2.3.1 Lấy mẫu và tiền xử lý mẫu
Mẫu trắng: Huyết thanh của người khỏe mạnh.
Mẫu phân tích: Huyết thanh được lấy từ 20 bệnh nhân nghi nhiễm Asen tại viện 198 – Bộ Công an. (Với sự giúp đỡ của các kỹ thuật viên Bệnh viện).
Dựa trên nghiên cứu thực tế tại bệnh viện 198 – Bộ Công an và dựa trên các tài liệu nghiên cứu thì các mẫu máu tồn phần dùng trong luận văn này, sau khi được lấy ra khỏi cơ thể bệnh nhân bằng kim tiêm dùng một lần sẽ được đưa vào ống heparil hoặc ống Eppendorf 1,5ml có thêm Natri citrate 3,8% (hoặc 0,11M) tỉ lệ 9:1 nhằm mục đích vừa chống đơng cục bộ vừa tách hồng cầu máu. Máu tồn phần này được để lắng đơng tự nhiên trong thời gian từ 30 phút đến 1 giờ, sau đó mang ly tâm ở khoảng 3500 rpm/phút trong 10 phút. Phần dịch nổi phía trên chính là huyết thanh cần lấy. Dung dịch huyết thanh sẽ được thu thập chứa trong các túi nhựa chuyên dụng polypropylene dùng bảo quản máu trong bệnh viện và mang cấp đông ở -180C.
Mỗi lần sử dụng sẽ lấy từng túi nhỏ ra, rã đông và mang xử lý để phân tích. Phần huyết thanh khơng dùng hết được bảo quản lại trong tủ đông và sử dụng trong tuần (không để quá lâu sau khi mở túi), đặc biệt khơng để ngồi khơng khí sẽ gây chuyển dạng chất, làm hỏng mẫu dẫn đến kết quả phân tích sai lệch.
2.3.2 Bảo quản mẫu
Theo nghiên các tài liệu thì vật liệu thủy tinh thường hấp phụ anion bởi vì các tính chất của oxit silic trên bề mặt thủy tinh mà khi thủy phân sẽ tạo thành một lớp hấp phụ mang điện tích dương, chính vì vậy nó sẽ hấp phụ, giữ lại các anion làm giảm chất phân tích trong mẫu [59]. Trong nghiên cứu để xác định lượng asen trong mẫu máu và nước tiểu [71], các tác giả cũng chỉ ra rằng nếu mẫu được chứa trong vật liệu thủy tinh, sau 8 giờ tổng số As giảm 38% so với lượng ban đầu. Sự có mặt của các tác nhân oxy hóa như oxy hịa tan, CrO42-, MnO4-, Fe3+, Ag+… trong mẫu cũng làm thay đổi các dạng phân tích. Theo các tác giả [13], nếu mẫu nước chứa lượng oxy hịa
tan trong 10 giờ thì lượng As (III) chỉ được tìm thấy là 68% và As (V) tăng lên 33% so với mẫu ban đầu.
Từ những nghiên cứu đó dung dịch huyết thanh sẽ được thu thập chứa trong các túi nhựa chuyên dụng dùng bảo quản máu trong bệnh viện và mang cấp đông ở nhiệt độ - 180C. Khi cần sử dụng ta mang chúng ra rã đông, các mẫu rã đông được sử dụng trong 4 giờ ở nhiệt độ phòng, 1-2 ngày nếu bảo quản ở 80C, nếu muốn lưu trữ lâu hơn thì ta phải đậy nút chặt và bỏ ngăn đá ở nhiệt độ -180C (có thể bảo quản dùng trong 3-6 tháng [37]