- Hộp đựng dụng cụ khử khuẩn
2.3.3Mẫu nghiờn cứu
Cỡ mẫu: Lấy mẫu thuận tiện bao gồm tất cả bệnh nhõn đến khỏm với cỏc biểu hiện như trờn nghi nhiễm vi nấm Malassezia.spp
2.3.3.3 Biến số nghiờn cứu
Khảo sỏt tỷ lệ nhiễm Malassezia spp - Khỏm và làm bệnh ỏn theo mẫu
+ Tổng số BN đến khỏm + Số BN nhiễm nấm da
+ Số BN cú cỏc biểu hiờn lõm sàng như trờn và xột nghiệm cú nấm
Malassezia spp gõy bệnh (theo tiờu chuẩn V.Silva và cộng sự)
+ Tuổi + Giới
+ Nghề nghiệp + Địa dư
+ Cỏc mựa trong năm
Xỏc định mức độ nhiễm vi nấm Malassezia spp bằng KOH 20% + Parker ink (2:1)
+ Chỳng tụi tiến hành lấy mẫu bệnh phẩm ở cỏc vị trớ được chỉ định cú nghi ngờ nhiễm nấm Malassezia spp. Đồng thời, lấy vẩy da tại một số vị trớ ở
vựng da khỏe mạnh bỡnh thường khụng cú biểu hiện một trong cỏc triệu chứng trờn của chớnh bệnh nhõn đú.
+ Sau đú, thực hiện phương phỏp soi trực tiếp bằng KOH 20% + Parker Ink với mục đớch so sỏnh mật độ tập trung của vi nấm ở cỏc vị trớ da lành và vựng da nghi nhiễm nấm nhằm đỏnh giỏ: Cú hay khụng vai trũ gõy bệnh của
Malassezia spp hay chỳng chỉ thuộc vi hệ mà khụng gõy bệnh trong một số
bệnh da thường gặp. Qua đú khuyến cỏo với lõm sàng về căn nguyờn gõy bệnh hay chỉ ra đú là nhiễm nấm cơ hội khiến tỡnh trạng bệnh thờm trầm trọng. Vỡ vậy, giỳp cỏc bỏc sỹ lõm sàng chẩn đoỏn và điều trị hiệu quả hơn.
2.3.3.4 Quy trỡnh thu thập số liệu
- Khảo sỏt tỷ lệ nhiễm nấm Malassezia spp ở một số bệnh ngoài da: Khỏm theo mẫu bệnh ỏn nghiờn cứu (Phụ lục)
- Xỏc định tỷ lệ độ tõp trung của vi nấm: Xột nghiệm trực tiếp bằng phương phỏp KOH + Parker ink (2:1)
Bệnh nhõn viờm da Khỏm lõm sàng Xột nghiệm
(-) (+) Tỷ lệ nấm gõy bệnh Loại nghiờn cứu
Tỷ lệ nhiễm Malassezia spp
Sơ đồ 2.2: Quy trỡnh thu thập số liệu
2.3.3.5 Kỹ thuật xột nghiệm trực tiếp tỡm Malassezia.spp
+ Bệnh phẩm: Vẩy da, chất bó
+ Húa chất: KOH 20% + Parker Ink (2:1)
+ Lấy mẫu bệnh phẩm: Sử dụng một trong hai phương phỏp sau.
• Cạo vẩy da bằng dao cựn
• Phương phỏp Scott: Nờn dựng băng dớnh lấy bệnh phẩm trong trường hợp
•• Vẩy da quỏ ớt khụng cạo bằng dao được •• Trẻ nhỏ bị ở vựng mặt, tay chõn
Lưu ý: trờn mỗi bệnh nhõn chỉ nờn lựa chọn sử dụng một phương phỏp
cũng như một húa chất xột nghiệm để giỳp cho việc so sỏnh, đỏnh giỏ kết quả chớnh xỏc. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Chỳng tụi nhận định mức độ nhiễm Malassezia spp thụng qua việc đỏnh giỏ mật độ tập trung của vi nấm dựa theo nghiờn cứu của V.Silva và cỏc cộng sự. Năm 1996 tại bệnh viện Sao Paolo - Brazil, ụng tiến hành nghiờn cứu trờn cỏc đối tượng là người bệnh và người bỡnh thường khỏe mạnh thụng qua kỹ thuật soi trực tiếp bằng Parker Ink kết hợp KOH và kỹ thuật nuụi cấy định, loại nấm [32].
+ Nhận định kết quả: KHV vật kớnh 40. Theo V.Silva và cộng sự [53] ● Âm tớnh : 0 - 3 tế bào nấm/VT
● Mức độ 1+ : 4-10 tế bào nấm/VT
● Mức độ 2+ : 11-20 tế bào nấm/VT ● Mức độ 3+ : 21- 40 tế bào nấm/VT ● Mức độ 4+ : ≥ 40 tế bào nấm/VT
- Bờn cạnh đú, chỳng tụi cũn tiến hành kết hợp với phương phỏp soi đốn Wood để phối hợp tỡm vị trớ tập trung vi nấm trờn thương tổn.