Sơ đồ bố trí thí nghiệm
Hình 2.4 Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định loại và tỷ lệ enzyme
Cá Đù xay nhỏ đã cấp đông (500g)
Rã đông
Thủy phân: Nhiệt độ 450C, pH tự nhiên, thời gian 6h, tỉ lệ nước/nguyên liệu: 1/1, với tỉ lệ các enzyme
Flavourzyme 0.1% Protamex 0.05% Flavourzyme 0.05% Protamex 0.1% Flavourzyme 0.1%
Xác định nitơ tổng số, nitơ acid amin trong dịch thủy phân Protamex 0.1% Đối chứng 0% enzyme Chọn loại và tỷ lệ enzyme thích hợp
Thuyết minh sơ đồ
- Nguyên liệu: Cá Đù được lựa chọn theo tiêu chuẩn cá tươi, sau khi vận chuyển về phòng thí nghiệm tiến hành rửa để loại bỏ tạp chất, sau đó xay nhỏ, cân chính xác 500g cho vào mỗi túi PE sau đó đem cấp đông trong tủ đông ở phòng thí nghiệm để dành cho các thí nghiệm về sau.
- Rã đông: Nguyên liệu được rã đông trong tủ lạnh phòng thí nghiệm cho đến khi rã đông hoàn toàn.
- Thủy phân: Quá trình thủy phân được thực hiện trong bể ổn nhiệt ở nhiệt độ cố định 450C, thời gian 6 giờ, pH tự nhiên của nguyên liệu, tỉ lệ nước/ nguyên liệu=1/1. Cân 500g nguyên liệu cho vào cốc thủy tinh chịu nhiệt, cho thêm 500ml nước cất khuấy đều sau đó bịt kín bằng giấy bạc cho vào bể ổn nhiệt. Khi nhiệt độ trong dịch đạt đến 450C tiến hành cho enzyme vào, khi nhiệt độ đạt mới bắt đầu tính thời gian thủy phân. Bố trí 4 mẫu với loại enzyme khác nhau như sau:
+ Mẫu 1: Không dùng enzyme
+ Mẫu :2 Enzyme Protamex 0.1% (0.5g). + Mẫu 3: Enzyme Flavourzyme 0.1% (0.5g).
+ Mẫu 4: Enzyme Protamex 0.05% (0.25g) + enzyme Flavourzyme 0.05% (0.25g). + Mẫu 5: Enzyme Protamex 0.1% (0.5g) + enzyme Flavourzyme 0.1% (0.5g). Đối với mẫu kết hợp 2 loại enzyme thì sau khi nhiệt độ đạt thì cho enzyme Protamex vào trước sau 1 giờ cho tiếp enzyme Flavourzyme. Trong quá trình thủy phân cứ 10 phút tiến hành khuấy trộn mẫu bằng đũa thủy tinh cho đều để cho quá trình thủy phân diễn ra nhanh và đều ở mọi điểm.
- Sau khi thủy phân xong xác định hàm lượng nitơ tổng số, nitơ acid amin trong dịch thủy phân: Lọc mẫu bằng giấy lọc sau đó xác định hàm lượng nitơ tổng số, hàm lượng nitơ acid amin, từ đó chọn loại và tỉ lệ enzyme thích hợp.