Mỗi giá thể ra cây nhắc lại 3 lần, mỗi lần 10 cây
Qua bảng 7 cho thấy: ở các loại giá thể khác nhau thì ảnh hưởng khác nhau đến sự sinh trưởng phát triển của cây in vitro cụ thể ở công thức 1 (giá thể là trấu hun + xơ dừa) cho kết quả tốt nhất ở tất cả các chỉ tiêu.
Tỷ lệ cây sống ở các loại giá thể đều giống nhau (đạt 100%).Các chỉ tiêu sinh trưởng có sự biến đổi ở các loại giá thể khác nhau.
Cụ thể: Trong các thí nghiệm ra cây, cây được trồng ở giá thể xơ dừa + trấu hun (1:1) có chiều cao trung bình và số lá trung bình đạt cao hơn hẳn so với các cây được trồng trên giá thể khác, chiều cao TB/cây đạt 9,69 cm và số lá TB/cây đạt 11,29 lá.
Ở các loại giá thể khác, chiều cao và số lá TB/cây cũng có những sự biến động khác nhau. Cây ra trên giá thể cát (100%) có chiều cao đạt 7,87cm và số lá TB/cây đạt 7,83cm. Cịn trên giá thể cát + trấu hun cây có chiều cao đạt 7,97cm và 8,86 lá/cây. Trên giá thể đất + trấu hun cây có chiều cao 9,0 cm và 9,83 lá/cây. Kết quả trên có thể được lý giải, giá thể cát mất nước nhanh, độ ẩm thấp và có khả năng truyền nhiệt cao nên bộ rễ cây kém thích nghi hơn các loại giá thể khác.
Khi các giá thể được trộ với trấu hun sẽ cho khả năng giữ ẩm và độ tơi xốp cao hơn nên cây sẽ dễ dàng thích nghi hơn, đặc biệt là giá thể trấu hun + xơ dừa rất tơi xốp, thuận lợi cho bộ rễ của cây phát triển.
Kết luận: Khi đưa cây in vitro ra ngồi vườn ươm thì cần chú ý đến việc sử dụng giá thể, phải chọn được loại giá thể thích hợp. Theo kết quả nghiên cứu của thí nghiệm này giá thể xơ dừa + trấu hun là giá thể thích hợp nhất cho cây sinh trưởng và phát triển ở giai đoạn vườn ươm.
CT2 CT1
Hình 7: Ảnh hưởng của giá thể tới tỷ lệ sống và sự sinh trưởng của cây in
vitro
PHẦN V
KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
5.1. Kết luận
Trên cơ sở các kết quả thu được ở phần IV, chúng tôi rút ra một số kết luận sau:
1. Mơi trường thích hợp nhất cho nhân nhanh mẫu cấy trầu bà là: MS + 4mg/l BA
Với hệ số nhân chồi là 5,13 lần, chiều cao TB 0,93 cm và số lá/chồi là 3,24 lá.
2. Mơi trường thích hợp nhất cho q tình tạo cây hồn chỉnh là MS + 0,5mg/l α-NAA
Với số rễ TB/chồi đạt 11,5 rễ và chiều dài rễ đạt 1,68 cm.
3. Ở giai đoạn vườn ươm: Giá thể tốt nhất cho cây in vitro ở giai đoạn vườn ươm là xơ dừa + trấu hun (1:1).
Với tỷ lệ sống đạt 100%, chiều cao TB 9,69 cm và số lá TB 11,29 lá.
5.2. Đề nghị
Dựa trên kết quả nghiên cứu đã đạt được chúng tôi xin đề nghị một số vấn đề sau:
1. Tiếp tục nghiên cứu khả năng nhân nhanh mẫu cấy trầu bà trên đơn chất cũng như tổ hợp các chất điều tiết sinh trưởng khác nhau ( BA và α-NAA, kinetin và α-NAA, IBA, IAA …)
2. Nghiên cứu tạo cây in vitro từ nguồn vật liệu ban dầu là mẫu lá và cuống lá.
3. Nghiên cứu quá trình sinh trưởng của cây trầu bà sau in vitro (chế độ dinh dưỡng, chế độ tưới nước …) để tạo ra cây trầu bà có phẩm chất tốt hơn.
4. Nghiên cứu tỷ lệ sống, khả năng sinh trưởng, phát triển của cây trầu bà in
TÀI LIỆU THAM KHẢO
I. Tài liệu tiếng Việt
1. Đỗ Năng Vịnh (2005); Công nghệ tế bào thực vật ứng dụng. NXB Nông Nghiệp
2. Lê Văn Tri (1998); Chất điều hịa sinh trưởng và năng suất cây
trồng,.NXB Nơng Nghiệp 1998.
3. Nguyễn Văn Uyển và cộng sự; Ứng dụng nuôi cấy mô tế bào thực vật. NXB Nông Nghiệp 1993.
4. Phạm Hoàng Hộ; Cây cỏ Việt Nam. NXB Trẻ 1999
II. Tài liệu nước ngoài
5. Chen J, McConnell DB, Norman DJ, Henny RJ (2005); The foliage plant
industry.
6. Janick J(eds) Horticultural Reviews, John Wiley and Sons, Inc. Hoboken, NJ, pp 45-110
7. Dan b. Walker và cộng sự (1983); Direct Respiration of Lipids During Heat
Production in the Inflorescence of Philodendron selloum. Science 22 April
1983,Vol. 220 no. 4595 pp. 419-421
8. Gaurab và cộng sự (2004). Luffa sponge – a unique matrix for tissue culture of Philodendron. Curent Science, vol. 86, no. 2, 25 January.
9. Horticulture Program Eisenhower Park East Meadow, N.Y. 11554
10.Jirakiattikul, Y. and Limpradithtanont (2006); P. Shoot multiplication and
rooting of Philodendron xanadu cultured in vitro. Songklanakarin J. Sci.
Technol., 2006, 28(1) : 79-86
11.Koriesh và cộng sự (2000); M Growth and root formation of
Philodendron oxycardium grown in vitro as affected by benzyladenine and indole acetic acid. Egyptian Journal of Horticulture, 2000 Vol. 27 No. 1 pp.
1-6
12.Jámbor-Benczúr, E. ; Márta-Riffer, A (1990). In vitro propagation of
Philodendron tuxtlanum Bunting with benzylaminopurine. Acta
Agronomica Hungarica, 1990 Vol. 39 No. 3-4 pp. 341-348
13.Kumar Dinesh và cộng sự (1998); In-vitro clonal propagation of
Philodendron pertusum. Indian Journal of Horticulture, vol. 55, issue.4,
1998, 0972-8538
14.McColley RH, Miller NH (1965); Philodendron improvement through
15.Meira Ziv and Tamar Ariel (1991); Bud proliferation and plant
regeneration in liquid-cultured philodendron treated with ancymidol and paclobutrazol. Journal of Plant Growth Regulation, vol10, numbers 1-4,
53-57
16.Mosnica Balanco & Roberto Valverdel (2004); Micropropagación de
Philodendron sp. (Poisblemente P. cocorvandense). Agronomía
Costarricense 28(1): 39 -46, 2004
17.Pablo Peña González và cộng sự (2003); Alternativas del establecimiento
in vitro en la micropropagación de la Guana. Biotecnología vegetal Vol. 3,
No. 1: 43-46, 2003
18.Pierick, R.L.M (1987); In vitro culture of higher plant . Martinus Nijhoff publishers 344 P
19.Sreekumar S và cộng sự (2001); Morphogenetic responses of six
Philodendron cultivars in vitro. Indian J Exp Biol, 2001 Dec;39(12):1280-7
III. Tài liệu Internet
20.Botany .com
21.Cross-Culture Training www.Cross-Ways.com
22.http://en.wikipedia.org/wiki/Philodendron
23.http://mrec.ifas.ufl.edu/foliage/folnotes/philo-hl.htm
24.http://edis.ifas.ufl.edu
25.http://www.exoticrainforest.com
PHỤ LỤC
THÀNH PHẦN DINH DƯỠNG
MURASHIGE AND SKOOG - 1962(MS)
Thành phần dinh dưỡng Lượng pha cho 1 lít Lượng lấy cho 1 lít MS 1. Đa lượng NH4NO3 KNO3 MgSO4.7H2O KH2PO4 33 (g) 38 (g) 10 (g) 3,4 (g) 50 (ml/l) 2. Vi lượng H3BO3 MnSO4.4H2O ZnSO4.4H2O KI MoO4Na2.2 H2O CoCl2.6H2O CuSO4.5H2O 620 (mg) 2230 (mg) 860 (mg) 83 (mg) 25 (mg) 2,5 (mg) 2,5 (mg) 10 (ml/l) 3. Sắt FeSO4.7H2O Na2EDTA 5,56 (g) 7,46 (g) 5 (ml/l) 4. Vitamin Glycine Axit Nicotinic (B5) 400 (mg) 100 (mg) 5 (ml/l)
Pyridoxin (B6) Thiamin HCl (B1) 100 (mg) 20 (mg) 5. CaCl2.2H2O 6,6 (g) 50 (ml/l) 6. Inositol 100 (mg/l)
Tóm tắt quy trình nhân nhanh in vitro cây trầu bà – Philodendron Xanadu
Vật liệu ban đầu
Tái sinh tạo chồi và nhân nhanh
Tạo cây hoàn chỉnh
Trồng ra giá thể
Đỉnh sinh trưởng
Khử trùng
Môi trường MS+4mg/lBA
BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE BA 14/ 8/11 18: 8
------------------------------------------------------------------ :PAGE 1
Nghien cuu anh huong cua BA toi kha nang tao choi
cua mau cay
VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= 1 CT$ 5 24.1570 4.83141 ****** 0.000 2 * RESIDUAL 12 .213438E-02 .177865E-03
----------------------------------------------------------------------------- * TOTAL (CORRECTED) 17 24.1592 1.42113
----------------------------------------------------------------------------- BALANCED ANOVA FOR VARIATE CC FILE BA 14/ 8/11 18: 8
------------------------------------------------------------------ :PAGE 2
Nghien cuu anh huong cua BA toi kha nang tao choi cua mau cay
VARIATE V004 CC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= 1 CT$ 5 .185333 .370667E-01 513.24 0.000 2 * RESIDUAL 12 .866653E-03 .722211E-04
----------------------------------------------------------------------------- * TOTAL (CORRECTED) 17 .186200 .109529E-01
----------------------------------------------------------------------------- BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL FILE BA 14/ 8/11 18: 8
------------------------------------------------------------------ :PAGE 3
Nghien cuu anh huong cua BA toi kha nang tao choi
cua mau cay
VARIATE V005 SL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= 1 CT$ 5 .133333E-01 .266666E-02 3.69 0.030 2 * RESIDUAL 12 .866665E-02 .722221E-03
----------------------------------------------------------------------------- * TOTAL (CORRECTED) 17 .220000E-01 .129412E-02
----------------------------------------------------------------------------- TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BA 14/ 8/11 18: 8
------------------------------------------------------------------ :PAGE 4
Nghien cuu anh huong cua BA toi kha nang tao choi cua mau cay MEANS FOR EFFECT CT$
------------------------------------------------------------------------------- CT$ NOS HSN CC SL 1 3 1.99667 1.15000 3.22333 2 3 2.50667 1.17333 3.29667 3 3 2.89333 1.23667 3.25000 4 3 3.58333 1.12000 3.29000 5 3 5.00667 0.946667 3.23333 6 3 4.97000 0.993333 3.26667 SE(N= 3) 0.769989E-02 0.490649E-02 0.155158E-01 5%LSD 12DF 0.237260E-01 0.151186E-01 0.478095E-01
------------------------------------------------------------------------------- ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BA 14/ 8/11 18: 8
------------------------------------------------------------------ :PAGE 5
Nghien cuu anh huong cua BA toi kha nang tao choi cua mau cay F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL. SECTION - 1
VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ | (N= 18) -------------------- SD/MEAN | | NO. BASED ON BASED ON % | | OBS. TOTAL SS RESID SS | | HSN 18 3.4928 1.1921 0.13337E-01 0.4 0.0000 CC 18 1.1033 0.10466 0.84983E-02 0.8 0.0000
SL 18 3.2600 0.35974E-010.26874E-01 0.8 0.0297 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE KI 4/ 8/11 3:24
------------------------------------------------------------------ :PAGE 1
Nghien cuu anh huong cua kinetin toi kha nang tao choi cua mau cay
VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= 1 CT$ 4 3.46377 .865943 ****** 0.000 2 * RESIDUAL 10 .166648E-02 .166648E-03
----------------------------------------------------------------------------- * TOTAL (CORRECTED) 14 3.46544 .247531
----------------------------------------------------------------------------- BALANCED ANOVA FOR VARIATE CC FILE KI 4/ 8/11 3:24
------------------------------------------------------------------ :PAGE 2