Hình 4 .10 Đồ thị diện tích peak ở các chu trình nhiệt độ khác nhau
Hình 4.15 : Đồ thị đường chuẩn cho mẫu nước
3.2 Phương pháp nghiên cứu
3.2.5 Thí nghiệm 5: Thí nghiệm xác định thời gian tồn lưu của Dichlorvos
trong cá tra và mẫu nước.
3.2.5.1 Đối tượng nghiên cứu:
Chuẩn bị cá: Cá thí nghiệm được mua từ trại giống ở Cần Thơ, có khối
lượng từ 15- 20 g/con. Chọn cá khỏe như có màu sắc tươi sáng tự nhiên, đồng
cỡ, hoạt động khỏe mạnh, không bị dị tật và khơng có dấu hiệu bệnh tật. Thức ăn sử dụng trong thí nghiệm viên dạng nổi có hàm lượng đạm 30 %, mỗi ngày cho cá ăn 2 lần (lúc 8 giờ và 16 giờ), khẩu phần ăn từ 5-6 % khối
lượng thân. Hệ thống thí nghiệm được thiết kế có sục khí liên tục, có thể cho nước chảy liên tục.
Thuần dưỡng cá 1 tuần.
3.2.5.2 Phương pháp gây nhiễm Dichlorvos
Cá được gây nhiễm Dichlorvos 2 lần trong q trình thí nghiệm.
Gây nhiễm lần 1: giảm mức nước trong bể xuống 30 % và cho Dichlorvos vào bể đạt các nồng độ qui định, sau 6 giờ thì nâng mức nước lên
đầy bể. Sau 3 ngày thay hết nước trong bể và bắt đầu gây nhiễm lần 2.
Gây nhiễm lần 2: sau khi gây nhiễm lần 1 và thu mẫu ở thời điểm trước
khi thay nước thì tiến hành giảm 30 % mực nước và gây nhiễm Dichlorvos lần
2 và sau 6 giờ ta tiến hành nâng nước lên đầy bể. Thí nghiệm gồm 2 nghiệm thức:
Nghiệm thức 1: nồng độ Dichlorvos 0,25 mg/L Nghiệm thức 2: nồng độ Dichlorvos 0,5 mg/L.
Mật độ bố trí cá là 50 con/bể và cá được bố trí hồn tồn ngẫu nhiên Mỗi nghiệm thức bố trí 3 bể, mỗi bể có thể tích là 500L. Hệ thống bể
3.2.5.3 Bố trí thí nghiệm
Thu mẫu các yếu tố môi trường: nhiệt độ, oxy, pH được đo mỗi ngày 2 lần trong suốt 7 ngày gây nhiễm Dichlorvos và định kỳ vào các ngày thu mẫu cá phân tích tồn lưu kháng sinh.
Thu mẫu cá và nước để phân tích thời gian tồn lưu Dichlorvos. Thu mẫu cá và nước tại thời điểm trước khi gây nhiễm Dichlorvos.
Nước chỉ được gây nhiễm Dichlorvos trong vòng 7 ngày và chuyển
sang môi trường nước sạch để nuôi và tiến hành thu mẫu.
Thu mẫu cá (5con/lần/bể) và nước (200ml/lần/bể) vào các khoảng thời gian sau:
Hình 3.9 Tiến trình thu mẫu cá thí nghiệm
3.2.5.4 Tiến hành thí nghiệm
Thu mẫu cá ban đầu trước khi gây nhiễm Dichlorvos. Cho cá thí nghiệm ăn thức ăn và gây nhiễm Dichlorvos 2 lần, sau mỗi lần gây nhiễm tiến hành thu mẫu ở các mức thời gian.
Thu mẫu ứng với thời gian T0: trước khi nhiễm Dichlorvos.
Thu mẫu ứng với thời gian T1: sau khi nhiễm Dichlorvos (lần 1) 6 giờ. Thu mẫu ứng với thời gian T2: sau khi nhiễm Dichlorvos (lần 1) 72 giờ. Thu mẫu ứng với thời gian T3: sau khi nhiễm Dichlorvos (lần 2) 6 giờ. Thu mẫu ứng với thời gian T4: sau khi nhiễm Dichlorvos (lần 2) 72 giờ. Thu mẫu ứng với thời gian T5: sau khi nhiễm Dichlorvos (lần 2) 7 ngày. Thu mẫu ứng với thời gian T6: sau khi nhiễm Dichlorvos (lần 2) 15 ngày Thu mẫu ứng với thời gian T7: sau khi nhiễm Dichlorvos (lần 2) 30 ngày Thu mẫu ứng với thời gian T8: sau khi nhiễm Dichlorvos (lần 2) 60 ngày
Sau khi gây nhiễm lần 2 72 giờ tiến hành thay nước thay nước hoàn toàn. T0 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 Gây nhiễm lần 1 Gây nhiễm lần 2
3.2.5.5 Chuẩn bị mẫu
Cá sau khi thu mẫu được fillet, cắt nhỏ và cho vào cối xay nhuyễn, bảo quản ở nhiệt độ -20oC cho đến khi phân tích. Thu mẫu nước bảo quản ở nhiệt độ -20oC cho đến khi phân tích.