2.1. ĐỐI TƯỢNG VÀ ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU2.1.1. Đối tượng nghiên cứu 2.1.1. Đối tượng nghiên cứu
Bệnh nhân được điều trị vô sinh bằng phương pháp TTTON (IVF và IVF/ICSI) tại khoa Hỗ trợ sinh sản của Bệnh viện Phụ Sản Hà Nội trong thời gian 2 năm. Từ 4/2009 – 4/2011
2.1.2. Địa điểm nghiên cứu
Tại khoa Hỗ trợ sinh sản Bệnh viện Phụ Sản Hà Nội.
Xử lý số liệu tại Bộ môn Mô – Phôi Trường Đại Học Y Hà Nội
2.1.3. Thời gian tiến hành nghiên cứu
Từ tháng 4/2009 – 4/2011
2.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU2.2.1. Chọn mẫu nghiên cứu 2.2.1. Chọn mẫu nghiên cứu
* Cỡ mẫu nghiên cứu:
Tổng số 306 hồ sơ bệnh án của các bệnh nhân được thực hiện TTTON tại Bênh viện Phụ Sản Hà Nội từ tháng 4/2009 – 4/2011
Có 261ca đủ tiêu chuẩn, trong đó bệnh nhân IVF: 107 ca và bệnh nhân ICSI: 154 ca
- Có đầy đủ thông tin về: họ tên, tuổi, mã hồ sơ, ngày chọc hút, số lượng và chất lượng noãn, tình trạng thụ tinh, chất lượng phôi, số lượng phôi chuyển, tình trạng chuyển phôi.
- Được sàng lọc các bệnh lây truyền qua đường tình dục, xét nghiệm chức năng gan thận.
- Được chuyển phôi vào ngày 2 hoặc ngày 3.
- Có kết quả xét nghiệm βhCG sau chuyển phôi 2 tuần.
Tiêu chuẩn loại trừ
- Những hồ sơ bệnh án không đủ các tiêu chuẩn nói trên sẽ bị loại ra khỏi nghiên cứu
- Các trường hợp chuyển phôi đông lạnh, cho xin noãn, xin tinh trùng
2.2.2 Phương pháp nghiên cứu.
Mô tả cắt ngang hồi cứu, gồm các bước. - Thu thập thông tin của từng bệnh nhân.
- Phân tích số liệu thu được dựa trên các tiêu chuẩn đánh giá của khoa Hỗ Trợ Sinh Sản – Bệnh viện Phụ Sản Hà Nội gồm:
* Tiêu chuẩn đánh giá chất lượng noãn IVF:
+ Noãn giai đoạn GI (Noãn non): Tế bào nang xếp dày đặc quanh noãn chưa có cực cầu.
+ Noãn giai đoạn GII (Noãn trưởng thành): Nhìn rõ các tế bào vòng tia từ noãn tỏa ra, các tế bào hạt trải đều, có thể nhìn thấy cực cầu thứ nhất. Đây là giai đoan trứng chín tối ưu phù hợp cho sự thụ tinh.
+ Noãn giai đoạn GIII (Noãn già): Chỉ còn một số tế bào hạt xung quanh noãn, có rất ít hoặc không có gò mầm và thường có màu tối, khó nhận dạng. * Tiêu chuẩn đánh giá chât lượng noãn ICSI. ( Theo 3 giai đoạn)
+ Noãn giai đoạn MI: Trong noãn không có túi mầm, không có cực cầu + Noãn giai đoạn MII: Có cực cầu
* Tiêu chuẩn đánh giá chất lượng phôi.Theo Baczkowski ( 2004)[39]. + Độ 1: (Tốt nhất) Ngày 2 có 4-6 phôi bào, ngày 3 có 6-8 phôi bào đồng đều, không có mảnh vỡ bào tương.
+ Độ 2: (Tốt) Ngày 2 có 4-6 phôi bào, ngày 3 có 6-8 phôi bàođồng đều, tỷ lệ mảnh vỡ bào tương < 20%.
+ Độ 3: (Trung bình) Ngày 2 có 4-6 phôi bào, ngày 3 có 6-8 phôi bào đồng đều, tỷ lệ mảnh vỡ bào tương 20 -50%.
+ Độ 4: (Xấu) Ngày 2 có 4-6 phôi bào, ngày 3 có 6-8 phôi bào đồng đều, tỷ lệ mảnh vỡ bào tương > 50%.
* Kỹ thuật chuyển phôi: Chuyển phôi bằng catheter chuyển phôi Stylet(Pháp) và dưới hướng dẫn siêu âm qua thành bụng, kỹ thuật chuyển phôi được chấm điểm như sau:
• 2 điểm: catheter sau chuyển phôi sạch, không có nhầy, không có máu, không sót phôi, không kẹp cổ tử cung, không nong cổ tử cung, thời gian chuyển phôi < 5 phút.
• 1 điểm: cathether sau chuyển phôi có nhầy/và kẹp cổ tử cung, không sót phôi, không nong cổ tử cung, thời gian chuyển phôi kéo dài > 5 phút.
• 0 điểm: catheter sau chuyển phôi có máu hoặc sót phôi hoặc phải nong cổ tử cung, thời gian chuyển phôi kéo dài > 5 phút.
* Theo dõi bệnh nhân sau chuyển phôi:
+Bệnh nhân được xác định là có thai sinh hóa nếu sau chuyển phôi 14 ngày định lượngβhCG máu≥25UI/l
2.3. CÁC CHỈ TIÊU NGHIÊN CỨU
- Tuổi của các đối tượng nghiên cứu. - Số lượng noãn chọc hút được.
- Chất lượng noãn thu được. - Số lượng noãn thụ tinh. - Số lượng phôi thu được. - Chất lượng phôi.
- Số phôi chuyển. - Điểm chuyển phôi. - Tỷ lệ có thai sinh hóa.
2.4. THU THẬP VÀ XỬ LÝ SỐ LIỆU
* Số liệu thu thập sẽ được mã hóa và nhập vào máy tính, số liệu sẽ được xử lý bằng chương trình SPSS 16.0
2.5. KHÍA CẠNH ĐẠO ĐỨC
- Nghiên cứu này tiến hành hồi cứu đánh giá kết quả của hai phương pháp IVF và IVF/ICSI nên không ảnh hưởng đến các kỹ thuật trên noãn, tinh trùng và phôi người.
- Các thông tin về cá nhân của đối tượng nghiên cứu được đảm bảo giữ bí mật theo đúng quy định của pháp luật hiện hành.
Chương 3