CH NG 2 : NGUYÊN LIU VÀ PH NG PHÁP
3.3.5.nh danh nm men phân lp
3.3. Phân lp nm ment ngun nguyên li u/th c p hm Vit Nam
3.3.5.nh danh nm men phân lp
Ti n hành đ nh danh 02 ch ng n m men S2 và N3 theo ph ng pháp gi i trình t Sanger.
i chi u trình t DNA xác đ nh đ c t N3 (Hình 3.15) v i c s d li u cho th y trình t này t ng đ ng 100% v i gene 18S small ribosomal c a Pichia kudriavzevii CBS 5417. N m men N3 đ c đ nh danh là loài Pichia kudriavzevii.
N m men P. kudriavzevii, n m men lên men ethanol, có kh n ng sinh các h p ch t h ng nh acetic ester, ester c a các acid béo [101], các alcol b c cao [102], góp ph n t o nên h ng đ c tr ng cho nem chua. Chúng có th ch u đ c acid lactic và sinh tr ng t t pH 2,2-3,0 [103], do đó có th t n t i trong nem chua cùng v i lên men lactic c a vi khu n lactic. Hình thái c a n m men P. kudriavzevii trên đ a petri và soi d i kính hi n vi đ phóng đ i 400 t ng t v i k t qu công b b i Chi và c ng s (2015) [104] và Bajaj và c ng s (2012) [105]. N m men này có th sinh tr ng nhi t đ 41-43ΔC [106], th m chí 45ΔC [107]. Nghiên c u v đ c tính sinh lý c a n m men P. kudriavzevii, k t qu cho th y chúng có kh n ng lên men glucose, fructose và sinh khí trong khi khơng s d ng đ c sucrose và lactose [106, 108]. Nghiên c u c a Ramos và c ng s (2015) [109] cho th y n m men P. kudriavzevii không sinh
protease ngo i bào khi ni c y trên mơi tr ng YPD có b sung 0,5% casein. Tuy nhiên nghiên c u g n đây c a Bright và c ng s (2022) [110], ho t tính protease ngo i bào c a n m men P. kudriavzevii trên môi tr ng YPD có b sung 2% casein đ c xác đ nh v i giá tr 0,33 U/ml. N m men P. kudriavzevii c ng đ c công b khơng có kh n ng sinh lipase [111]. Tuy nhiên, nghiên c u khác cho th y n m men
P. kudriavzevii th hi n ho t tính lipase th p trên mơi tr ng ch a tributyrin [112].
i chi u trình t DNA xác đ nh đ c t n m men S2 (Hình 3.16) v i c s d li u cho th y trình t này thu c protein Candida tropicalis strain MYA-3404 chromosome R v i đ t ng đ ng 99,88%. N m men S2 đ c đ nh danh là lồi
Candida tropicalis. Hình thái n m men C. tropicalis trong nghiên c u này t ng t v i công b c a Zuza-Alves và c ng s (2017) [113]. Bên c nh đó, nhóm tác gi c ng
47
ch ra r ng n m men C. tropicalis có kh n ng lên men nhi u lo i đ ng bao g m c glucose, fructose, saccharose và lactose [113]. Trong nghiên c u tr c đây, n m men
C. tropicalis đ c cơng b có kh n ng sinh aspartyl protease ngo i bào nh ng ho t
tính c a enzyme r t th p [114, 115]. ng th i, nó c ng đ c ch ng minh có kh n ng sinh phospholipase [114].
Hình 3.15. Trình t DNA xác đnh t n m men N3
Hình 3.16. Trình t DNA xác đnh t n m men S2