KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.4.1. Kết quả khảo sát ảnh hưởng của môi trường lên men đến khả năng sinh tổng hợp enzyme protease của chủng F1 và R
tổng hợp enzyme protease của chủng F1 và R5
Đối với mỗi một vi sinh vật, khả năng sinh tổng hợp protease thay đổi rất nhiều tùy thuộc vào môi trường. Hơn nữa môi trường cũng ảnh hưởng đáng kể đến tỷ lệ giữa các dạng protease được tổng hợp và tính chất của chúng. Do đó ta cần chọn mơi trường để q trình lên men cho protease có hoạt lực cao.
Dựa vào tài liệu tham khảo [12] và kết quả nghiên cứu [1, 2], ta có thể chọn mơi trường ni cấy nấm sợi sinh tổng hợp protease là MT4 [phụ lục 1].
Thật vậy ta tiến hành nuôi thử nghiệm chủng F1 và R5 trên 4 môi trường MT1, MT2, MT3, MT4 [phụ lục 1] ở cùng điều kiện pH = 6 để so sánh khả năng sinh tổng hợp protease của nấm mốc trên các mơi trường đó.
Dịch enzym thơ Lọc tách tế bào
Thu dịch lọc canh trường và tiến hành đo hoạt lực enzyme protease bằng phương pháp chuẩn độ foocmol trên các mơi trường đó theo thời gian. Kết quả thể hiện ở hình sau:
Hình 3.9: Ảnh hưởng của mơi trường lên men (MT1, MT2, MT3, MT4) đến khả năng sinh tổng hợp enzyme protease của chủng F1.
Nhận xét:
Qua đồ thị ta thấy:
- Đối với chủng nấm mốc F1, trong thời gian đầu (0 – 36h), khả năng sinh tổng hợp protease đều rất thấp và hầu như bằng nhau trong cả bốn môi trường. Sau khi lên men khoảng 48 h thì đã có sự khác biệt rõ rệt về hoạt lực enzyme protease giữa bốn môi trường. Môi trường MT4 với cơ chất cảm ứng là protein của bột đậu nành ở tỷ lệ thích hợp có hoạt lực enzyme protease cao nhất với thời gian lên men là 48h. Mơi trường MT3 có chứa cơ chất cảm ứng là protein của thịt (peptone) cho hoạt lực enzyme protease tương đối. Cịn trong hai mơi trường cịn lại cho hoạt lực enzyme protease không đáng kể.
- Đối với chủng nấm mốc R5, trong thời gian đầu (0 – 24h), trong cả bốn môi trường, khả năng sinh tổng hợp protease đều rất thấp. Khi kéo dài thời gian lên men đến 36h thì hoạt lực enzyme protease có tăng nhưng khơng đáng kể. Đến khi thời gian lên men đạt 48h thì hoạt lực enzyme protease trên mơi trường MT3 và MT4 tăng lên vượt bật và đạt giá trị cực đại ở môi trường MT4, môi trường MT3 cũng cho hoạt lực tương đối cao nhưng thấp hơn so với mơi trường MT4, cịn hai mơi trường còn lại cho hoạt lực enzyme protease khá thấp.
Kết quả ở trên có thể được lý giải như sau: Protease là một enzyme cảm ứng, do đó nếu mơi trường có cơ chất cảm ứng protein thì sẽ đẩy nhanh quá trình sinh tổng hợp enzyme này. Và tác động cảm ứng chỉ đạt hiệu quả cao ở một liều lượng nhất định nào đó.