Hóa chất, dụng cụ và thiết bị

CHƯƠNG 2 THỰC NGHIỆM

2.2. Hóa chất, dụng cụ và thiết bị

2.2.1. Hóa chất

- Chất chuẩn digoxin (viện kiểm nghiệm thuốc trung ương, chuẩn phịng thí nghiệm, 99,5% khan, 100mg/ống)

- Chất chuẩn digitoxin (viện kiểm nghiệm thuốc trung ương, 99,2% khan, 100mg/ống) Ma trận hàm lượng chất X (10 x 4) Ma trận tín hiệu đo Y (10 x 106) Ma trận trọng số, trị số Đo phổ IR Matlab Ma trận hàm lượng chất chuẩn X (30 x 4) Ma trận tín hiệu đo Y (30 x 106) Ma trận trọng số, trị số Đo phổ IR Matlab

- Talc (99,2% khan, Nơi sản xuất Hungary)

- Magie stearat (99,3% khan, nơi sản xuất Hungary) - Lactose (99,2% khan, Nơi sản xuất Mỹ)

- Axeton (Merck)

- Thuốc viên Digoxin – Richter (hãng sản xuất GedeonRichter – Hungary) - Thuốc viên Digoxine – Nativelle (hãng sản xuất Teofarma – Pháp)

2.2.2. Thiết bị

- Cân phân tích Sartorious độ chính xác ± 0,0001g

- Máy quang phổ hồng ngoại Agilent Technologies Cary 600 Series FTIR spectrometer, dải bước sóng đo 7500-2800 cm-1.

- Bộ dụng cụ ép viên: Agilent Technologies standard sampling kit (part no: Pike- 162- 1000).

- Hệ thống HPLC Shimadzu 10Avp với detector PDA Shimadzu SPD – M10Avp.

- Phần mềm Matlab 7.0: Chương trình hồi qui đa biến tuyến tính PLS, CLS, ILS và PCR để phân tích đồng thời các cấu tử trong cùng hỗn hợp.

- Phần mềm Minitab 15.

2.3. Phương pháp phân tích

2.3.1. Phương pháp xử lý mẫu

Quy trình chuẩn bị các mẫu chuẩn

Chuẩn bị 40 mẫu chứa hỗn hợp dược phẩm có tổng khối lượng là 3g với thành phần: 0% – 0,3 % digoxin, 0% – 0,3 % digitoxin, 60 – 70 % lactose, 23 – 30 % talc, 7 – 9 % magie stearat, sau đó tiến hành xử lý mẫu theo quy trình 2.1

Hình 2.1 Quy trình chuẩn bị mẫu chuẩn

Mẫu phải được xử lý trong phịng có máy hút ẩm và mẫu sau khi trộn phải bảo quản trong bình hút ẩm để tránh sự hấp thụ nước. Yêu cầu đối với viên nén phải trong suốt.

Quy trình chuẩn bị các mẫu thực

Cân 20 viên thuốc, tính khối lượng trung bình của một viên thuốc, sau đó nghiền nhỏ trong vịng 5 phút, sau đó thực hiện quy trình như Hình 2.1.

2.3.2. Phương pháp phân tích

Phép phân tích các glycoside tim được thực hiện bằng phương pháp đo phổ hồng ngoại truyền qua ở bước sóng 2800 – 3000 cm-1 (đo phổ hấp thụ hồng ngoại ở 106 bước sóng). 3 g mẫu 3 mg hỗn hợp + 97 mg KBr 25 mg Viên nén Tín hiệu đo Nghiền và trộn 15 phút Đo phổ IR 3000-2800 cm-1 Ép viên (nén 15 lần) Nghiền và trộn 10 phút

Sau khi có được ma trận hàm lượng chất chuẩn và ma trận tín hiệu của 30 mẫu chuẩn và 10 mẫu kiểm tra. Nhập các dữ liệu này vào phần mềm Matlab, dùng thuật toán hồi quy đa biến trong Matlab để định lượng hai hoạt chất digoxin và digitoxin.

Phép phân tích các glycoside tim cũng được thực hiện trên hệ sắc kí lỏng hiệu năng cao của Shimadzu, kết nối với hệ bơm gồm 4 kênh: bộ điều khiển, lò cột, bộ trộn dung môi và detector photo-diode – array (PDA) đặt ở bước sóng 225 nm. Các điều kiện chạy máy được tóm tắt như sau:

- Nhiệt độ cột 30oC - Van bơm mẫu 20l

- Hệ pha động gồm 2 kênh: kênh A là H2O, kênh C là ACN

- Chế độ chạy đẳng dòng, với tốc độ pha động là 0,7ml/phút. Tổng thời gian chạy 1 mẫu là 15 phút.