OC, τ = 48h Nấm mốc
Để khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến khả năng sinh tổng hợp protease theo mục tiêu đề tài, ta chọn môi trường lên men là môi trường lỏng với thành phần sẽ được chọn thơng qua thực nghiệm. Q trình ni cấy nấm sợi để thu nhận enzyme được thực hiện ở 30OC, trong mơi trường có pH = 6 trên máy lắc với tốc độ 300 vịng/phút, trong các bình tam giác có dung tích 250ml chứa 100ml mơi trường.
Nấm sợi được nhân giống trên môi trường thạch malt để thu nhận bột bào tử rồi cấy vào môi trường lỏng trên với tỷ lệ nhất định không đổi.
Có rất nhiều yếu tố ảnh hưởng đến q trình sinh tổng hợp protease của vi sinh vật nói chung đã được trình bày ở mục [1.2.6.]. Nắm vững những quy luật ảnh hưởng của các yếu tố này chúng ta có thể điều khiển hoạt động sinh tổng hợp enzyme ở vi sinh vật theo ý muốn. Trong phạm vi của đề tài, ta chỉ xét ảnh hưởng của một số yếu tố. Sau đây là các kết quả nghiên cứu của về các điều kiện ảnh hưởng đến hoạt lực protease và tìm ra điều kiện tối thích cho q trình sinh tổng hợp protease.