Thiết bị phát sóng siêu âm cũng phải gồm có 3 phần tối cần thiết sau:
- Bộ phận chuyển phần lớn điện năng thành dòng điện xoay chiều tần số cao để vận hành bộ phận biến đổi .
- Bộ phận biến đổi chuyển dòng điện xoay chiều tần số cao thành những dao động.
Hệ thống truyền sóng sẽ truyền những dao động vào trong lịng chất lỏng. Điều kiện thí nghiệm:
Đặt sâu đầu siêu âm 1cm, thời gian siêu âm khảo sát từ 10- 180 giây, công suất siêu âm từ 40-80 %
2.3.5. Phƣơng pháp xử lý số liệu
Phần mềm Xcalibur version 2.0 (Thermo Scientific, Mỹ) được sử dụng để chuyển đổi, xử lý số liệu và định lượng. Các pic riêng lẻ của từng dạng As được xác định tự động trên phần mềm Xcalibur dựa vào thời gian lưu của chúng (thời gian lưu đã được khai báo trên thiết bị). Từ diện tích pic và phương trình đường chuẩn, chúng tôi xác định được nồng độ các dạng As xuất hiện trong mẫu đo.
2.4. Quy trình phân tích xác định tổng và dạng As
Các mẫu phân tích dạng và tổng As được xác định theo trọng lượng khơ.
2.4.1.Phân tích tổng As
Phân hủy mẫu bằng lị vi sóng
Trong mẫu hải sản, và thực phẩm asen được liên kết chặt chẽ với các thành phần protein. Do đó trước khi định lượng, cần phá vỡ nền protein của mẫu để đưa về dạng vô cơ. Đây là phương pháp xử lý mẫu hiện đại làm giảm đáng kể thời gian xử lý mẫu, khơng làm mất mẫu phân tích và vơ cơ hóa mẫu được triệt để, có thể vơ cơ hóa cùng lúc nhiều mẫu. Sử dụng axit HNO3 và tác nhân ơxi hóa H2O2.
Các bƣớc tiến hành khi phân hủy mẫu bằng lị vi sóng
Cân chính xác khoảng: 50,0 – 200,0 mg mẫu thực phẩm đã được đông khô hoặc sấy khô. Tùy hàm lượng As có trong mẫu chọn lượng cân cho phù hợp. Cho vào bình xử lý mẫu bằng Teflon dung tích 100ml trong lị vi sóng (phá mẫu lặp). Thêm vào bình 5ml HNO3 đặc; 0,5ml H2O2 đặc). Tiến hành phá kèm mẫu trắng.
Đặt chƣơng trình phá mẫu qua 3 bƣớc:
Bước 1: cơng suất lị 30% – thời gian 3 phút Bước 2: cơng suất lị 50% – thời gian 5 phút Bước 3: cơng suất lị 45% – thời gian 15 phút.
Sau khi chương trình kết thúc để nguội về nhiệt độ phịng, pha lỗng mẫu sao cho nền mẫu có nồng độ HNO3 khoảng 2% sau đó định mức tới một thể tích xác định (25ml hoặc 50ml). Dung dịch mẫu được lọc qua màng lọc có đường kính lỗ 0,45μm. Tiến hành đo phổ ICP-MS theo các điều kiện nghiên cứu ở Bảng 2.1 để
định lượng asen tổng có trong mẫu.
Để đánh giá quy trình phân tích, chúng tơi tiến hành phân tích 2 mẫu chuẩn đối chiếu nền cá là DORM-4 và mẫu BCR-627 và 1 mẫu gạo BC-211.
2.4.2. Quy trình phân tích dạng As
Cân chính xác khoảng 50,00 mg mẫu thực phẩm chứa As cho vào ống facol 15ml. Dùng 10ml dung mơi MeOH:H2O theo tỉ lệ 50/50 về thể tích (chiết lặp 3 lần tương ứng 3;3;4 ml). Công suất chiết siêu âm 80%, thời gian chiết 2x3 phút, ly tâm 6000xg, thời gian ly tâm 5 phút. Dịch chiết được chuyển sáng ống facol mới và được pha loãng 10 lần bằng nước deion và lọc qua màng lọc 0,45µm. Sau đó được bơm vào cột sắc ký, đo 5 dạng hợp chất As trên thiết bị ghép nối HPLC-ICP-MS.
2.4.3. Sơ đồ phân tích tổng và dạng As
Chƣơng 3 – KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. Phân tích tổng hàm lƣợng As trong mẫu thực phẩm bằng phƣơng pháp ICP-MS
3.1.1. Khoảng tuyến tính
Phương pháp ICP-MS có vùng tuyến tính hơn hẳn tất cả các kỹ thuật phổ quang học khác. Hầu hết các pic phổ khối có vùng tuyến tính rất rộng, thường là từ hàng trăm đến hàng triệu lần nồng độ giới hạn dưới (tùy thuộc từng nguyên tố cần xác định).Thực tế hàm lượng As có trong mẫu thực phẩm thường rất nhỏ do đó đường chuẩn nên được xây dựng có nồng độ nhỏ: từ 1ppb đến 200ppb.[15]
Phương trình hồi quy của As đo bằng ICP-MS sử dụng cho phân tích tổng As có dạng là: Y(AΔA).X(BΔB);
Trong đó:
Y -là tín hiệu của As (cps) X- nồng độ As (ppb) Hệ số tương quan R2
Bảng 3.1. Cường độ tín hiệu của As+
phụ thuộc vào nồng độ của As trong ICP-MS
STT Nồng độ (ppb) Tín hiệu (cps) 1 0 55 2 5 24543 3 10 48090 4 20 104506 5 50 212448 6 100 433551 7 200 883674