c. Quy trình chiết tách 3
Nguyên tắc và các thao tác thực hiện chiết tách
Nguyên tắc: Dichlorvos được ly trích khỏi sản phẩm thủy sản bằng
dung dịch Ethyl acetate. Dịch chiết sau đó được cơ quay đến khô ở 45 C.
Dịch chiết thu được cho qua đầu lọc 0,2 m rồi đem phân tích bằng GC-ECD.
Chuẫn bị mẫu: Nghiền đồng nhất ít nhất 15 g mẫu. Bảo quản dung dịch trong tủ đông (-20 oC) đến khi sử dụng. Khi sử dụng mẫu cá phải được rã đơng hồn tồn.
Chuẩn bị mẫu thử: Cân 3 g mẫu đã được nghiền đồng nhất vào ống
nghiệm ly tâm nhựa 15 ml. Tiến hành ly trích Dichlorvos.
Thêm 5ml Acetoitril : Acetone (1:1) Vortex 1 phút
Lắc ngang 20 phút (300 lần/phút) Ly tâm 20 phút (5000 vịng/phút, 25oC)
Dịch chiết cho vào bình cầu 100 ml Xác thịt
Dịch chiết (lần 2)
Hồn ngun bằng 1ml n-Hexan
Lọc qua đầu col 0.2µm cho vào Vial Hút 1µl phân tích GC
Vortex 1 phút
Cô quay chân không đến khô
Thêm 5 ml Acetonitril : Acetone Vortex 1 phút Lắc ngang 20 phút (300 lần/phút) Ly tâm 20 phút (5000 vòng/phút, o Cân 2 g cá đã nghiến đồng nhất Xác thịt Bỏ Hỗn hợp tách 2 lớp Hỗn hợp tách 2 lớp
Chuẩn bị mẫu kiểm sốt có thêm chuẩn: Cân 3 g mẫu trắng đã được
nghiền đồng nhất vào ống nghiệm ly tâm nhựa 15 ml. Thêm 50 l dung dịch chuẩn Dichlorvos nồng độ 1 ppm. Tiến hành ly trích Dichlorvos.
Ly trích Dichlorvos
- Cân thật chính xác 3 g mẫu cá đã được nghiền đồng nhất vào ống
nghiệm ly tâm bằng nhựa có nấp đậy 15 ml.
- Thêm vào ống nghiệm 5 ml ethyl acetate. Khuấy mạnh bằng máy lắc vortex khoảng 1 phút, rồi lắc ngang bằng máy với vận tốc 300 lần/phút khoảng 20 phút. Tiếp theo đem ly tâm 5000 rpm trong 20 phút. Thu lấy dịch trong, cho vào bình cầu quả lê 100ml thật sạch.
- Phần cặn còn lại được thêm tiếp 5 ml ethyl acetate, Khuấy mạnh bằng máy lắc vortex khoảng 1 phút, rồi lắc ngang bằng máy với vận tốc 300 lần/phút khoảng 20 phút. Tiếp theo đem ly tâm 5000 rpm trong 20 phút. Thu lấy dịch trong cho vào bình cầu chứa dịch chiết ban đầu. Phần cặn sau cùng
được bỏ.
- Sau đó đem cơ quay đến khơ ở 45oC.
- Hồn ngun bằng 1 ml n-hexan. Chú ý lắc đều bình cầu quả lê để hịa tan hết cặn trong bình.
Tóm tắt q trình ly trích Dichlorvos