Xác định ảnh hưởng của nhiệt độ đến hoạt độ protease
Xác định nhiệt độ thích hợp (topt ) cho hoạt tính protease bằng cách cho protease tác động với cơ chất casein ở các nhiệt độ khác nhau: 5oC, 10oC, 15oC, 20oC,…. 90oC trong thời gian 10 phút. Sau đó tiến hành xác định hoạt tính protease. Sơ đồ bố trí thí nghiệm như sau:
Xác định độ bền nhiệt ảnh hưởng đến hoạt tính protease DC và CPE
Giữ enzyme ở nhiệt độ 60oC trong các khoảng thời gian khác nhau: 0; 10; 20, 40…60 phút. Sau đó nhanh chóng làm lạnh enzyme về nhiệt độ phòng và xác định hoạt tính protease. Sơ đồ bố trí thí nghiệm như sau :
Chọn nhiệt độ thích hợp DC và CPE
Để cố định thời gian 30 phút với các nhiệt độ (oC)
5 10 … 80 90
…
Xác định hoạt tính protease của DC & CPE
DC và CPE
Giữ ở nhiệt 60 oC trong khoảng thời gian (phút)
0 10 … 50 60
Xác định hoạt tính protease của DC & CPE Kết luận về độ bền nhiệt của enzyme
33
Xác định độ của nồng độ muối ăn đến hoạt độ enzyme.
Tiến hành xác định khả năng chịu muối của DC và CPE, lần lượt qua các nồng độ: 1%, 2%, 3%, ...25%, sau đó xác định hoạt độ protease, so sanh chọn nồng độ thích hợp. Bố trí nghiệm như sau:
Xác định ảnh hưởng pH đến hoạt độ protease DC và CPE
CPE Protease hòa cùng nước cất sau đó điều chỉnh pH của DC và CPE ở các giá trị : 2,0 ; 2,5; 3,0, 3,5, 4,0...11,0. xác định hoạt tính protease. Sơ đồ bố trí thí nghiệm như sau:
2,0 DC và CPE Ở các giá trị pH 2,5 … 10,5 11,0 Xác định hoạt tính protease Xác định pH tối ưu DC và CPE ở các nồng độ muối ăn (%) 0 1,0 … 19,0 20,0
Xác định hoạt tính protease của DC & CPE Chọn nồng độ muối ăn thích hợp
34