Thêm 5ml Acetonitril
Vortex 1 phút
Lắc ngang 20 phút (300 lần/phút) Ly tâm 20 phút (5000 vòng/phút, 25oC)
Dịch chiết cho vào ống Falcon 50 ml Xác thịt
Dịch chiết (lần 2)
Hoàn nguyên bằng 1ml n-Hexan
Lọc qua đầu col 0.2µm cho vào Vial Hút 1µl phân tích GC
Vortex 1 phút
Cơ quay chân khơng đến khô
Thêm vào ống Falcon 5 ml Chloroform và 5 ml H2O
Vortex 1 phút
Để yên tách lớp
Hút lấy lớp dưới cho vào bình quả cầu 100ml Thêm 5 ml acetonitril
Vortex 1 phút
Lắc ngang 20 phút (300 lần/phút) Ly tâm 20 phút (5000 vòng/phút,
o
Cân 2 g mẫu cá đã nghiền đồng nhất
Xác thịt
Bỏ
Hỗn hợp tách 2 lớp
b. Quy trình chiết tách 2
Nguyên tắc và các thao tác thực hiện chiết tách.
Nguyên tắc: Dichlorvos được ly trích khỏi sản phẩm thủy sản bằng
dung dịch đệm acetone – acetonitrile (1:1). Dịch chiết sau đó được cơ quay
đến khô ở 45 C. Dịch chiết thu được cho qua đầu lọc 0,2 m rồi đem phân
tích bằng GC-ECD.
Chuẫn bị mẫu: Nghiền đồng nhất ít nhất 15 g mẫu. Bảo quản dung dịch trong tủ đông (-20 oC) đến khi sử dụng. Khi sử dụng mẫu cá phải được rã đơng hồn toàn.
Chuẩn bị mẫu thử: Cân 3 g mẫu đã được nghiền đồng nhất vào ống
nghiệm ly tâm nhựa 15 ml. Tiến hành ly trích Dichlorvos.
Chuẩn bị mẫu kiểm sốt có thêm chuẩn: Cân 3 g mẫu trắng đã được
nghiền đồng nhất vào ống nghiệm ly tâm nhựa 15 ml. Thêm 50 l dung dịch chuẩn Dichlorvos nồng độ 1 ppm. Tiến hành ly trích Dichlorvos.
Ly trích Dichlorvos
- Cân thật chính xác 3 g mẫu cá đã được nghiền đồng nhất vào ống
nghiệm ly tâm bằng nhựa có nấp đậy 15 ml.
- Thêm vào ống nghiệm 5 ml acetonitril : acetone (1:1). Khuấy mạnh bằng máy lắc vortex khoảng 1 phút, rồi lắc ngang bằng máy với vận tốc 300 lần/phút khoảng 20 phút. Tiếp theo đem ly tâm 5000 rpm trong 20 phút. Thu lấy dịch trong, cho vào bình cầu quả lê 100ml thật sạch.
- Phần cặn còn lại được thêm tiếp 5 ml acetonitril : acetone (1:1), Khuấy mạnh bằng máy lắc vortex khoảng 1 phút, rồi lắc ngang bằng máy với vận tốc 300 lần/phút khoảng 20 phút. Tiếp theo đem ly tâm 5000 rpm trong 20 phút. Thu lấy dịch trong cho vào bình cầu chứa dịch chiết ban đầu. Phần cặn
sau cùng được bỏ.
- Sau đó đem bình cầu cơ quay đến khơ ở 45oC.
- Hoàn nguyên bằng 1 ml n-hexan. Chú ý lắc đều bình cầu quả lê để
hòa tan hết cặn trong bình.
Tóm tắt q trình ly trích Dichlorvos