CHƯƠNG 3 THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
3.4. Bước đầu phối hợp nano andrographolid và nano betaglucan
3.4.2. Sàng lọc tá dược hấp phụ để hoá rắn hỗn dịch nano
Kết quả thử hoà tan cho thấy khả năng giải phóng ADG từ mẫu Neusilin UFL2 vượt trội so với Florite R (trừ thời điểm 5 phút), và cả hai mẫu này đều vượt trội so với mẫu Syloid 244 FP và Aerosil 200. Trong quá trình hấp phụ hỗn dịch nano lên tá dược hấp phụ, một số yếu tố có thể ảnh hưởng tới sự giải phóng dược chất như lực hấp phụ, hiện tượng kết tinh, sự phân bố của dược chất trên nền tá dược… [28, 63]; các yếu tố này phụ thuộc vào loại tá dược hấp phụ. Một số đặc điểm của các tá dược hấp phụ được khảo sát trong đề tài do nhà sản xuất cơng bố được trình bày tại bảng 3.11.
Bảng 3.11. Một số đặc tính của các tá dược hấp phụ sử dụng trong đề tài
Tá dược Bản chất Phân loại mao quản Đường kính
mao quản
Aerosil 200 Silic dioxyd Khơng có mao quản -
Syloid 244 FP Silic dioxyd Mao quản trung bình 23 nm Neusilin UFL2 Magnesi nhơm trisilicat Mao quản trung bình 13-17 nm
Florite R Calci silicat Mao quản lớn 200 nm
3.4.2.1. Đánh giá mức độ tái hấp phụ dược chất của các tá dược
Dược chất có thể liên kết với bề mặt tá dược thông qua các loại liên kết khác nhau như liên kết hydro, liên kết ion, liên kết kỵ nước [28]. Từ cấu trúc của ADG và các tá dược được khảo sát trong đề tài, có thể nhận định liên kết hydro là liên kết quan trọng nhất, bởi ADG tồn tại ở trạng thái không ion hố nên khơng tạo liên kết ion, trong khi đó, các loại tá dược được khảo sát đều là tá dược có bề mặt thân nước, vì vậy khó tạo liên kết kỵ nước với dược chất [28]. Liên kết giữa dược chất và tá dược là điều kiện cần để đảm bảo khả năng lưu giữ dược chất trên tá dược hấp phụ, tuy nhiên nếu liên kết này q mạnh thì có thể gây ra hiện tượng chậm giải phóng, tái hấp phụ dược chất đã hồ tan dẫn tới sự giải phóng khơng hồn tồn dược chất.
Đề tài đã sơ bộ đánh giá khả năng tái hấp phụ dược chất của các tá dược theo phương pháp được mô tả ở phần b mục 2.3.3.4. Qua thực nghiệm, thời gian phù hợp để cân bằng hấp phụ xảy ra là 90 phút. Do nồng độ tối đa của ADG trong hệ khoảng 120 μg/ml, nhỏ hơn độ tan của ADG ở điều kiện thí nghiệm, do vậy khơng tạo thành dung
41
dịch quá bão hoà của ADG, loại trừ được ảnh hưởng của hiện tượng kết tinh dược chất. Kết quả nồng độ của ADG trong các mẫu được tóm tắt tại bảng 3.12.
Bảng 3.12. Nồng độ ADG trong các mẫu của thí nghiệm tái hấp phụ
Mẫu Mẫu chứng Florite R Neusilin UFL2
Syloid 244
FP Aerosil 200 Nồng độ ADG
(μg/ml) 122,6 ± 3,2 123,6 ± 4,1 124,1 ± 3,1 98,3 ± 2,2 101,3 ± 3,5 Nhận xét: Nồng độ ADG trong mẫu chứng là 122,6 ± 3,2 μg/ml, bằng với nồng độ lý thuyết của ADG được thêm vào mẫu thử, điều này chứng tỏ dược chất không bị kết tinh trong điều kiện thí nghiệm. Nồng độ ADG trong mẫu thử với Florite R và Neusilin UFL2 xấp xỉ bằng mẫu chứng (p>0,05), như vậy không xảy ra sự tái hấp phụ dược chất lên hai tá dược này trong điều kiện thử. Đối với mẫu Syloid 244 FP và Aerosil 200, nồng độ của ADG giảm nhiều so với mẫu chứng (p<0,05), chứng tỏ có sự hấp phụ dược chất đáng kể lên bề mặt hai vật liệu này.
Xét về bản chất hoá học, Syloid 244 FP và Aerosil 200 đều là silic dioxyd, trong khi đó Neusilin UFL2 và Florite R thuộc nhóm silicat kim loại. Bề mặt silic dioxyd sau khi hydrat hố có thể tạo thành nhiều nhóm silanol tạo liên kết hydro mạnh hơn so với các silicat kim loại. Như vậy, có thể đưa ra giả thiết rằng tá dược nhóm silic dioxyd trung hoà liên kết mạnh với ADG hơn so với các silicat kim loại, do vậy tăng cường lưu giữ dược chất trên bề mặt tá dược, giảm lượng dược chất được giải phóng.
3.4.2.2. Ảnh hưởng của đặc điểm mao quản tới khả năng giải phóng dược chất
Đối với hệ nano tinh thể ADG đã bào chế được, kích thước tiểu phân trung bình là 250,9 ± 10,4 nm, phân bố kích thước chủ yếu trong khoảng 200 – 300 nm; tỉ lệ dược chất tồn tại ở vùng nano là 76,71%, hầu như khơng có dược chất tồn tại ở vùng kích thước lớn, và khoảng 21,93% dược chất tồn tại ở trạng thái hoà tan. Từ bảng 3.12, có thể thấy, Aerosil 200 thuộc nhóm vật liệu khơng có mao quản, do đó dược chất chỉ phân bố trên bề mặt tá dược; Syloid 244 FP và Neusilin UFL2 thuộc nhóm mao quản trung bình, do vậy phần nano tinh thể ADG chỉ phân bố ở bề mặt ngồi tá dược cịn phần hồ tan thì có thể phân bố ở ngồi hoặc theo dung mơi đi vào trong lịng các mao quản; Florite R có cấu trúc mao quản lớn với kích thước mao quản trung bình là 200 nm, phân bố kích thước mao quản dao động từ khoảng 20 nm đến 400 nm, do vậy cả phần dược chất hoà tan và phần nano tinh thể dược chất đều có thể phân bố ở cả bề mặt ngồi và trong mao quản. Kích thước mầm tinh thể tới hạn thay đổi tuỳ thuộc hoạt chất, nhưng thường cỡ vài nm [112, 113], nhỏ hơn kích cỡ mao quản của cả 3 tá dược mao quản, do vậy khơng có tác dụng duy trì trạng thái vơ định hình cho dược chất trong mao quản, khi đó, hiệu ứng giảm tiếp xúc với mơi trường hồ tan chiếm ưu thế.
42
Đối với Aerosil 200 và Syloid 244 FP, hai tá dược này có cùng bản chất hố học, Aerosil 200 do khơng có mao quản, tồn bộ dược chất lưu giữ tại bề mặt ngoài tiểu phân tá dược nên về lí thuyết có thể có mức độ giải phóng dược chất cao hơn. Tuy nhiên, thơng qua kết quả ở mục 3.4.2.1, có thể thấy liên kết giữa dược chất với bề mặt hai tá dược này đều rất mạnh, do vậy có thể che lấp ảnh hưởng của mao quản.
Đối với Neusilin UFL2 và Florite R, có thể phân loại hai tá dược này vào nhóm silicat kim loại, kết quả ở mục 3.4.2.1 cho thấy mức độ liên kết với dược chất yếu hơn, khơng tái hấp phụ dược chất, do đó có thể quát sát rõ hơn vai trò của mao quản. Ngoại trừ thời điểm 5 phút, ở các thời điểm sau, lượng dược chất giải phóng từ Neusilin UFL2 cao hơn Florite R (p<0,05), kết quả này tương đối phù hợp với lập luận ở trên, khi lượng dược chất xâm nhập vào trong cấu trúc mao quản của Florite R, đặc biệt là dược chất tồn tại ở trạng thái tinh thể nano cao hơn so với Neusilin UFL2. Hơn nữa, sự xâm nhập dược chất ở dạng tiểu phân vào mao quản của tá dược hấp phụ đơi khi có thể gây ra hiện tượng tắc mao quản, tiểu phân dược chất bịt kín miệng của mao quản, khó giải phóng trở lại và cũng gây ra hiện tượng giảm giải phóng dược chất [63].
Kết luận: Thơng qua kết quả thử hoà tan và các đánh giá liên quan, đề tài quyết định lựa chọn Neusilin UFL2 là tá dược hấp phụ để tiếp tục nghiên cứu.