Đây là phương pháp đơn giản để nhận danh DHA trong sữa bị. Phương pháp bao gờm ba bước :
(1) sự methyl hóa DHA mợt lần trong sữa bị mà khơng cần phải loại béo trước (2) sự cơ đặc methyl ester bằng sắc ký cợt silica gel có chỉnh đởi với AgNO3
(3) sự phát hiện DHA methyl ester bằng cách sử dụng sắc ký lớp mỏng hiệu năng cao-tập trung vết (spot focusing-high performance thin layer chromatography). DHA được methyl hóa trực tiếp trong sữa bị và được cơ đặc mợt cách có chọn lọc nhờ vào ái lực của nó với các ion bạc. Phương pháp này khơng cần sự trích ly lipid tớn hao lượng lớn dung mơi hữu cơ và khơng cần hệ thớng sắc ký khí.
c. Phương pháp phổ hồng ngoại chuyển dạng Fourier (Fourier transforminfrared spectroscopy – FT-IR) infrared spectroscopy – FT-IR)
Những co giãn của nới =C-H alkene của các acid béo bất bão hịa trong dầu sẽ hấp thu ở bước sóng 3010cm-1 với những cướng đợ khác nhau. Nguyên tắc hoạt đợng của phương pháp này : nguờn sáng phát ra mợt chùm bức xạ đến gương cầu lõm, tại gương cầu lõm sẽ cho chùm tia phản xạ song song đập vào gương phẳng.
Ánh sáng phản xạ từ gương phẳng sẽ đi vào giao thoa kế michelson rời đi qua mẫu đến detector. Tín hiệu quang sau đó sẽ được biến đởi thành tín hiệu điện, qua bợ khuếch đại rời và bợ máy tính lắp ghép với máy phở. Máy tính sẽ xử lý tín hiệu và in ra phở. Sự đo bằng FT-IR trên thực tế có thể dự đoán được thành phần của mỡi loại PUFA trong mẫu dầu được kiểm tra.
d. Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (high performance liquidchromatography – HPLC) hay cịn gọi là sắc ký lỏng cao áp (high pressure liquid chromatography – HPLC) hay cịn gọi là sắc ký lỏng cao áp (high pressure liquid chromatography)
Phương pháp HPLC thuợc loại sắc ký cợt có pha đợng là chất lỏng. Khác với các loại sắc ký lỏng khác, hiệu quả phân tích của HPLC rất cao là do vật liệu nhời cợt có kích thước hạt rất bé (5-10 μm) và đợ đờng nhất cao cùng với việc sử dụng nhiều đầu dị khác nhau.
HPLC tỏ ra ưu việt hơn so với sắc ký khí khi phân tích thành phần của dầu cá do dầu cá khơng cần phải methyl ester hóa trước khi phân tích. Dầu cá khi phân tích sẽ được hịa tan vào dung mơi thích hợp và được phân tích ở nhiệt đợ phịng. Trong sắc ký phân bớ, thơng thường người ta sử dụng pha tĩnh phân cực hơn so với pha đợng và gọi là sắc ký thuận
(normal phase). Nhưng trong kỹ thuật HPLC ngược lại người ta thường dùng pha tĩnh kém
phân cực hơn và gọi đó là sắc ký pha đảo (inversed phase) (RP-HPLC). Dung mơi sử dụng ở phương pháp này là dung mơi phân cực, thường ít đợc hại, rẻ tiền và khơng gây ơ nhiễm mơi trường (thường dùng nước có bở sung methanol, ethanol hoặc acetonitrile).