2.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.2.1. Xác lập quy trình phân tích PPCPs 2.2.1. Xác lập quy trình phân tích PPCPs
2.2.1.1. Tối ưu hóa các điều kiện phân tích PPCPs bằng LC-MS/MS
Nghiên cứu tối ưu hóa điều kiện phân tích PPCPs trong mẫu nước và trầm tích sơng Cầu được thực hiện tại Phịng thí nghiệm Hóa lý Mẫu chuẩn – Viện Đo lường Việt Nam, với hệ thống phân tích là hệ LC-MS/MS (Model: HPLC 1260 infinity/6420 Triple Quad LC-MS/MS) với đầu dò khối phổ Agilent 6420 Triple Quadrupole LC/MS System của hãng Agilent (US):
34
a. Tối ưu hóa điều kiện khối phổ
Có rất nhiều các phương pháp khác nhau để xác định hàm lượng PPCPs trong các mẫu môi trường như sắc ký lỏng khối phổ (LC-MS), sắc ký khí khối phổ (GC-MS), sắc ký khí đầu dị bắt điện tử (GC-ECD), sắc ký lỏng hiệu năng cao đầu dò khối phổ (UPLC-MS), sắc ký lỏng hai lần khối phổ (LC-MS/MS). Trong số đó thì phương pháp sử dụng LC-MS/MS thường cho độ tin cậy và độ nhạy cao, phù hợp dùng để phân tích PPCPs. Để xác định được đồng thời các kháng sinh và thu được cường độ tín hiệu cao trên LC-MS/MS thì cần phải lựa chọn được các điều kiện tối ưu cho thiết bị. Tối ưu hóa các điều kiện khối phổ là xem xét, lựa chọn và đánh giá các thông số chính bao gồm: (1) Số khối m/z của chất phân tích; (2) Nguồn ion hóa và điều kiện hóa hơi; (3) Điều kiện phân giải phổ.
Tối ưu hóa m/z
Trong cơng thức cấu tạo của CAF, CBM, SMX và CIP có chứa nhiều nhóm amin, các nhóm này dễ nhận proton H+ trong mơi trường axit để hình thành ion [M-H]+, vì vậy lựa chọn chế độ ion hóa dương (positive ionization). Chính vì vậy mà ion mẹ (precursor ion) của các chất này có tỉ khối m/z lớn hơn khối lượng phân tử 1 đơn vị. Việc xác định ion mẹ của CAF, CBM, SMX và CIP được thực hiện bằng phương pháp quét ion khi bơm từng chuẩn đơn ở nồng độ 1 ppm trong dung môi methanol và nước (50 : 50). Dung dịch chuẩn được bơm trực tiếp bằng xi lanh, sau đó được đẩy vào buồng ion hóa nhờ một vịng mẫu 3 µL và dịng dung mơi pha động (MeOH : H2O = 50 : 50) với tốc độ 300 µL/phút. Đầu dị khối phổ QQQ đặt ở chế độ quét ion MS2 với dải quét phổ m/z từ 100 đến 400.