- Đặt gel vào khay
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3.3.1.3. Kết quả quy tụ gen kháng bphY vào giống KDđb bằng lai hồi quy với sự trợ giúp của CTPT
- Nhằm quy tụ 2 gen kháng bph4 và BphY vào giống KDđb, chúng tôi tiến hành lai các dòng BC3F1K-D có mang gen kháng bph4 với BC3F1K-G có mang gen kháng trội BphY. Trên lý thuyết, hai tổ hợp các dòng lai này có nền gen rất gần với KDđb (93,75%). Trên thực tế, chúng tôi cũng thu được kiểu hình về các đặc tính nông học của các con lai hồi quy ở các dòng BC này tương đối đồng nhất.
Kết quả phép lai quy tụ thu được 19 cá thể QT1F1-K-D-G . Những dòng này được tiến hành tự phối, chúng tôi thu được 24 các thể QT1F2-K-D-G có mang gen kháng, được đánh số từ 1 đến 24 .
Phân tích ADN bằng phản ứng PCR với 2 mồi RM8213 và RM3735 để xác định sự có mặt của các bph4 và BphY trong các dòng QT1F2-K-D-G được minh họa trong hình 3.9.
Hình 3.9. Kết quả điện di sản phẩm PCR của các dòng lúa QT1F2-K-D-G với mồi RM8213 trên gel polyacrylamide 4,5%
Giếng 1. KDđb 2. DG5
Hình 3.10. Kết quả điện di sản phẩm PCR của các dòng lúa QT1F2-K-D-G -
với mồi RM3735 trên gel polyacrylamide 4,5%
Giếng 1. KDđb 2. GC9
3 – 24: Các cây QT1F2-K-D-G số ...
Phân tích kết quả 2 phản ứng PCR với 2 mồi RM8213 và RM3735 cho thấy các cây số ...có một băng giống DG5, các cây số...có một băng giống GC9. Kết quả này cho thấy các cây số... mang kiểu gen kháng lặn
bph4 đồng hợp tử , các cây số ... mang kiểu gen kháng trội BphY đồng hợp
Các cây số ...có 2 băng, 1 băng giống KDđb, 1 băng giống DG5 (Hình 3.3.1.2.1 ) và các cây số... có 2 băng, 1 băng giống Q5 và 1 băng giống GC9. Kết quả này cho thấy, các cây số...mang gen bph4 ở thể dị hợp tử, các cây số... mang gen BphY ở dạng dị hợp tử.
Chúng tôi nhận thấy các cây số ...có một băng giống DG5 (Hình 3.9) và cũng có một băng giống GC9 (Hình 3.10). Điều này chứng tỏ rằng 2 gen kháng bph4 và BphY đã cùng được chuyển vào các cây số...
Như vậy, chúng tôi nhận xét thấy trong 24 cá thể nghiên cứu ở QT1F2-K-D- G , có ...cây có kiểu gen đồng hợp tử về gen bph4, ...câyđồng hợp tử về gen BphY , ...cây dị hợp tử về gen bph4 , ...cây dị hợp tử về gen BphY,
...cây dị hợp tử mang cả 2 gen kháng bph4 và BphY.
Bảng 3.5. Kết quả xác định sự hiện diện của các gen kháng bph4 và BphY
trong quần thể QT1F2-K-D-G nghiên cứu thông qua chỉ thị RM8213 và RM3735
Tên dòng/giống RM8213 RM3735 Số gen Q5 a a 0 DG5 b - 1 GC9 - c 1 1 a ac 1 3 a ac 1 5 ab ac 2 6 ab a 1 9 b a 1 10 ab ac 2 12 b a 1 17 a c 1 18 ab a 1 20 a a 0 25 b c 2 26 a ac 1 28 - ac 1 31 b c 2 33 ab a 1 35 ab ac 2 36 ab a 1 38 a ac 1
Chú thích: a: Băng đặc trưng của Q5 b: Băng đặc trưng của DG5 c: Băng đặc trưng của GC9
ab: Dòng mang cả hai băng đặc trưng của Q5 và DG5 ac: Dòng mang cả hai băng đặc trưng của Q5 và GC9