Nhìn vào hình 3.9 ở điều kiện nuôi tĩnh mật độ tế bào của các chủng nghiên cứu đạt giá trị cao nhất. Tuy nhiên, ở điều kiện ni tĩnh và ni vi hiếu khí, mật độ tế bào của các chủng nghiên cứu cũng tương đối cao có giá trị OD>2.4. Vì vậy chúng tơi chọn điều kiện nuôi tĩnh là điều kiện thích hợp cho các chủng vi khuẩn lactic.
3.4.5. Lựa chọn tỷ lệ giống thích hợp
Các chủng vi khuẩn lactic được nuôi tĩnh trên môi trường M2, pH6, ở 35o C với các tỷ lệ giống cấy 0,5; 1; 3; 5; 7; 10. Sau 24 giờ nuôi cấy, kiểm tra mật độ tế bào của các chủng vi khuẩn.
Hình 3.10. Sinh trưởng của chủng Lactobacillus khi ni ở các tỷ lệ giống
khác nhau
Dựa vào hình 3.10 cho thấy, khi tăng tỷ lệ giống cấy từ 0,5-5% khả năng sinh trưởng của các chủng nghiên cứu tăng.Với tỷ lệ giống cấy 5%, các chủng có giá trị OD đạt mức cao nhất. Tuy nhiên, khi tỷ lệ giống tăng lên vượt quá 5%, mật độ tế bào của các chủng nghiên cứu có xu hướng giảm. Chúng tơi chọn tỷ lệ giống cấy là 5% cho thí nghiệm tiếp theo.
3.4.6. Lựa chọn nguồn nitơ thích hợp
Chuẩn bị môi trường nuôi cấy dịch thể của môi trường M2 với nguồn nitơ cao men được thay thế bởi các nguồn nitơ khác nhau như: meat extract, pepton, tryptone, urea, NH4+; NO2-, NO3-. Các chủng vi khuẩn được ni tĩnh ở 35oC trong vịng 24 giờ. Đánh giá mật độ tế bào của chúng khi nuôi ở các nguồn nitơ khác nhau. Kết quả ở hình 3.11
Hình 3.11. Sinh trưởng của các chủng nghiên cứu trêncác nguồn nitơ khác nhau
Từ kết quả trên cho thấy các chủng vi khuẩn được nuôi trong nguồn nitơ hữu cơ thì có mật độ tế bào cao hơn nguồn nitơ vô cơ. Khi không bổ sung nguồn nitơ, khả năng sinh trưởng của các chủng rất kém. Khả năng sinh trưởng của vi khuẩn yếu trong nguồn nitơ NO2-,NO3-. Khả năng sinh trưởng thể hiện mạnh ở môi trường chứa nguồn nitơ yeast extract ( cao malt), meat extract ( cao thịt) và peptron.Nhưng khả năng sinh trưởng tốt nhất ở nguồn nitơ cao men (Đc (+)) Vì vậy, chúng tơi chọn nguồn nitơ là cao men cho các nghiên cứu tiếp theo.
3.4.7. Lựa chọn nguồn Carbon thích hợp
Chuẩn bị mơi trường nuôi cấy dịch thể chứa các thành phần của môi trường M2 với nguồn glucose được thay thế bằng các nguồn Carbon ở các dạng khác nhau : galactose, saccharose, maltose, mannitol và lactose.