nh thái tế bào của các chủng CB2, CB3, CT4, CT5
Theo các báo cáo đã công bố, các vi khuẩn sinh khí hydro hầu hết l ình que [56, 64]. Vì vậy, kết quả quan sát được của chúng tôi cho thấy ủng vi khuẩn tạo khí mà chúng tơi phân lập được cũng có đặc tính
ủng CB1 khi nhuộm cho ra kết quả là vi khuẩn Gram âm, b ồng safranin khi nhuộm Gram. Nhiều cơng trình nghiên cứu đ
ồm cả vi khuẩn Gram âm và Gram dương. Trong đó v ủ yếu [10]. Điều này cũng tương tự với kết quả nghi
ày tiếp tục được định danh sử dụng cho các nghi
Hình 3.2: Hình thái tế bào chủng CB1
CB2 CB3
CT4 CT5
CB1
, CB3, CT4, CT5
ố, các vi khuẩn sinh khí hydro hầu hết là các vi ợc của chúng tôi cho thấy các ợc cũng có đặc tính chung đó. ẩn Gram âm, bắt màu ứu đã công bố các chủng à Gram dương. Trong đó vi khuẩn ự với kết quả nghiên cứu của ợc định danh sử dụng cho các nghiên cứu tiếp theo.
3.1.2. Định danh dựa vào khóa phân loại Bergey
Sau khi phân lập được các chủng khác nhau, dựa vào đặc điểm hình thái, sinh lý, sinh hóa, 5 chủng sẽ được đánh giá dựa vào Khóa phân loại Bergey để tuyển chọn những chủng có khả năng sinh hydro.
Bảng 3.2: Tính chất sinh lý hóa sinh của các chủng đã phân lập từ phân gia súc Ký hiệu Ký hiệu chủng CB1 CB2 CB3 CT4 CT5 Gram - + + + + Di động + - + + - Catalase + - - - - Urease - - - - - Indole - + - + + Gelatinese - + + + + Lectin + - - + + Citrate + - - - - Oxidase - - - - - MR - + VP + - Khả năng sinh bào tử - + + + +
Dựa vào khóa định loại Berey các chủng CB2, CB3, CT4, CT5 có các đặc điểm đặc trưng thuộc chi Clostridium như: Gram dương, catalase âm tính, có khả
năng sinh bào tử…[80].
3.1.3. Định danh lồi bằng phân tích 16S rDNA
Sau khi tách chiết DNA genome và tinh sạch, DNA của các chủng vi khuẩn được dùng làm khuôn để nhân bản đoạn gen mã hóa 16S rRNA nhờ sử dụng cặp mồi đặc hiệu 27F và 1527R [46]. Sau khi kiểm tra kết quả PCR (Hình 3.3), sản
phẩm PCR sau khi tinh sạch sẽ đ ribosome.
Kết quả điện di genome v kĩ thuật PCR, các mẫu kí hiệu v khơng bị nhiễu và khơng có băng ph phù hợp với kích thước của đoạn gen m