- Chọn 24 mẫu (cùng nền mẫu) thêm chuẩn mỗi 6 mẫu tại các nồng độ 200; 500; 1000; 5000 ng
- Lặp lại bước trên ít nhất 2 lần với người thao tác khác nhau và trong những điều kiện môi trường khác nhau ( hóa chất, thuốc thử lô khác nhau, nhiệt độ phòng khác nhau, thiết bị khác nhau…) nếu có thể
- Xác định nồng độ chất phân tích trong mẫu đã thêm chuẩn theo phương pháp cần xác định giá trị sử dụng
- Tính hàm lượng trung bình, độ lệch chuẩn SD, độ lệch chuẩn tương đối RSD % cho các mẫu thêm chuẩn
Các công thức tính: Hàm lượng trung bình i TB X X n = ∑
Độ lệch chuẩn ( )2 1 i TB X X SD n − = − ∑
Hệ số biến thiên-độ lệch chuẩn tương đối :
Rw = RSDRw (%) = 100 TB SD X × trong đó Xilà hàm lượng tìm thấy và n là số mẫu khảo sát. Độ lặp lại Rwđược chấp nhận khi Rw≤ 20%. [1]
- Độ tái lập nội bộ phòng thí nghiệm được đánh giá thông qua hệ số RW và
độđồng nhất thống kê của các kết quả thử nghiệm trong những điều kiện môi trường khác nhau.
- Sử dụng phân tích phương sai 1 yếu tố của phần mềm Excel 2003 đểđánh giá đồng nhất thống kê của các kết quả thử nghiệm trong những điều kiện môi trường khác nhau.
2.3.4.7. Độđúng:
Muốn xác định độ đúng cần phải tìm được giá trị đúng thông qua sử dụng mẫu đã biết nồng độ (mẫu kiểm tra hoặc mẫu chuẩn được chứng nhận) và phương pháp xác định độ thu hồi
- Sử dụng CRM (certified reference material – vật liệu chuẩn được chứng nhận) được cung cấp bởi các tổ chức có uy tín trên thế giới. Các mẫu CRM luôn có kết quả kèm theo khoảng dao động, do đó khi phân tích mẫu CRM có thểđánh giá được độđúng dựa vào khoảng dao động cho phép.
• Phân tích lặp lại 6 lần mẫu vật liệu chuẩn đã được chứng nhận (CRM)
• Nhiều tổ chức có uy tín như USFDA, EURACHEM, ICH... quy
định tính độ chệch (bias) để xác định độđúng như sau: % Xtb Truevalue 100 bias Truevalue − = × Trong đó: Độ chệch %: %bias
Xtb : Giá trị trung bình của kết quả thử nghiệm
• USFDA quy định độ chệch của các phương pháp xác định dư
lượng phải không được lớn hơn 15% và không lớn hơn 20% tại LOQ.[2]
- Độ thu hồi được xác định thông qua việc thêm chuẩn vào mẫu
• Chọn 24 mẫu (cùng nền mẫu) thêm chuẩn mỗi 6 mẫu tại các nồng độ từ thấp, trung bình, cao thuộc khoảng tuyến tính của
đường chuẩn: 200; 500; 1000; 5000 ng
• Xác định hàm lượng chất cần phân tích trong mẫu
• Sử dụng công thức dưới đây để tính độ thu hồi cho từng mẫu thêm chuẩn
• Tính độ thu hồi trung bình và độ lệch chuẩn tương đối tại mỗi mức nồng độ
• Độ thu hồi % = (hàm lượng tìm thấy/ hàm lượng thêm vào)x100