Kết luận: Hệ dung mơi Hexane:Acetone rửa giải cột SPE có hiệu suất thu hồi tối
ưu với tỉ lệ là 7:3 (v:v).
5.4.2. Phát triển phƣơng pháp xác định Trifluralin trong thủy sản
GC/µECD và thẩm định quy trình đã xây dựng[1].
Phƣơng pháp. 0 10 20 30 40 50 60 70 80 0 1 2 3 4 5 6 H iệ u su ất % Tỉ lệ dung môi 9:1 8:2 7:3 6:4 5:5
Điều kiện chạy máy GC/µECD.
- Sample inlet: GC.
- Injection source: GCALS. - Oven: on.
- Equilibration time: 2 min.
- Oven program: 80oC for 0 min. Sau đó tăng 20oC/phút tới 165oC giử 1 phút.
Sau đó tăng 1,5o
C/phút tới 180oC giử 0 phút. Sau đó tăng 100oC/phút tới 300oC giử 3,55 phút. - Post run temp: 300oC.
Front Injection:
- Syinge size: 10µL. - Injection volume: 1µL. - Injection repetitions: 1. - Solven A washes (pre inj): 0. - Solven A washes (post inj): 3. - Solven volume A: 8µL.
10g mẫu + 10g Na2SO4
Thêm 25mL
Hexane:Acetone (1:2)
Siêu âm 40phút, tách lấy dung dịch, phần xác thêm
25mL Hexane:Acetone (1:2) , siêu âm 40 phút, cô
quay. Thêm 10mL n-Hexane ta được dịch chiết . Chuẩn bị cột SPE: 5g Florisil + 3g Na2SO4 Kích hoạt cột bằng 10mL n-Hexane, tốc độ dung môi
qua cột là 10ml/phút
Cho dịch chiết mẫu qua cột.
Rửa giải lại cột với 50mL n-Hexane:Acetone (7:3),
tốc độ rửa giải là 0,5mL/phút.
Cô quay đến khi cạn dung mơi và hịa tan lại với
100µL n-Hexane và chuyển vào Vial.
- Sample wash: 3.
Front inlet SS:
- Heater: on 250oC. - Pressure: on 11,986psi. - Total flow: on 20,928ml/min. - Septum purge flow: on 3ml/min. - Mode: split.
- Gas saver: on 20mL/min after 3 min. - Split ratio: 20:1.
- Split flow: 17,075mL/min.
Front detector µECD.
- Heater: on 300oC.
- Makeup flow (N2): on 45mL/min. - Electrometer: off.
Signal:
- Front signal: Save on 50Hz/0,04min.
Tính kết quả: m V C C x. Với: - C (ppb): Nồng độ cần xác định.
- Cx (ppb): Nồng độ đo được bằng GC/µECD. - V (µL): Thể tích cuối cùng được đo.
- m (g): Khối lượng mẫu đem phân tích.
5.4.2.1. Thí nghiệm 6: Thí nghiệm về độ tuyến tính của quy trình đã phát triển . a. Mục đích.
Xây dựng đường chuẩn, khảo sát độ tuyến tính, xác định hệ số tương quan R2. Đường chuẩn này dùng để tính kết quả trong các thí nghiệm 7, 8, 9, 10, 11.
b. Pha các hệ dung môi và dung dịch chuẩn làm việc.
- Pha hệ dung môi Hexan:Aceton (1:2): dùng ống đong 250mL đong chính xác 200mL Hexane cho vào bình định mức, tiếp tục đong 200mL Acetone cho vào bình định mức, tiến hành siêu âm 15 phút.
- Pha dung dịch chuẩn làm việc 100ppb từ dung dịch chuẩn trung gian: Dùng
micropipet 1000µL hút 1000µL dung dịch chuẩn trung gian cho vào ống pha chuẩn có sẵn 10mL Hexan. Lắc xốy kĩ ống pha chuẩn.
c. Thực nghiệm.
Tiến hành thí nghiệm với 5 mẫu từ S1 tới S5, nồng độ thêm vào tương ứng là 0.3ppb (30µL dung dịch 100ppbs), 0.6ppb (60µL dung dịch 100ppb), 1.2ppb (120µL dung dịch 100ppb), 1.8ppb (180µL dung dịch 100ppb), 3.0ppb (300µL dung dịch 100ppb). Tiến hành xác định lại nồng độ bằng GC/µECD. Xác định độ tuyến tính.
d. Kết quả.
Bảng 13: Bảng kết quả thí nghiệm 7
Nồng độ (ppb) 0.3 0.6 1.2 1.8 3