- Yang HY, You AQ, Yang ZF, Zhang F,
Các giống nhận gen: Một số dòng lúa có nền gen ưu việt đang được
2.2.2. Quy trình chọn giống nhờ chỉ thị phân tử bằng phương pháp hồi giao
hồi giao
- Lai quy tụ gen kháng bphY và BphZ
tạo quần thể con lai F1, sử dụng phương pháp lai hữu tính cưỡng bức (thụ phấn bằng tay). Hoa lúa lúc chưa tung phấn của cây KDđb, Q5 được khử đực bằng cách cắt bỏ 6 bao phấn của mỗi hoa, sau đó lấy hạt phấn của cây KDđb, Q5 thụ phấn cho DG5.
Sơ đồ1: Chọn giống nhờ chỉ thị bằng phương pháp hồi giao
Tiến hành tương tự với các cặp lai (KD x CG9), (Q5 x CG9) với cây cho phấn là CG9 và KDđb, Q5 làm cây nhận phấn.
Thu cây F1, tách chiết AND để kiểm tra bằng phân tích ADN nhờ chỉ thị phân tử. Giữ lại những cây có mang gen kháng.
Tiếp tục cho cây mang gen kháng đã được kiểm tra bằng phân tích ADN lai trở lại để dồn gen kháng bằng phương pháp lai cưỡng bức theo các
Q5; KD x CG9
BC2F1 *
* Kiểm tra bằng phân tích ADN
Chọn lọc kiểu hình
Kiểm tra kiểu hình để khẳng định độ tin cậy của CTPT
Dòng mang gen quy tụ
DG5 x Q5; KD F1 BC1F1 BC2F1 * BC1F1 F1 * * x
bước được tiến hành như sơ đồ 1. Tiến hành lai hồi quy để thu được BC2F1. Tiến hành tách chiết và kiểm tra AND với các cá thể của các dòng BC2F1 thu được có kiểu hình khá. Giữ lai cá dòng có mang gen kháng.
Tiến hành lai giữa các dòng BC2F1 mang gen kháng bphY và BphZ với nhau, thu được các dòng QT1F1. Kiểm tra AND dòng lai bằng chỉ thị phân tử để xác định dòng mang gen kháng.
Kiểm tra kiểu hình dòng lai quy tụ QT1F2 mang các gen kháng thu được bằng phương pháp đánh giá kháng/ nhiễm của IRRI và Viện BVTV.