CHƯƠNG 1 : TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU
2.4. Biến số và nội dung nghiên cứu
Bảng 2. 6. Chỉ tiêu nghiên cứu trên lô chủng gốc BV-MSV-0210 và lô chủng sản
xuất BV-WSV-0310
TT Chỉ tiêu Phương pháp Tiêu chuẩn viện dẫn
1
Nhận dạng chủng MSV và WSV với kháng thể đặc hiệu
ELISA TCCS; DĐ Châu Âu, 2018; WHO
TRS 963, PL1 2 Nhận dạng và xác định tính ổn định di truyền của chủng MSV và WSV
Giải trình tự gen TCCS, DĐ TQ, WHO TRS 963
3 Tương đồng nucleotide Giải trình tự gen TCCS, DĐ TQ, WHO TRS 963
4 Tương đồng protein Giải trình tự gen TCCS, DĐ TQ, WHO TRS 963
5 Hiệu giá vi rút trên tế
bào Tạo đám hoại tử PFU TCCS, DĐVN V, 2017; Dược điển
Châu Âu, 2018; WHO TRS 963
6 Hiệu giá vi rút trên
động vật thí nghiệm Thử trên não chuột nhắt TCCS, DĐVN V, 2017; Dược điển Châu Âu, 2018; WHO TRS 963 7 Nhiệt độ bảo quản phù
hợp
Hiệu giá chủng được kiểm tra sau khi bảo quản ở các dải nhiệt độ khác nhau, trong các khoảng thời gian khác nhau
TCCS, WHO TRS 963
8 Vô trùng Cấy trực tiếp trên môi trường
Thioglycholate và soybean casein
DĐVN V, 2017; DĐ Châu Âu, 2018; WHO TRS 963, PL1
9 Kiểm tra nhiễm
Mycoplasma
Cấy trên môi trường PPLO lỏng I, II,
thạch PPLO DĐVN V, 2017; DĐ Châu Âu, 2018; WHO TRS 963, PL1 10 Vi rút ngoại lai trên chuột
nhắt Thử trên chuột nhắt (tiêm não và phúc mạc) DĐVN V, 2017; DĐ Châu Âu, 2018; WHO TRS 963, PL1 11 Vi rút ngoại lai trên chuột
nhắt ổ Thử trên chuột nhắt ổ (tiêm não và phúc mạc) DĐVN V, 2017; DĐ Châu Âu, 2018; WHO TRS 963, PL1 12 Vi rút ngoại lai trên
chuột lang Thử trên chuột lang (tiêm phúc mạc) DĐVN V, 2017; DĐ Châu Âu, 2018; WHO TRS 963, PL1 13 Vi rút ngoại lai trên tế
bào Tế bào Vero, BHK21, MRC5 DĐVN V, 2017; DĐ Châu Âu, 2018;
Bảng 2.7. Chỉ tiêu nghiên cứu trên vắc xin JECEVAX
TT Chỉ tiêu Phương pháp Tiêu chuẩn chấp nhận Tiêu chuẩn viện dẫn
1 Cảm quan Quan sát bằng mắt thường Dung dịch trong suốt, đồng nhất và khơng có vật thể lạ
DĐVN V, 2017; DĐ Châu Âu, 2018; WHO TRS 963, PL1
2 Thể tích Cân và đo tỷ trọng ≥ 1,0 ml DĐVN V, 2017; DĐ Châu Âu, 2018; WHO TRS 963, PL1 3 pH Máy đo pH 6,8-7,4 DĐVN V, 2017; DĐ Châu Âu, 2018; WHO TRS 963, PL1 4 Hàm lượng Thimerosal Thuốc thử acetylacetone, đo OD, = 415nm (DĐVN IV, 2009, PL15.29)
≤ 120 µg/ml DĐVN V, 2017; DĐ Châu Âu, 2018; WHO TRS 963, PL1 5 Hàm lượng Formaldehyde Thuốc thử Ditizon, đo OD, = 480 nm (DĐVN IV, 2009, PL15.25)
≤ 10 µg/ml DĐVN V, 2017; DĐ Châu Âu, 2018; WHO TRS 963, PL1 6 Hàm lượng DNA tồn dư PCR/ phương pháp lai điểm ≤ 10 ng/ml DĐVN V, 2017; DĐ Châu Âu, 2018; WHO TRS 963, PL1 7 Hàm lượng
protein tổng số Lowry ≤ 80 µg/ml DĐVN V, 2017; DĐ Châu Âu, 2018; WHO TRS 963, PL1
8 Kiểm tra vô
trùng
Cấy trực tiếp trên môi trường
Thioglycholate và
soybean casein
(DĐVN IV, 2009, PL15.7)
Khơng có sự phát triển của vi khuẩn và nấm sau 14 ngày theo dõi
DĐVN V, 2017; DĐ Châu Âu, 2018; WHO TRS 963, PL1
9 An toàn chung DĐVN IV, 2009,
PL15.11
Trong vòng 7 ngày theo dõi toàn bộ động vật thí nghiệm sống, khỏe mạnh, tăng cân và khơng có biểu hiện bệnh lý hoặc nhiễm độc
DĐVN V, 2017; DĐ Châu Âu, 2018; WHO TRS 963, PL1
10 Chất gây sốt Tiêm tĩnh mạch tai thỏ, DĐVN V, 2009, PL 15.12
Mẫu thử đạt yêu cầu về chất gây sốt nếu nhiệt độ chênh lệch của mỗi thỏ ≤ 0,60C và tổng nhiệt độ chênh lệch của 3 thỏ ≤ 1,30C DĐVN V, 2017; DĐ Châu Âu, 2018; WHO TRS 963, PL1
11 Công hiệu Phương pháp trung hòa giảm 50% đám hoại tử (PRNT50)
≥ 1,3 log PRNT50/ml; hoặc công hiệu tương quan của vắc xin thử so với vắc xin mẫu chuẩn ≥ 1,0
DĐVN V, 2017; DĐ Châu Âu, 2018; WHO TRS 963, PL1