5. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài
1.2.3. Tổng quan về phƣơng pháp đối kháng bệnh [9]
- Đối với các chủng vi khuẩn:
Dịch lắc của vi khuẩn kiểm định đƣợc cấy trải trên các đĩa môi trƣờng LB - thạch với thể tích 100 L. Các lỗ đƣợc đục với đƣờng kính 6mm trên các đĩa thạch.
Dịch lọc của từng chủng vi sinh vật thử nghiệm đƣợc cho vào các lỗ thạch với thể tích 30 L. Các đĩa thạch đƣợc ủ qua đêm ở 370C. Quan sát và chụp ảnh trên các đĩa thạch.
Khả năng kháng khuẩn của các chủng vi sinh vật thử nghiệm đƣợc xác định dựa vào đƣờng kính vòng kháng khuẩn ( D) xuất hiện xung quanh lỗ thạch.
D = D – d
D: đƣờng kính vòng vô khuẩn (mm) d: đƣờng kính lỗ thạch (mm).
- Đối với nấm bệnh Fusarium:
Khả năng đối kháng của nấm mốc với nấm Fusarium sp. đƣợc đánh giá theo phƣơng pháp của Seiketov (1982), Bradshaw-Smith và cộng sự (1991)].
+ Môi trường thí nghiệm: PDA
+ Phương pháp tiến hành: Cấy đối xứng hai bên
+ Chỉ tiêu theo dõi: Đường kính ức chế của tản nấm thử nghiệm đối với
Fusarium sp. sau 5 ngày
Kẻ một đƣờng ở giữa đĩa petri (phần đáy). Cấy nấm cần xác định đối kháng và nấm Fusarium sp. trên 2 điểm đối xứng nhau trên đƣờng vừa kẻ. Ủ ở nhiệt độ phòng và theo dõi
Hiệu quả kháng nấm bệnh của nấm mốc đƣợc tính theo công thức sau: Nấm bệnh Fusarium sp. Chất đối kháng
( Dc là đƣờng kính tản nấm bệnh ở mẫu đối chứng, Dk là đƣờng kính tản nấm bệnh ở mẫu đối kháng)
Mức độ đối kháng của nấm mốc với nấm gây bệnh đƣợc phân thành 4 cấp nhƣ sau:
+ Hiệu lực đối kháng cao (+++): Hiệu quả đối kháng ≥60%.
+ Hiệu lực đối kháng trung bình (++): Hiệu quả đối kháng ≥40-59%. + Hiệu lực đối kháng yếu (+): Hiệu quả đối kháng ≤40-20%.
CHƢƠNG 2
NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU