DHA và các dẫn xuất của nó được cơ lập từ hỡn hợp các acid béo bất bão hịa đa từ nguờn tự nhiên bằng phương pháp bạc nitrate. Phương pháp bao gờm sự tính toán lượng
bạc nitrate cần để tạo phức với các acid bất bão hịa đa dựa trên sớ mol nới đơi có trong acid béo bất bão hịa.
DHA được tách chiết và tinh sạch từ dầu cá ngừ bằng phương pháp tách chiết nhiệt đợ thấp kết hợp với phương pháp kết tinh sắc ký cợt Ag+/silica gel hoặc phương pháp riêng lẻ với sắc kí cợt Ag+/silica gel. Dung mơi giải ly cợt là hỡn hợp của aceton (hoặc diethyl ether)-hexane.
Mợt phương pháp khác được sử dụng để tinh sạch hỡn hợp các acid béo methyl ester từ dầu cá hoặc dầu thực vật là phương pháp sắc ký lớp mỏng ion bạc. Các bản mỏng silica gel được nhúng trong 1 phút vào dung dịch bạc nitrate 4% trong methanol-nước (9:1). Sau đó bản mỏng được sấy khơ 2 phút dưới ánh sáng mờ trong tủ sấy thơng gió và tiếp tục trong 20 phút ở 1000C. Chúng được giữ trong 1 hợp được đậy kín ở trong tới.
Dung mơi giải ly có thể là hexane-diethyl ether (9:1) để tách các acid béo bão hịa, acid béo có 1 nới đơi và acid béo có 2 nới đơi, hoặc là toluen-ethyl acetate (9:1) để tách tất cả các loại acid béo theo đợ bất bão hịa.
Tỷ lệ dung mơi có thể thay đởi 1 ít theo điều kiện thí nghiệm (loại bản mỏng, đợ ẩm, nhiệt đợ, hình dạng của bình giải ly …) để nâng cao hiệu quả của việc phân tách. Việc thêm 1% acid acetic theo thể tích vào pha đợng cho phép các vết acid béo đạt đợ phân giải tớt. Bảng mỏng được sấy trong tủ sấy thơng gió, nhúng vào dung dịch nước đã bão hịa sodium thiosulphate trong 1 phút và rửa dưới dịng nước chảy trong 1 phút. Sau đó tiếp tục sấy khơ và phun xịt với primuline để phát hiện các vết acid béo phát huỳnh quang dưới đèn UV.
3. Phương pháp nhận danh DHA: