Phản ứng tổng hợp chất mangthuốc PNS@CS-PEG

Một phần của tài liệu Nghiên cứu biến tính bề mặt nano silica làm chất mang thuốc chống ung thư. (Trang 46 - 49)

1.7. Thử nghiệm độc tính tế bào (cytotoxicity test)

An tồn dược phẩm là yếu tố cực kỳ quan trọng. Việc thử nghiệm độc tính tế bào là bước đầu không thể thiếu đối với việc nghiên cứu 1 loại vật liệu dẫn truyền thuốc[32, 52, 53].

Thử nghiệm SRB (Sulforhodamine B) là một phương pháp so màu đơn giản và nhạy để xác định độc tính tế bào của một chất. SRB là một thuốc nhuộm tích điện âm sẽ liên kết tĩnh điện được với các phần tích điện dương của protein. Lượng thuốc nhuộm liên kết sẽ phản ánh lượng protein tổng của tế bào.

Trong thử nghiệm, tế bào được cố định, rửa và nhuộm với SRB. Sau đó SRB liên kết với protein tế bào được hòa tan tạo dung dịch trong suốt có màu hồng. Mật độ quang đo được của dung dịch tương quan với lượng protein tổng hay số lượng tế bào. Sự thay đổi lượng tế bào so với mẫu chứng phản ánh độc tính tế bào của chất nghiên cứu.

CHƯƠNG 2: THỰC NGHIỆM2.1. Hóa chất và thiết bị 2.1. Hóa chất và thiết bị

2.1.1. Hóa chất

Bảng 2.1. Tên hóa chất và nơi xuất xứ

Tên hóa chất Xuất xứ

Cetyltrimethylamnonium bromide (CTAB) Merck

1-Ethyl-3-(3-dimethylami

nopropyl)carbodiimide hydrochloride (EDC)

Merck

Tetraethyl orthosilicate (TEOS) Merck

Gelatin Chitosan

Merck

Acid acetic Trung Quốc

Succinic anhydride Merck

Diethyl ether Merck

(3-aminopropyl)triethoxy silane (APTES) 3-glycidoxypropyltrimethoxysilane

Merck

Ethanol Tây Ban Nha

Tetrahydrofuran Merck

Màng cellulose 6000-8000 và 3000-5000 Da Merck

Dithiodipropionic acid (DTDP) Merck

4-Nitrophenyl chloromate Merck

Doxorubicin (DOX) Fluorouracile (5-FU) Sodium hydroxide Acid clohydric Merck Merck Trung Quốc Trung Quốc

Vỏ trấu sạch Miền Tây

2.1.2. Dụng cụ

 Máy đánh siêu âm UP200Ht  Máy cô quay Strike 300

 Máy khuấy từ gia nhiệt  Cân điện tử EB35B-Pro

 Tủ sấy KETDNG 101  Máy tạo khí N2

 Máy li tâm  Máy đo pH AB15

 Bình tam giác, cốc thủy tinh  Phễu lọc, bình cầu

 Phễu chiết, ống đong

 Máy đo UV-vis

 Giấy đo pH, giấy lọc.

2.2. Thực nghiệm

2.2.1. Tổng hợp nano silica xốp và tạo cầu nối biến tính

2.2.1.1. Tổng hợp vật liệu nano silica xốp (PNS) bằng phương pháp sol-gel[54]

Nano silica xốp (porous nano silicas) được tổng hợp bằng phương pháp sol-gel sao cho kích thước hạt đồng đều dưới 100 nm. Sử dụng chất hoạt động bề mặt Cetyltrimethylamonium bromide (CTAB) như một tác nhân định hình cấu trúc lỗ xốp cho vật liệu nano, đây cũng có thể xem là khung sườn để TEOS có thể thủy phân và bao lấy tạo điều kiện cho việc hình thành các hạt nano silica xốp sau này.

Hình 2.1. Mơ tả qui trình tổng hợp Porous nano silica (PNS)

Có nhiều yếu tố ảnh hưởng đến phản ứng tổng hợp này như nhiệt độ, tốc độ khuấy, xúc tác, hàm lượng tetraethyl orthosilicate (TEOS), lượng nước...

Trên cơ sở đó, chúng tơi tiến hành khảo sát kích thước hạt dựa trên lượng NH3, TEOS, ethanol với tốc độ khuấy khoảng 350 vịng/phút, nhiệt độ 60oC.

Hình 2.2. Sơ đồ qui trình tổng hợp nano silica xốp (PNS) bằng phương pháp sol-gel2.2.1.2. Tổng hợp vật liệu nano silica xốp bằng phương pháp kết tủa [55]

Một phần của tài liệu Nghiên cứu biến tính bề mặt nano silica làm chất mang thuốc chống ung thư. (Trang 46 - 49)

Tải bản đầy đủ (DOCX)

(135 trang)
w