CHƢƠNG 3 : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.6. Phổ hoạt tính kháng sinh củ a2 chủng xạ khuẩn nghiên cứu
Kiểm tra phổ kháng sinh của 2 chủng xạ khuẩn NA113 và NA115 cho thấy, dịch chiết sinh khối hồn tồn khơng ức chế các vi sinh vật kiểm định, chứng tỏ các chủng xạ khuẩn đã sinh tổng hợp chất kháng sinh và tiết vào môi trƣờng nuôi cấy. Dịch chiết từ dịch lên men của 2 chủng xạ khuẩn đều có hoạt tính kháng các vi sinh vật kiểm định ở mức độ khác nhau.
Cả hai chủng NA113 và NA115 đều sinh chất kháng sinh kháng đƣợc nhiều chủng vi sinh vật kiểm định bao gồm B. subtilis ATCC 6633, B. cereus ATCC
21778, S. epidermidis ATCC 12228, S. typhi IFO14193, E. coli ATCC 11105 và C.
albicans ATCC 10321; trong khi đó khơng kháng đƣợc 2 chủng vi sinh vật kiểm
định là A. faecallis và P. auroginosa. Với vi sinh vật kiểm định là E. aerogenes
ATCC 13048 chỉ có chủng NA113 kháng đƣợc với vịng kháng khuẩn 13 mm. Kết quả thu đƣợc về phổ kháng khuẩn của 2 chủng xạ khuẩn S. scabies NA113 và S. tendae NA115 mở ra tiềm năng ứng dụng sản xuất thuốc dùng trong y dƣợc.
Bảng 3.15. Phổ kháng khuẩn của 2 chủng xạ khuẩn S. scabies NA113
và S. tandae NA115
Chủng vi sinh vật kiểm định Đƣờng kính vịng đối kháng (mm)
NA113 NA115 B. subtilis ATCC 6633 25 24 B. cereus ATCC 21778 14 21 S. epidermidis ATCC 12228 26 22 E. coli ATCC 11105 22 17 E. aerogenes ATCC 13048 13 - A. faecallis - - S. typhi IFO 14193 15 19 P. auroginosa - - C. albicans ATCC 10231 9 15
KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
KẾT LUẬN
1. Từ các mẫu đất, nƣớc, bùn thu thập từ các vùng biển Hải Phòng, Quảng Ninh và Nghệ An đã phân lập đƣợc 40 chủng xạ khuẩn, trong đó 30 chủng có khả năng sinh chất kháng sinh. Chủng NA113 và NA115 có hoạt tính kháng sinh cao đƣợc chọn tiếp tục nghiên cứu
2. Nghiên cứu đặc điểm sinh học, kết hợp giải trình tự gene mã hóa 16S- rRNA, đã phân loại đƣợc chủng NA113 thuộc loài S. scabies và đặt tên là S. scabies NA113. Chủng có khả năng sinh trƣởng tốt với nguồn nitơ hữu cơ nhƣ cao nấm men, trypton, pepton. pH thích hợp từ 7 – 10. Chủng sinh trƣởng tốt ở nồng độ NaCl từ 1 – 5% và nhiệt độ 30o
C.
3. Nghiên cứu đặc điểm hình thái, sinh lí, sinh hóa và giải trình tự gene 16S- rRNA, đã phân loại đƣợc chủng NA115 thuộc loài S. tendae và đặt tên là S. tandae NA115. Chủng thích hợp với pH 6 – 10, nồng độ NaCl 1 – 3% và nhiệt độ 30oC.
4. Hai chủng S. scabies NA113 và S. tendae NA115 đều có khả năng kháng
lại 6 chủng vi sinh vật kiểm định là B. subtilis ATCC 6633, B. cereus ATCC 11778,
S. epidemidis ATCC 12228, C. albicans ATCC 10231. E. coli ATCC 11105, S. typhi IFO 14193. Ngoài ra chủng NA113 còn kháng đƣợc vi khuẩn E. aerogenes
ATCC 13048.
5. Mơi trƣờng thích hợp để chủng NA113 sinh chất kháng sinh là môi trƣờng MT7; pH 7 và thể tích mơi trƣờng ni cấy chiếm 20% thể tích bình. Trong khi đó mơi trƣờng thích hợp cho chủng NA115 là M1-ASW; pH 7 và thể tích mơi trƣờng ni cấy chiếm 20 – 25% thể tích bình là thích hợp nhất cho q trình lên men.
ĐỀ NGHỊ
1. Khảo sát các điều kiện lên men thích hợp cho tổng hợp chất kháng sinh. 2. Nghiên cứu tách chiết các chất kháng sinh từ 2 chủng xạ khuẩn biển S. scabies NA113 và S. tendae NA115, thử hoạt tính kháng tế bào ung thƣ của các
TÀI LIỆU THAM KHẢO
TIẾNG VIỆT
1. Ngơ Đình Quang Bính (2005), Vi sinh vật học công nghiệp – các chất kháng
sinh. Viện Khoa học Việt Nam, Hà Nội.
2. Nguyễn Lân Dũng, Đoàn Xuân Mƣợu, Nguyễn Phùng Tiến, Đặng Đức Trạch, Phạm Văn Ty (1972), Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật học – tập 1, NXB KH và KT, Hà Nội.
3. Nguyễn Lân Dũng, Phạm Thị Trân Châu, Nguyễn Thanh Hiền, Lê Đình Lƣơng, Đoàn Xuân Mƣợu, Phạm Văn Ty (1978), Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật học - tập 3, NXB KH và KT, Hà Nội.
4. Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty (2001), Vi sinh vật
học, NXB Giáo dục, Hà Nội.
5. Nguyễn Thành Đạt (2005), Cơ sở sinh học vi sinh vật, tập 1, NXB ĐHSP, Hà Nội.
6. Nguyễn Nhƣ Hiền (2006), Giáo trình Sinh học tế bào, NXB Giáo Dục, Hà
Nội.
7. Lê Gia Hy (1994), Nghiên cứu xạ khuẩn thuộc chi Streptomyces sinh chất kháng sinh chống nấm gây bệnh đạo ôn và thối rễ phân lập ở Việt Nam,
Luận án phó tiến sĩ khoa học Sinh học, viện CNSH, Trung tâm KHTN và CN Quốc Gia, Hà Nội.
8. Lê Gia Hy và cs (2005), “Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của chủng vi khuẩn biển HT0523”, Những vấn đề cơ bản trong nghiên cứu khoa học sự
sống định hướng y học, 549-552, NXB KHKT, Hà Nội.
9. Bùi Minh Lý, Ngô Quyền Bƣu, Nguyễn Duy Nhứt, Phạm Đức Thịnh, Trần Thị Thanh Vân (2007), “Nghiên cứu sản xuất Fucoidan từ rong nâu Việt Nam”, Tuyển tập các báo cáo khoa học, Hội nghị khoa học Biển Đông.
10. Chu Văn Mẫn (2011), Tin học trong Công nghệ Sinh học, NXB Giáo Dục
Việt Nam, Hà Nội.
11. Nguyễn Phƣơng Nhuệ (2010), Nghiên cứu quy trình lên men sản xuất kháng
sinh vancomycin từ xạ khuẩn Streptomyces orientalis 4912, Luận án tiến sĩ
Sinh học, viện CNSH, viện KH và CN Việt Nam, Hà Nội.
12. Nguyễn Duy Nhứt và cộng sự, (2009), “Bƣớc đầu nghiên cứu tính kháng khuẩn của một số loài rong biển Khánh Hịa”, Hội nghị Cơng nghệ sinh học
toàn quốc, 825- 830.
13. Nguyễn Xuân Thành, Nguyễn Bá Hiên, Hoàng Hải, Vũ Thị Hoan (2005), Vi
sinh vật công nghiệp, NXB Giáo dục, Hà Nội.
TIẾNG ANH
14. Carlos O., Carmen M., José A. S. (2009), “Antitumor Compounds from Marine Actinomycetes”, Marine Drugs, 7, 210-248.
15. Demain A. L. (1981), Industrial Microbiology, Science 214, 987 – 995. 16. George P. R. (2008), Encyclopedia of Genetics, Genomics, Proteomics and
Informatics, 3rd, Springer, 1709 – 1712.
17. Isoken Nekpen Henrietta Ogunmwonyi (2010), Assessment of antibiotic production by some marine Streptomyces isolated from the Nahoon beach,
Master of Science in Microbiology, Department of biochemistry and microbiology faculty of science and agriculture, University of for Hare, Alice, South Africa.
18. James B. M., Arjun H. B., Romila D. C., Gerhard S., Emmanuel Z., Mahmood P., Jeffrey J., Valerie S. B., Mustapha A., Chris M. F., Xidong F., Zhizi Z., Guy T. C. (2008), “Biosynthesis of Diazepinomicin/ECO-4601, a Micromonospora Secondary Metabolite with a novel ring system”; J. Nat. Prod, 71, 1585-1590.
19. Jin Xiong (2006), Essential Bioinformatics, Cambridge University press,
New York.
20. Kamerua Masahiro and Moris Kates (1999), “Structural diversity of membrane lipits in member of Halobacteriaceae”, Bioscience Biotechnology Biochem, 63(6), 969-972.
21. Keswanit J. and Whitman W.B. (2001), “Relationship of 16S rRNA sequence similarity to DNA hybridization in prokaryotes”, International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 51, 667 – 678.
22. Kin S Lam (2006), “Discovery of novel metabolites from marine actinomycetes”, Current Opinion in Microbiology, 245-251.
23. Krishnaraj M., Mathivanan N. (2009), “Antimicrobial potential of marine actinomycetes isolated from the Bay of Bengal” Envis centre newsletter, vol 7, issue 3.
24. Nor Ainy Mahyudin (2008), “Actinomycetes and Fungi associated with marine Invertebrates: A potential source of bioactive compounds”, Doctor of Philosophy in Microbiology at the University of Canterbury, New Zealand. 25. Paul R. Jensen, Dwight R., and Fenical W. (1991), “Distribution of
Actinomycetes in Near-Shore Tropical Marine Sediments”, Applied and
Environmental Microbiology, Vol. 57, No. 4, 1102-1108.
26. Paul R. Jensen, Tracy J. Mincer, Philip G. Williams, William Fenical (2005), “Marine actinomycete diversity and natural product discovery”,
Antonie van Leeuwenhoek, 43-48.
27. Robert S., E. G. D. Murray, Nathan R. (1957), Bergey’s Mannual of determinative bacteriology, 7th, Williams & Wilkins, 744-822.
28. Rofiq Sunaryanto, Bambang Marwoto (2010), “Marine actinomycetes screening of Banten west coast and their antibiotics purification”
29. Sambrook J. and Rusell W.D. (2001), Molecular cloning – Laboratory manual, vol 2, 3nd, pp 8.4 – 8.25, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, Newyork.
30. Shirling E.B., Gottlieb D. (1966) International of systematic bacteriology: Method for characterization of Streptomyces species. Derpartment of Botany
and Bacteriology Ohio Wesleyan University, Delaware, Ohio and Derpartment of Plant Pathology University of Illinois, Urbana, Illinois.
31. Stanley T. Williams et al. (1989), Bergey’s Mannual® of Systematic Bacteriology. Williams & Wilkins Vol. 4, 2452-2492.
32. Sumei Li, Xinpeng Tian, Siwen Niu, Wenjun Zhang, Yuchan Chen, Haibo Zhang, Xianwen Yang, Weimin Zhang, Wenjun Li, Si Zhang, Jianhua Ju, Chángheng Zhang (2011) “Pseudonocardians A-C, New diazaanthraquinone derivatives from a deap-sea actinomycete Pseudonocardia sp. SCSIO 01299”
Marine Drugs, 9, 1428-1439.
33. Turk biol (2003), Investigaion of the Antimicrobial Activity of some Streptomyces Isolates, No 27, 79-84.
34. Valli S, Suvathi Sugasini S, Aysha OS, Nirmala P, Vinith Kumar P và Reena A (2012), “Antimicrobial potential of actinomycetes species isolated from marine environment”, Asian Pacific Journal og Tropical Biomedicine,
469-473.
35. Vijaya Baskara Sethubathi G. and Ashok Prabu V. (2010), “Antibacterial activity of Cyanobacterial species from Adirampattinam coast southeast coast of Palk bay”, Current research Journal of Biological Sciences 2(1), 24- 26.
36. Waksman, S.A. (1961), “Classification, identification and description of genera and species”, The Actinomycetes, vol 2, The Williams and Wilkins