STT Dịng vi khuẩn Đặc điểm tế bào Hình dạng Gram Di động 1 KP1B Bầu dục - +++
2 KP2B Cầu không đều - +++ 3 KP3B Cầu không đều - ++ 4 KP4B Cầu không đều - +++ 5 KP5B Cầu không đều - +++
6 KP6B Bầu dục - +
7 KP7B Bầu dục - +
8 KP8B Cầu không đều - +
9 KP9B Cầu không đều - ++ 10 KP10B Cầu không đều - +++ 11 KP11B Cầu không đều - ++ 12 KP12B Cầu không đều - + 13 KP13B Cầu không đều - ++ 14 KP14B Cầu không đều - +++ 15 KP15B Cầu không đều - +++ 16 KP16B Cầu không đều - +++
17 KP17B Que ngắn - +
18 KP18B Que ngắn - +
19 KP19B Cầu không đều - +
20 KP20B Que ngắn - +
21 KP21B Cầu không đều - +++
22 KP22B Bầu dục - + 23 KP23B Que ngắn - + 24 KP24B Que ngắn - + 25 KP25B Que ngắn - + 26 KP26B Que dài - + 27 KP27B Bầu dục - + 28 KP28B Bầu dục - + 29 KP29B Bầu dục - +
30 KP30B Cầu không đều - +++ 31 KP31B Cầu không đều - + 32 KP32B Cầu không đều - +++
Trang 44
33 KP33B Cầu không đều - +++
34 KP34B Bầu dục - +
35 KP35B Bầu dục - +
36 KP36B Cầu không đều - +++
37 KP37B Bầu dục - +
38 KP38B Que - +
39 KP39B Cầu không đều - ++ 40 KP40B Cầu không đều - ++ 41 KP41B Cầu không đều - +++
42 KP42B Bầu dục - +++
43 KP43B Cầu không đều - +++
44 KP44B Bầu dục - +
45 KP45B Bầu dục - +++
46 KP46B Cầu không đều - +++
47 KP47B Bầu dục - ++
48 KP48B Cầu không đều - +++
Hình 4.4:Kết quả nhuộm gram và hình dang tế bào dịng KP26B và hình dang tế bào dịng KP26B
Hình 4.5: Kết quả nhuộm gram và hình dang tế bào dịng KP1B và hình dang tế bào dịng KP1B
Hình 4.6: Kết quả nhuộm gram và hình dang tế bào dịng KP27B và hình dang tế bào dịng KP27B
Hình 4.7: Kết quả nhuộm gram và hình dang tế bào dịng KP44B và hình dang tế bào dòng KP44B
Trang 45
4.2 Kết quả hòa tan lân của các dòng vi khuẩn
Tất cả các dòng vi khuẩn phân lập đều được nuôi trên môi trường
Aleksandrov lỏng để xác định lượng lân hòa tan (mgP2O5/l) ở mỗi dòng.
4.2.1 Kết quả hòa tan lân ở 5 ngày
Dựa vào kết quả thu được (bảng 1 phần phụ lục) và kết quả thống kê
(bảng 5 phần phụ lục), cho thấy lượng P2O5 hịa tan giữa các dịng vi khuẩn có khác biệt.
So sánh với mẫu đối chứng (5,55 mgP2O5/l) hàm lượng lân hịa tan trong 5 ngày ni của 35/48 (72,9%) dịng vi khuẩn khác biệt có ý nghĩa thống kê.
Có 9/35 (25,7%) dịng vi khuẩn có khả năng hòa tan cao hơn 80 mgP2O5/l. Trong đó có 2 dịng KP30B: 139,07 mgP2O5/l và KP41B: 114,47 mgP2O5/l có khả năng hịa tan lân khó tan cao hơn 100 mgP2O5/l và có sự khác biệt với các dịng cịn lại.
Có 26/35 (74,3%) dịng có khả năng hòa tan từ 36 mgP2O5/l đến 80
mgP2O5/l, có sự khác biệt với nhau và khác biệt có ý nghĩa so với đối chứng.
Trang 46
Hàm lượng lân hòa tan tăng lên sau 5 ngày ủ trong dịch nuôi vi khuẩn tăng rất cao và có sự khác biệt hoàn toàn so với đối chứng dòng KP30B:
139,07 mgP2O5/l; KP41B: 114,47 mgP2O5/l.
So sánh kết quả trên với các nghiên cứu trước của Xiufang et al. (2006) hai dòng KNP413, KNP414 được phân lập từ đất núi Tianmu, tỉnh Chiết
Giang (Trung Quốc) và Bacillus mucilaginosus AS1.153 đang được ứng dụng làm phân vi sinh ở Trung Quốc, hai dịng này có khả năng hịa tan lân sau 5 ngày nuôi (KNP413: 62 mgP2O5/l; KNP414: 114 mgP2O5/l). Đoàn Chiến
Thắng (2010) phân lập 10 dòng vi khuẩn trên đất bazan đỏ ở Đak Lak thì dịng M7 (18,09 mgP2O5/l) có khả năng hòa tan lân đạt tốt nhất vào 5 ngày sau khi
ủ. Thân Ngọc Hiếu (2010) phân lập được 22 dịng vi khuẩn có khả năng hịa
tan lân từ núi đá vôi thuộc Hà Tiên – Kiên Giang thì có 11 dịng có khả năng hịa tan lân sau 5 ngày nuôi (CH10C: 12,08 mgP2O5/l). Phan Thị Nhã (2009) 7 dòng vi khuẩn nội sinh phân lập từ rể, thân, lá cây khóm ở thành phố Vị
Thanh, tỉnh Hậu Giang có khả năng hịa tan lân sau 5 ngày ni, trong đó có dịng N3 hịa tan lân rất cao (141,27 mgP2O5/l) và Keneni et al. (2010) phân lập được 5 dòng vi khuẩn có đặc điểm giống Pseudomonas sp. ở vùng rể đậu
nành ở Ethiopa có khả năng hịa tan lân vào 5 ngày ni, hàm lượng lân hòa tan có ý nghĩa thống kê so với đối chứng. Các dòng vi khuẩn mà chúng tơi
phân lập được hầu hết có khả năng hịa tan lân khó tan tương đối cao như dịng KP30B: 139,07 mgP2O5/l; KP41B: 114,47 mgP2O5/l.
4.2.2 Kết quả hòa tan lân ở 10 ngày
Dựa vào kết quả thu được (bảng 2 phần phụ lục) và kết quả thống kê
(bảng 6 phần phụ lục), cho thấy lượng P2O5 hịa tan giữa các dịng vi khuẩn có khác biệt.
So sánh với mẫu đối chứng (12,02 mgP2O5/l) hàm lượng lân hòa tan trong 10 ngày ni của 41/48 (85,4%) dịng vi khuẩn khác biệt có ý nghĩa thống kê.
Trong đó, 24/41 (58,5%) dịng vi khuẩn có khả năng hòa tan cao hơn
Trang 47
mgP2O5/l. Trong đó, có 3 dịng KP29B, KP41B và KP18B có khả năng hịa tan lân rất cao (KP29B: 211,50 mgP2O5/l; KP41B: 208,62 mgP2O5/l và KP18B: 194,70 mgP2O5/l), có sự khác biệt hồn tồn với các dịng cịn lại.
Có 17/41 (41,5%) dịng có khả năng hịa tan từ 34 mgP2O5/l đến 80
mgP2O5/l, có sự khác biệt với nhau và khác biệt có ý nghĩa so với đối chứng.
Hình 4.9: Kết quả hịa tan lân trung bình của một số dòng vi khuẩn ở 10 ngày Hàm lượng lân hịa tan trong dịch ni vi khuẩn tăng rất cao và có sự khác biệt hồn toàn so với đối chứng (KP29B: 211,50 mgP2O5/l; KP41B: 208,62 mgP2O5/l; KP18B: 194,70 mgP2O5/l).
So sánh kết quả trên với các nghiên cứu trước của Thân Ngọc Hiếu (2010) phân lập được 11 dòng vi khuẩn ở núi đá vôi thuộc Hà Tiên – Kiên
Giang có khả năng hịa tan lân sau 10 ngày nuôi (HS4A: 20,88 mgP2O5/l; CH10C: 21,52 mgP2O5/l). Phan Thị Nhã (2009) 6 dòng vi khuẩn nội sinh phân lập từ rể, thân, lá cây khóm ở thành phố Vị Thanh, tỉnh Hậu Giang có khả
năng hịa tan lân tốt sau 10 ngày nuôi (L2: 65,14 mgP2O5/l; L9: 68,19 mgP2O5/l; L13: 86,48 mgP2O5/l; B5: 82,53 mgP2O5/l) và Keneni et a. (2010) phân lập được 5 dịng vi khuẩn có đặc điểm giống Pseudomonas sp. ở vùng rể
đậu nành ở Ethiopa. Trong đó, có 3 dịng Meh – 101, Meh – 303, Meh – 305
Trang 48
19,8 mgP2O5/l, 17 mgP2O5/l, 19,5 mgP2O5/l. Các dòng vi khuẩn mà chúng tôi phân lập được hầu hết đều cao hơn các nghiên cứu trước điển hình như dịng KP29B: 211,50 mgP2O5/l; KP41B: 208,62 mgP2O5/l; KP18B: 194,70 mgP2O5/l có khả năng hịa tan lân khó tan rất cao.
4.2.3 Kết quả hòa tan lân ở 15 ngày
Dựa vào kết quả thu được (bảng 3 phần phụ lục) và kết quả thống kê
(bảng 7 phần phụ lục), cho thấy lượng P2O5 hòa tan giữa các dịng vi khuẩn có khác biệt.
So sánh với mẫu đối chứng (14,16 mgP2O5/l) hàm lượng lân hịa tan trong 5 ngày ni của 35/48 (72,9%) dịng vi khuẩn khác biệt có ý nghĩa thống kê.
Trong đó, 18/37 (48,6%) dịng vi khuẩn có khả năng hịa tan cao hơn
80 mgP2O5/l. Nhiều dịng có khả năng hòa tan lân cao hơn 200 mgP2O5/l. Trong đó, dịng KP28B có khả năng hịa tan lân rất cao (KP28B: 251,32
mgP2O5/l), có sự khác biệt hồn tồn với các dịng cịn lại. Các dòng KP20B: 222,86 mgP2O5/l; KP35B: 220,10 mgP2O5/l; KP14B: 210,34 mgP2O5/l; KP29B: 208,07 mgP2O5/l; KP27B: 204,81 mgP2O5/l, mặc dù khơng có sự với nhau nhưng chúng có sự khác biệt hoàn toàn với các dòng còn lại và có ý nghĩa thống kê so với đối chứng.
Có 19/37 (51,4%) dịng có khả năng hòa tan từ 28 mgP2O5/l đến 80
Trang 49
Hình 4.10: Kết quả hịa tan lân trung bình của một số dòng vi khuẩn ở 15 ngày Hàm lượng lân hịa tan sau 15 ngày ủ trong dịch ni vi khuẩn tăng rất cao và có sự khác biệt hồn toàn so với đối chứng (KP28B: 251,32 mgP2O5/l; KP20B: 222,86 mgP2O5/l; KP35B: 220,10 mgP2O5/l; KP14B: 210,34 mgP2O5/l; KP29B: 208,07 mgP2O5/l; KP27B: 204,81 mgP2O5/l).
So sánh kết quả này với Keneni et al. (2010) hàm lượng lân hòa tan sau 15 ngày nuôi vẫn tăng đối với 3 dòng Meh – 101, Meh – 303, Meh – 305.
Dòng Meh – 101 tăng từ 19,8 mgP2O5/l lên 23 mgP2O5/l, dòng Meh – 303 tăng từ 17 mgP2O5/l lên 22 mgP2O5/l, dòng Meh – 305 tăng từ 19,5 mgP2O5/l lên 25 mg/l.
Sau 5, 10 và 15 ngày nuôi, hàm lượng lân trong dịch nuôi vi khuẩn tăng nhanh và khác biệt có ý nghĩa thống kê với đối chứng. Điều này chứng tỏ
rằng, hàm lượng P2O5 sinh ra trong các thí nghiệm có sự tham gia của vi khuẩn chuyển hóa từ dạng khó tan thành dạng dễ tan.
Các dịng vi khuẩn KP48B, KP3B, KP39B, KP38B, KP34B, KP32B, KP31B, KP26B, KP25B, KP24B, KP1B và KP17B có lượng lân hịa tan cao nhất ngày thứ 5 và giảm xuống vào ngày 10 và ngày 15 có thể là do các dịng vi khuẩn có khả năng thích nghi ngay sau 5 ngày nuôi trong môi trường Aleksandorv lỏng và phát triển mạnh dẫn đến khả năng hòa tan lân khó tan
Trang 50
cao nhưng sau đó lại giảm dần có thể là sinh khối của vi khuẩn bị giảm do môi trường nuôi bị cạn kiệt dinh dưỡng hay ngộ độc bởi sản phẩm trung gian của q trình hịa tan lân khó tan.
Các dịng vi khuẩn có lượng lân hòa tan cao nhất vào ngày thứ 10 và ngày thứ 15 có thể khả năng thích nghi chậm. Từ đó, ảnh hưởng đến khả năng hịa tan lân khó tan cũng chậm hơn.
Hình 4.11: Kết quả hịa tan lân của một số dòng vi khuẩn ở 5, 10 và 15 ngày.
4.3 Kết quả hòa tan kali của các dòng vi khuẩn
Từ 48 dòng vi khuẩn phân lập được, tiến hành xác định hàm lượng kali phóng thích (mgK2O/l) ở 10 ngày sau khi ủ. Qua so sánh hàm lượng kali
phóng thích do vi khuẩn (bảng 4), thấy rằng 48 dịng vi khuẩn có lượng kali hòa tan cao hơn mẫu đối chứng. Hàm lượng kali hịa tan trong dịch ni vi
khuẩn có thể là do hoạt động của vi khuẩn đã chuyển hóa từ các dạng kali khó tan.
Từ kết quả phân tích kali cho thấy, 15/48 (31,3%) dịng vi khuẩn có khả năng hịa tan kali trên 40 mgK2O/l. Trong đó có 5 dịng có khả năng hòa tan
kali cao (KP36B: 55,719 mgK2O/l; KP8B: 54,774 mgK2O/l; KP35B: 54,754 mgK2O/l; KP24B: 53,307 mgK2O/l; KP22B: 52,241 mgK2O/l).
Trang 51
Có 17/48 (35,4%) dịng vi khuẩn có khả năng hòa tan kali từ 30 mgK2O/l đến 40 mgK2O/l (KP6B: 39,176 mgK2O/l; KP31B: 38,854 mgK2O/l; KP23B: 38,291 mgK2O/l; KP2B: 37,186 mgK2O/l)
Có 14/48 (29,2%) dịng vi khuẩn có khả năng hịa tan kali thấp hơn 30 mgK2O/l.
Kết quả thu được phù hợp với các nghiên cứu trước đây của Xiufang et al. (2006) 2 dịng KNP413 và KNP414 có khả năng hịa tan kali tương đối cao (KNP413: 93 mgK2O/l, KNP414: 130 mgK2O/l), Quang Thị Chi (2009) phân lập được 8 dòng vi khuẩn có khả năng hòa tan kali trong đất các tỉnh đồng
bằng sông Cửu Long và vùng Đơng Nam bộ, có dịng 1A có khả năng hịa tan cao nhất với 21,62 mgK2O/l sau 9 ngày nuôi và Thân Ngọc Hiếu (2010) có 11 dịng vi khuẩn có khả năng hịa tan kali, hầu hết đều có hàm lượng kali rất cao (TD3C: 76,49 mgK2O/l; HS4A: 60,76 mgK2O/l; CH10B 64,84 mgK2O/l và CH10C: 66,12 mgK2O/l).
Hình 4.12: Kết quả hịa tan kali trung bình của một số dịng vi khuẩn ở 10 ngày
Trang 52
* Sau khi phân tích hàm lượng lân – kali hịa tan ở 48 dịng vi khuẩn, có 17
dịng có khả năng hịa tan lân và kali cao (>90 mgP2O5/l và >30mgK2O/l)