KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.5. Xác định điều kiện tối ưu lên men nấm mốc sinh tổng hợp protease trong môi trường dịch thể
môi trường dịch thể
Bằng những thực nghiệm ở trên cho ta thấy rõ sự ảnh hưởng của một số yếu tố như: thành thần môi trường, thời gian lên men, pH mơi trường, tốc độ lắc đến q trình sinh tổng hợp protease của nấm mốc. Ngồi ra cịn nhiều yếu tố ảnh hưởng khác như: tỷ lệ giống, nhiệt độ nuôi… Trong phạm vi nghiên cứu của đề tài chỉ xét ảnh hưởng đồng thời của hai yếu tố là pH và thời gian ni đến q trình sinh tổng hợp protease của nấm mốc.
Từ kết quả thí nghiệm ở trên ta nhận thấy: Trong cùng điều kiện lên men như nhau, chủng F1 ln cho protease có hoạt tính cao hơn so với chủng R5. Do đó ta chọn chủng F1 để tiến hành tối ưu hóa điều kiện ni cấy.
Q trình lên men được tiến hành trong mơi trường MT4 ở 30OC, lắc với tốc độ 300vòng/phút. Sở dĩ chọn ở điều kiện nhiệt độ này là vì đây là điều kiện thích hợp cho hầu hết mọi vi sinh vật để sinh trưởng và phát triển cũng như sinh tổng hợp enzyme. Và chọn tốc độ lắc 300 vịng/phút là vì khi tiến hành ni ở tốc độ 350 vòng/phút, tốc độ lắc cao hơn nhiều tức tốn năng lượng hơn nhều, song hoạt lực enzyme tăng lên không đáng kể.
Các yếu tố được chọn để tối ưu: - pH của môi trường lên men: x1 - Thời gian lên men (h): x2
Mục tiêu: y →max
Qua việc xét ảnh hưởng của các yếu tố đến khả năng sinh tổng hợp protease của chủng F1, ta chọn khoảng biến thiên của các yếu tố được thể hiện ở bảng sau:
Bảng 3.4: Các mức của các yếu tố
Các yếu tố Mức dưới (-1)
Mức trên (+1)
Giá trị tại tâm (0)
Khoảng biến thiên
pH 5 7 6 1
Thời gian (h) 42 54 48 6
Số thí nghiệm cần phải làm tại biên: 22 = 4 Số thí nghiệm tại tâm: 3
Bảng 3.5 : Các thông số và kết quả thí nghiệm tại biên:
STT x1 x2 y
1 5 42 0.0715
2 7 42 0.1056
3 5 54 0.0921
4 7 54 0.1296
Bảng 3.6: Bảng ma trận quy hoạch thực nghiệm:
STT x0 x1 x2 x1x2 y
1 + - - + 0.0715
2 + + - - 0.1056
3 + - + - 0.0921
4 + + + + 0.1296