D anh mục bảng
4.3.3. Kết quả nghiên cứu Quy trình sản xuất vắc xin vô hoạt ND-IB với chất
vón, không lắng cặn, không có dị vật, không bị phân lớp, đều đạt chỉ tiêu vô trùng.
Độ nhớt vắc xin đạt giá trị trung bình 40,3 mPa.s, nằm trong giới hạn cho phép đối với vắc xin nhũ dầu 30-45 mPa.s.
4.3.2. Kết quả đánh giá 9 nghiệm thức vắc xin trên động vật thí nghiệm
Tại mỗi nghiệm thức, thử nghiệm trên gà mẫn cảm. Sau thời gian theo dõi, đánh giá độ an toàn và hiệu giá kháng thể kháng virus Newcastle bằng phản ứng HI, kháng thể kháng virus IB bằng phản ứng ELISA. Kết quả được trình bày bảng 4.24.
Bảng 4.24. Kết quả đánh giá 9 nghiệm thức trên động vật thí nghiệm
ND-HI (HI trung bình)
(% Titer ≥ 4 log2) <50% 50% -79% ≥80%
Số nghiệm thức 2 4 3
IB-Elisa
(% dương tính) <50% 50% -79% ≥80%
Số nghiệm thức 3 4 2
Theo số liệu bảng 4.24 cho thấy, với mỗi một loại kháng thể, tỷ lệ nghiệm thức cho kết quả phân đều ở 3 nhóm, nhóm cho kết quả <50%; nhóm cho kết quả từ 50% -79%, và nhóm cho kết quả ≥80% dương tính với các phương pháp xét nghiệm huyết thanh học. Có 2 nghiệm thức chung cho kết quả ≥80% mẫu huyết thanh dương tính với kháng thể kháng virus ND và kháng thể kháng virus IB.
Theo dữ liệu, lựa chọn được nghiệm thức tối ưu nhất thỏa mãn cho hiệu giá huyết thanh cao với cả 2 bệnh Newcastle và bệnh Viêm khí quản truyền nhiễm bao gồm nồng độ kháng nguyên virus Newcastle chủng LaSota là 16.107 EID50/liều và 8.105 EID50/liều đối với virus IB-H120
4.3.3. Kết quả nghiên cứu Quy trình sản xuất vắc xin vô hoạt ND-IB với chất bổ trợ dầu bổ trợ dầu
4.3.3.1. Quy trình sản xuất vắc xin vô hoạt ND-IB với chất bổ trợ dầu
Quy trình sản xuất vắc xin vô hoạt ND-IB là một quy trình sản xuất sinh học liên tục. Ở mỗi bước đều được kiểm tra chặt chẽ đặc biệt là chỉ tiêu vô trùng.
Để có vắc xin chất lượng, yêu cầu nguyên liệu sử dụng trong sản xuất phải được lựa chọn đáp ứng đúng tiêu chuẩn, thao tác kỹ thuật dứt khoát, tránh tạp nhiễm trong quá trình thực hiện.
Quy trình sản xuất vắc xin vô hoạt ND-IB với chất bổ trợ dầu được biểu diễn ở hình 4.1.
Hình 4.1. Sơ đồ quy trình sản xuất vắc xin vô hoạt ND-IB
Ở từng giai đoạn có các bước kiểm tra tương ứng.
Giai đoạn 1: Kiểm tra tỷ lệ trứng có phôi, sức sống cúa phôi, kiểm tra vô trùng và hiệu giá virus.
Giai đoạn 2: kiểm tra virus sau bất hoạt
Giai đoạn 3: Kiểm tra vắc xin sau phối trộn, chia liều: vô trùng, an toàn, hiệu lực
Giai đoạn 4: Kiểm tra quá trình đóng gói
Chuẩn bị kháng nguyên virus
Newcastle:
(1)Vệ sinh trứng và ấp trứng 37,50C,
độẩm 65%
(2)Gây nhiễm virus Newcastle vào
trứng gà có phôi
(3)Ấp tiếp ở 370C, độẩm 65%
(4)Thu hoạch dịch niệu nang
(5)Kiểm tra dịch niệu
Chuẩn bị kháng nguyên virus IB:
(1)Vệ sinh trứng và ấp trứng 37,50C,
độẩm 65%
(2)Gây nhiễm virus IB vào trứng gà
có phôi
(3)Ấp tiếp ở 370C, độẩm 65%
(4)Thu hoạch dịch niệu nang
(5)Kiểm tra dịch niệu
Bất hoạt virus Newcastle
(6) Bất hoạt bằng formalin
(7) Kiểm tra sau bất hoạt
Bất hoạt virus IB
(6) Bất hoạt bằng formalin
(7) Kiểm tra sau bất hoạt
Phối trộn BTP (8) Phối trộn, gây nhũ (9)Chia liều vắc xin ra các lọ Hoàn thiện sản phẩm (10) Dán nhãn, đóng gói và nhập kho Giai đoạn 1 Giai đoạn 2 Giai đoạn 3 Giai đoạn 4
4.3.3.2. Kết quả sản xuất vắc xin vô hoạt ND-IB quy mô phòng thí nghiệm
Trong sản xuất vắc xin vô hoạt, việc lựa chọn chất bổ trợ phù hợp đem lại hiệu quả sử dụng trên động vật mang ý nghĩa quan trọng. Chúng tôi sử dụng chất bổ trợ nhũ dầu Montanide ISA 71RVG do công ty Seppic cung cấp, tỷ lệ 60:40, quy mô sản xuất từ 2000-3000 liều.
Kết quả được trình bày qua bảng 4.25.
Bảng 4.25. Kết quả sản xuất vắc xin vô hoạt ND-IB quy mô phòng thí nghiệm
Lô VX Ngày SX Chất bổ trợ Số lượng Số liều
1 02/01/2020 Dầu Montanide 1000ml 2000
2 10/01/2020 Dầu Montanide 1500ml 3000
3 05/02/2020 Dầu Montanide 1500ml 3000