1.2 Các phương pháp phân tích Asen
1.2.6 Phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao ghép nối với hệ quang phổ hấp
thụ nguyên tử sử dụng kĩ thuật hydrua hóa (HPLC-HG-AAS)
Phương pháp này cho phép xác định được các dạng asen độc như AsIII, AsV, MMA và DMA. Tuy nhiên với phương pháp này asenobetain (AsB) và arsenocholine(AsC) khơng xác định được vì hai chất này khơng bị hydrua hóa bởi
hydro nguyên tử [42].
Phương pháp này cho phép xác định được các dạng asen độc như AsIII, AsV, MMA và DMA. Tuy nhiên với phương pháp này asenobetain (AsB) và arsenocholine(AsC) khơng xác định được vì hai chất này khơng bị hydrua hóa bởi hydro nguyên tử [42].
Nguyên tắc của phương pháp: các dạng asen được tách trên cột trao đổi ion của thiết bị HPLC sau đó được dẫn trực tiếp vào bộ hydrua hóa của thiết bị AAS. Ở đây asen được chuyển thành hơi asin bởi NaBH4 trong môi trường axit HCL. Hơi asin tiếp tục được dẫn sang bộ ngun tử hóa mẫu bằng khí Ar, hơi asin được ngun tử hóa tạo thành những đám hơi nguyên tử tự do. Một chùm ánh sáng đơn sắc chiếu qua đám hơi nguyên tử tự do này, tiến hành đo cường độ dòng của chùm sáng chiếu qua ta thu được phổ hấp thụ của nguyên tố [80, 81].
Giới hạn phát hiện của phương pháp: AsIII 0,9 µg/L; DMA 2,3 µg/L; MMA 1,4 µg/L và AsV 2,0 µg/L, ít nhiễu nền, tốc độ phân tích một nguyên tố tương đối nhanh, chi phí vận hành thấp [2, 5, 9]. Sơ đồ ghép nối các thiết bị trong hệ HPLC – HG – AAS được thể hiện trong hình 1.8
Hình 1.8. Sơ đồ ghép nối hệ HPLC – HG – AAS
Năm 1996, tác giả Xinrong Zhang [82] và nhóm của mình cũng cơng bố một kết quả nghiên cứu phân tích 4 dạng Arsenic là As(III), As(V), MMA, DMA trong mẫu huyết thanh của bệnh nhân bị bệnh thận mãn tính bằng phương pháp ghép nối HPLC-HG/AAS. Tác giả đã sử dụng song song 3 hệ HPLC nhằm tìm ra phương pháp
tách Arsenic tốt nhất cho mẫu huyết thanh là Sắc kí cặp ion pha đảo(reversed-phase ion-pair), sắc ký trao đổi anion nền polime (polymer-based), sắc ký trao đổi anion nền silica(silica-based). Sau khi so sánh tác giả đã chọn hệ HPLC là hệ sắc ký trao đổi anion nền silica. Pha động là dung dịch đệm phosphat 30mM, pH=4,5. Các mẫu huyết thanh cũng được chỉnh pH giống như pha động trước khi đưa vào cột tách. Giới hạn phát hiện của As(III), As(V), MMA, DMA lần lượt là 0.49; 0.44; 0.92 và 0.4µg/L. Thời gian tách trên HPLC, tạo hydrua và đo AAS có thể được hồn thành trực tuyến trong vòng 10 phút. Tuy nhiên trong các mẫu huyết thanh thực tế của các bệnh nhân bị bệnh thận mãn tính mà tác giả làm thí nghiệm thì chỉ có DMA. Ưu điểm của phương pháp là tiêu thụ mẫu ít, thời gian phân tích nhanh, tránh được nguy cơ ơ nhiễm mẫu, đặc biệt thích hợp với mẫu huyết thanh khi cần phân tích nhiều đối tượng trong cũng mẫu. Tuy vậy, điểm hạn chế của phương pháp này là không thể xác định được dạng AsB do nó khơng thể bị hidrua hóa.
1.2.7 Phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao ghép nối với cảm ứng cao tần và quang phổ phát xạ nguyên tử (HPLC – ICP – AES).