Phân lập các chủng vi sinh vật có khả năng sử dụng 2,2DCPS

Một phần của tài liệu (LUẬN văn THẠC sĩ) bước đầu nghiên cứu tinh sạch enzym dehalogenase từ chủng vi sinh vật phân lập tại việt nam (Trang 38 - 41)

Sau thời gian từ 3 đến 5 ngày ni cấy trên mơi trƣờng MGB có bổ sung cơ chất 2,2 DCPS chúng tôi đã thu đƣợc kết quả nhƣ trình bày ở bảng 5. Kết quả nghiên cứu cho thấy không phân lập đƣợc chủng vi nấm nào mọc trên môi trƣờng chọn lọc. Các chủng phân lập đƣợc hầu hết là các chủng vi khuẩn. Trong nhiều nghiên cứu việc phân lập vi khuẩn sử dụng trong phân giải hợp chất halogen đƣợc đề cập trong nhiều nghiên cứu [5].

Bảng 5. Đặc điểm các khuẩn lạc trên mơi trƣờng MGB có bổ sung cơ chất 2,2 DCPS

Kí hiệu Đƣờng kính (mm)

Màu sắc Hình dạng

Ngọc Hà

H1 5 Trắng trong Tròn,dẹt,nhăn, hai vòng tròn đồng tâm

H2 4 Trắng đục Trịn, dẹt, nhăn, có màu sẫm H3 1 Trắng đục Trịn, bóng, lồi

H4 4 Trắng trong Trịn, trắng, giống vết tan, khơng bóng, có nhân

H5 0.5 Trắng trong Trịn, bóng

H6 4 Trắng trong Trịn, dẹt, viền ngồi có tia H7 4 Trắng trong Hình tia, dẹt, khơng lồi H8 2 Trắng trong Trịn, dẹt, khơng lồi

Triều Khúc

H9 2 Vàng chanh Trịn, lồi ở giữa,khơng bóng H10 5 Trắng trong Tròn, nhiều chấm nhỏ ở giữa, dẹt H11 3 Vàng chanh Trịn, bóng, lồi ở giữa

H12 5 Trắng đục Tròn, tia viền ngồi, có nhân H13 6 Trắng đục Tròn, nhăn ở giữa, nhân trắng

trong

Triều Khúc

H15 2 Trắng đục Trịn, nhân, bóng, hơi lồi H16 1 Trắng đục Trịn,có nhân,bóng, lồi

H17 2 Vàng nhạt Giống hình nấm,dẹt, khơng bóng H18 5 Trắng đục Trịn, bóng, lồi,viền ngồi nhạt H19 2.5 Vàng nhạt Trịn bóng, hơi nhăn

H20 2 Trắng đục Trịn, bóng, lồi, nhân đậm hơn Kết quả nghiên cứu trên bảng 5 cho thấy trên mơi trƣờng ni cấy có khống cơ bản và bổ sung hợp chất 2,2 DCPS phân lập đƣợc 20 chủng vi khuẩn. Số lƣợng các chủng vi khuẩn phân lập chƣa cao cũng có thể nguyên nhân do 2,2 DCPS là một chất độc và mơi trƣờng khống cơ bản khơng có q nhiều chất dinh dƣỡng. Về hình thái khuẩn lạc cả 20 chủng vi khuẩn đều có hình trịn, đƣờng kính nằm trong khoảng từ 0,5-5mm, đa số có màu trắng trong hoặc trắng đục, một số có màu hơi khác biệt là vàng nhạt hoặc vàng chanh. So sánh với các nghiên cứu của Magee và Colmer [29] đã phân lập đƣợc 8 chủng từ môi trƣờng đất, Schwarze [20] đã phân lập đƣợc 4 chủng vi khuẩn, chúng tơi nhận thấy có sự đa dạng hơn các chủng vi khuẩn trong mẫu mà chúng tôi phân lập đƣợc. Nguyên nhân có thể do địa điểm phân lập mẫu có mức độ ô nhiễm cao hơn so với mẫu phân lập của Magee và Colmer, Schwarze.

Khi so sánh mức độ đa dạng giữa các mẫu nghiên cứu chúng tôi nhận thấy mẫu nghiên cứu lấy từ khu vực tái chế rác thải Triều Khúc phân lập đƣợc nhiều chủng vi khuẩn hơn so với mẫu lấy tại khu vực làng hoa Ngọc Hà, điều này đƣợc thể hiện qua số lƣợng, số loại khuẩn lạc phân lập đƣợc. Nguyên nhân của sự khác biêt này có thể giải thích là do khu vực tái chế rác thải nguồn dinh dƣỡng đầy đủ hơn, các điều kiện về nhiệt độ, pH thích hợp hơn so với khu vực làng hoa, hơn nữa khu vực làng hoa Ngọc Hà do việc thƣờng xuyên xới đều và làm đất, hơn nữa có một số tháng phơi đất trƣớc khi trồng hoa mới nên lƣợng vi khuẩn là không nhiều.

3.2. Tuyển chọn các chủng vi khuẩn có khả năng phân hủy hợp chất 2,2 DCPS

Từ 20 chủng vi khuẩn phân lập đƣợc chúng tôi tiếp tục sàng lọc, lựa chọn ra các chủng tiềm năng hơn trong các nghiên cứu tiếp theo. Thí nghiệm tuyển chọn các chủng đƣợc đánh giá qua tốc độ sinh trƣởng và việc chuyển hóa hình thành clo trong môi trƣờng nuôi cấy. Kết quả sau 2 ngày nuôi cấy trên môi trƣờng MGB và môi trƣờng MGB bổ sung bromothymol blue làm chất chỉ thị màu, chúng tơi nhận thấy chủng H11 có sự chuyển màu rõ rệt hơn 20 chủng cịn lại (hình 7) và khả năng sinh trƣởng cũng nhanh hơn do vậy chúng tôi lựa chọn chủng H11 cho các nghiên cứu sâu hơn tiếp theo.

A B

Hình 7. Chủng vi khuẩn H11 trên mơi trƣờng MGB (A) và MGB bổ sung

Một phần của tài liệu (LUẬN văn THẠC sĩ) bước đầu nghiên cứu tinh sạch enzym dehalogenase từ chủng vi sinh vật phân lập tại việt nam (Trang 38 - 41)