5. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài
3.4. KẾT QUẢ THĂM DÕ HOẠT TÍNH SINH HỌC
Kết quả trên các mẫu thử vi khuẩn
Kết quả thử hoạt tính sinh học đƣợc trình bày ở các hình sau.
Trên mẫu 1 ( Salmonella)
Kết quả thử hoạt tính sinh học trên chủng vi khuẩn Salmonella bằng phƣơng pháp đục lỗ thạch đƣợc thực hiện ở phòng vi sinh, khoa Sinh học, Đại học Sƣ Phạm Đà Nẵng đƣợc thể hiện ở hình 3.29.
Trên mẫu 2 (E.Coli)
Kết quả thử hoạt tính sinh học trên chủng vi khuẩn E. Coli bằng phƣơng pháp đục lỗ thạch đƣợc thực hiện ở phòng vi sinh, khoa Sinh học,Đại học Sƣ Phạm Đà Nẵng đƣợc thể hiện ở hình 3.34.
Hình 3.32. Kết quả thử hoạt tính sinh học của chất NEW 1
Hình 3.34. Kết quả thử hoạt tính sinh học của chất NEW 1
1 1 1 2 2 1 1 2 2
Trên mẫu 3 (Psedonala)
Kết quả thử hoạt tính sinh học trên chủng vi khuẩn Psedonala bằng phƣơng pháp đục lỗ thạch đƣợc thực hiện ở phòng vi sinh, khoa Sinh học,Đại học Sƣ Phạm Đà Nẵng đƣợc thể hiện ở hình 3.33.
Trên mẫu 4 (Streptococcus)
Kết quả thử hoạt tính sinh học trên chủng vi khuẩn Streptococcus bằng phƣơng pháp đục lỗ thạch đƣợc thực hiện ở phòng vi sinh, khoa Sinh học,Đại học Sƣ Phạm Đà Nẵng đƣợc thể hiện ở hình 3.35.
Hình 3.33. Kết quả thử hoạt tính sinh học của chất NEW 1
Hình 3.35. Kết quả thử hoạt tính sinh học của chất NEW 1
1 1 1 1 2 2 2 2 1
Thí nghiệm đƣợc lặp lại 3 lần để đảm bảo tính chính xác của thí nghiệm và dữ liệu. Kết quả thu đƣợc nhƣ sau:
Mẫu 1 ( Salmonella) Mẫu 2 (E.Coli) Mẫu 3 (Psedonala) Mẫu 4 (Streptococcus) Dịch 1 +++ +-- +-- ++- Dịch 2 +++ --- --- --- Chú thích: +++: Kháng khuẩn mạnh +--: Kháng khuẩn yếu ---: không kháng khuẩn
- Dịch 1: 1g bột rễ cây ruốc cá trong 10 mL nƣớc. - Dich 2: 10 mL dung dịch chất NEW 1
Kết luận:
- Ở bột rễ cây ruốc cá có khả năng kháng khuẩn cả 4 vi khuẩn gây hại nhƣng vì nồng độ còn chƣa đủ lớn do đó vòng kháng khuẩn yếu.
- Ở chất Methyl Commate A phân lập đƣợc chỉ có hoạt tính kháng khuẩn đối với chủng Salmonella gây bệnh thƣơng hàn ở ngƣời. Còn những vi khuẩn còn lại không xuất hiện vòng kháng khuẩn.
-Vậy chất phân lập đƣợc có hoạt tính sinh học mạnh trên vi khuẩn gây bệnh đƣờng ruột Salmonella.
- Dịch của bột rễ cây ruốc cá trong nƣớc có hoạt tính trong cả 4 vi khuẩn, nhƣng mạnh nhất trong Salmonella.
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
1. Kết luận thành phần hoá học
- Từ dịch chiết của 4 dung môi n-hexan, ethyl acetat, methanol, chloroform của bột rễ cây ruốc cá, bằng các phƣơng pháp chiết soxhlet chúng tôi đã xác định đƣợc thành phần của một số hợp chất có trong đó.
- Từ dịch chiết Chlorofom của bột rễ cây ruốc cá, bằng các phƣơng pháp sắc kí cột silicagel kết hợp với sắc kí lớp mỏng chúng tôi đã tách và xác định đƣợc cấu trúc của 1 hợp chất.
- Chất NEW 1: Methyl Commate A. Chất này đƣợc phân lập trƣớc đây từ loài Commiphora (chi Một dƣợc) ở Châu Phi và đƣợc xác định có hoạt tính kháng khuẩn chống lại vi khuẩn gram dƣơng (Bacillus subtilis), chống lại bệnh nấm.
Hoạt tính sinh học
- Từ kết quả thăm dò hoạt tính sinh học cho thấy hoạt chất NEW 1 có hoạt tính mạnh với Salmonella (Vi khuẩn gây bệnh thƣơng hàn).
2. Kiến nghị
Tiếp tục phân lập các phân đoạn còn lại của dịch chiết EtOAc, n-hexane và MeOH kết hợp với các phƣơng pháp phổ để xác định thành phần hoá học. Đồng thời thử hoạt tính sinh học của các chất tách đƣợc để có cái nhìn tổng thể về hoá thực vật cũng nhƣ hoạt tính sinh học của chi ruốc cá, góp phần làm tăng giá trị sử dụng của loài cây này trong y học và đời sống.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
TIẾNG VIỆT
[1] Đái Duy Ban (2008), Các hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học phòng chống một số bệnh cho người và vật nuôi, NXB Khoa học tự nhiên & công nghệ, Hà Nội.
[2] Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chƣơng và các tác giả (2004), “Cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam”, NXB Khoa học và Kỹ thuật.
[3] Võ Văn Chi (1996), Từ điển cây thuốc Việt Nam, NXB Y học, Hà Nội, Việt Nam.
[4] Trịnh Đình Chính, Nguyễn Thị Bích Tuyết (2003), Giáo trình hợp chất tự nhiên, Huế.
[5] Phạm Hoàng Hộ (2000), “Cây Cỏ Việt Nam”, Nhà xuất bản Trẻ [6] Nguyễn Thị Thu Lan (2007), Hoá học các hợp chất thiên nhiên, Huế.
[7] Nguyễn Kim Phi Phụng (2007), Các phương pháp cô lập hợp chất tự nhiên, NXB ĐHQG Tp. HCM.
[8] Nguyễn Đình Triệu (2007), Các phương pháp phổ trong hóa học hữu cơ và hóa sinh, NXB Đại học quốc gia Hà Nội.
TIẾNG ANH
[9] Alírica I. Suárez, Beth Diaz M., Franco Delle Monache, Reinaldo S. Compagnone (2003), “Biflavonoids from Podocalyx loranthoides”, Fitoterapia 74, 473–475.
[10] Bagla, Victor P; McGaw, Lyndy J; Elgorashi, Esam E; Eloff, Jacobus N (2014), “Antimicrobial activity, toxicity and selectivity index of two biflavonoids and a flavone isolated from Podocarpus henkelii (Podocarpaceae) leaves”, BMC Complementary and Alternative Medicine 14(1), 383-389.
[11] Bai-Ping Ying, Isao Kubo (1993), “Norditerpene dilactones from podocarpus nagi”, Phytochemistry 34(4), 1107- 1110.
[12] Bai-Ping Ying, Isao Kubo, Chairul Takeshi Matsumoto, Yuji Hayashi (1990), “Congeners of norditerpene dilactones from podocarpus nagi”,
Phytochemistry 29(12), 3953-3955.
[13] Carlos Alberto Carbonezi, Lidilhone Hamerski, A. A. Leslie Gunatilaka, Alberto Cavalheiro, Ian Castro-Gamboa, Dulce Helena Siqueira Silva, Maysa Furlan, Maria Claudia Marx Young, Marcia Nasser Lopes, Vanderlan da Silva Bolzani (2007), “Bioactive flavone dimers from Ouratea multiflora (Ochnaceae)”, Brazilian Journal of Pharmacognosy, 17(3), 319-324.
[14] Chang-Ming Sun, Wan-Jr Syu, Yi-Tsau Huang, Chien-Chih Chen and Jun- Chih Ou (1997), “Selective Cytotoxicity of Ginkgetin from c Selaginella moellendorffii”, J. Nat. Prod 60, 382-384.
[15] Cheng, K.T., Hsu, F.L., Chen, S.H., Hsieh, P.K., Huang, H.S., Lee, C.K., Lee, M.H. (2007), “New constituent from Podocarpus macrophyllus var. macrophyllus shows antityrosinase effect and regulates tyrosinase-related proteins and mRNA in human epidermal melanocytes”, Chemical and Pharmaceutical Bulletin 55, 757–761.
[16] D. A. Scudiero, R. H. Shoemaker, K. D. Paull, A. Monks, S. Tierney, T. H. Nofziger, M. J. Currens, D. Seniff, M. R. Boyd (1988), “Evaluation of a soluble Tetrazolium/Formazan assay for cell growth and drug sensivity in culture using human and other tumor cell lines” Cancer Research 48, 4827-4833.