Hình 3.10 thể hiện nờng độ He trong mẫu AlgHis–He (C %) và hiệu suất gắn He (H %) ở các tỷ lệ gắn khác nhau. Nhìn chung, khi tăng tỷ lệ gắn He vào AlgHis, nồng độ He trong mẫu tăng dần và hiệu suất gắn He giảm dần với tỷ lệ 1–0,25 có lượng He ít nhất (11,65 %), tỷ lệ 1–1 có lượng He nhiều nhất (22,78 %). Khi tăng tỷ lệ gắn He vào mẫu càng nhiều, từ 1–0,25 lên 1–0,5, C % có sự tăng mạnh (5,24 %), tiếp tục tăng tỷ lệ He lên 1–0,75 thì C % cũng tăng mạnh (4,26 %) nhưng khi tăng tỷ lệ gắn He vào AlgHis lên 1–1, ta thấy nồng độ He trong hệ của tỷ lệ 1–0,75 và 1–1 khơng có sự chệnh lệch nhiều (chỉ tăng nhẹ 1,73 %) và hiệu suất gắn He thấp. Cho
46 thấy rằng, ở tỷ lệ 1–0,75; He trong hệ đã được gắn gần đạt mức tối đa nên khi tiếp tục tăng lượng He đưa vào, C % khơng có sự chệnh lệch nhiều và lượng He khơng được phản ứng càng nhiều nên hiệu suất gắn càng giảm. Qua kết quả trên, có thể thấy rằng hệ AlgHis–He (1–0,75) có C % và H % tối ưu nhất.
3.2. Đánh giá hoạt lực trên Guaiacol
Việc đánh giá hoạt lực của hệ xúc tác trên Guaiacol dựa trên cơ sở sau:
Cơ sở lý thuyết động học enzyme
Gọi v1 là vận tốc của phản ứng tạo thành phức chất ES.
v−1 là vận tốc của phản ứng tạo phân ly phức chất ES tạo thành E và S. v2 là vận tốc của phản ứng tạo thành E và P.
v1 = k1 [E][S]
v−1 = k−1 [ES] v2 = k2 [ES]
Khi hệ thống đạt trạng thái cân bằng ta có:
k−1 [ES] +k2 [ES] = k1 [E][S]
(k−1 + k2) [ES] = k1 [E][S] (1) Gọi Eo là nồng độ enzyme ban đầu:
[E] = [Eo] – [ES] (2)
Thay (2) vào (1), ta có:
[ES] = k1 [Eo] [S]
k−1+ k2+ k1[S]
Km (hằng số Michaelis–Menten) đặc trưng cho mỗi enzyme, thể hiện ái lực của enzyme đối với cơ chất, phản ánh lượng cơ chất phải thêm vào để đạt được ½ Vmax [64].
Km = k−1+ k2
k1
47 v = k2 [ES]
Thay [ES] bằng giá trị ở trên ta thu được: v = k2 [Eo] [S]
km+ [S] (3)
Qua đây, ta thấy nờng độ enzyme càng cao thì vận tốc phản ứng enzyme càng lớn. Vận tốc đạt cực đại khi toàn bộ enzyme liên kết với cơ chất, nghĩa là:
Vmax = k2 [Eo]
Vận tốc tối đa Vmax mô tả số phân tử cơ chất nhiều nhất có thể, được chuyển thành sản phẩm trong một khoảng thời gian và khi đó tất cả trung tâm hoạt động của enzyme đã được lấp đầy [64].
Thay Vmax vào phương trình (3), ta được: v = Vmax.[S]
Km+[S] (4)
Phương trình (4) gọi là phương trình Michelis–Menten
Km có trị số càng nhỏ thì ái lực của enzyme với cơ chất càng lớn, nghĩa là vận tốc của phản ứng do enzyme xúc tác càng lớn.