Nguyên tắc:
Glucid khử Cu(OH)2 ở môi trường kiềm mạnh, cho kết tủa d ưới dạng tinh thể Cu2O màu đỏ gạch. Số lượng Cu2O tương ứng với số lượngGlucid khử oxy.
RCHO + 2Cu(OH)2 = RCOOH + Cu2O + 2H2O.
Cu2O có tính khử, nó khử muối Fe3+ thành muối Fe2+ở môi trườngacid. Cu2O + Fe2(SO4)3 + H2SO4 = 2CuSO4 + 2FeSO4 + H2O
Sau đó dùng KMnO4 0,1N để chuẩn độ FeSO4 ở môi trườngacid.
10 FeSO4 + 8 H2SO4 + 2 KMnO4 = K2SO4 + 2MnSO4 + 5Fe2(SO4)3 + 8H2O Từ số ml KMnO4 0,1N dùng để chuẩn độ FeSO4hình thành, tra bảng để suy ra hàm lượng đường glucose, maltoza, lactoza hay saccharo se trong mẫu (mg) nhân với hệ số pha loãng ta có hàm lượng đường trong 100g thực phẩm.
Tiến hành:
Chuẩn bị dung dịch thử:
Đong một lượng V(ml) chất thử nếu là mẫu chất lỏng hay cân một l ượng P(g) chất thử nếu là rắn, rồi nghiền nhỏ, rồi cho 250ml n ước cất trung tính vào khuấy để hòa tan đường vào trong nước. lượng chất thử thích hợp sao cho phần lọc để chuẩn độ cố nồng độ đường 4 ÷ 10%.
Trung hòa acid hữu cơ có trong chất thử bằng NaOH 0,1N đến khi pH = 7.
Cho bình định mức vào nồi đun cách thủy ở nhiệt độ 800C trong 15 phút, thỉnh thoảng lắc đều khi đun nóng để hòa tan hết đường. Sau đó đem là nguội nhanh và đem khử tạp chất bằng Pb(CH3COO)2 thừa, thêm nước cho đủ V1 ml. Để lắng lọc lấy dung dịch, bỏ kết tủa.
Do trong mẫu có đườngsaccharose nên ta thủy phân bằng cách lấy V2 ml dung dịch trên vào bình định mức 100 ml. cho 5ml HCl đậm đặc, đun cách thủy ở 70 0C trong 5 phút để thủy phân, sau đó làm nguội, trung hòa bằng NaOH 10% cho đến khi pH =7. Thêm nước cất cho đủ V3 ml ta được dung dịch thử chứa hỗn hợp các loại đường.Định lượng đường khử:
Cho vào bình tam giác dung tích 250ml: Dung dịchFehling A: 10ml
Dung dịchFehling B:10ml
Đun sôi bình tam giác. Sau đó cho vào A(ml) dung d ịch thử và 20ml nước cất. Dun nhanh để sau 3 phút thì dung dịch phải sôi trở lại, duy trì nhiệt độ sôi 2 phút để xuất hiện két tủa đỏ gạch d ưới đáy bình. Lấy bình ra để nghiêng cho cặn Cu2O lắng xuống. Chú ý dung dịch bên trên lớp cặn chỉ có màu xanh của Cu(OH)2. Nếu dung dịch bên trên có màu lục, màu vàng, hay màu nâu thì phải làm lại và lấy một lượng dung dịch lọc ít hơn.
Gạn rửa nhiều lần bằng n ước cất đã đun sôi cho đến khi dung dịch hết màu xanh. Lần cuối cùng gạn nhanh hết nước rồi nhanh chóng cho vào kết tủa 20ml dung dịch Bertrand. Đem đun bình tam giác đến 800C rồi chuẩn độ bằng KMnO4 0,1N tiêu tốn, tra bảng Bertrand để tìmđược số mg đường khử có trong A ml dung dịch thử.
Tính kết quả:
Đối với mẫu rắn: % đường khử có trong mẫu:
đ k . .100 % .1000 G F X P
Đối với mẫu lỏng: số gam đ ường khử có trong 1 lít mẫu:
đ k . ( / ) G F X g l V
Trong đó: G: số mg đường khử tương ứng với số ml KMnO4 0,1N tiêu tốn V: thể tích mẫu thử ban đầu ( mẫu lỏng)
P : khối lượng mẫu thử ban đầu ( mẫu tắn) F : hệ số pha loãng tộng cộng
Saccharose là đường disaccharide, trong môi trường acid nó bị thủy phân tạo đường khử theo phương pháp Bertrand. Xác định lượng đường khủ thủy phân từ saccharose để xác định để xác định l ượng saccharose.