3. Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài
2.2.1. Thực trạng chăn nuôi lợn của tỉnh Cao Bằng giai đoạn 2016 2020
2.2.2. Kết quả xét nghiệm mẫu bệnh phẩm của lợn nghi mắc bệnh Dịch tả châu Phi
2.2.3. Diễn biến của bệnh Dịch tả lợn châu Phi tại các địa phương của tỉnh Cao Bằng Cao Bằng
2.2.4. Tình hình lợn tiêu hủy do Dịch tả lợn châu Phi tại các địa phương của tỉnh Cao Bằng của tỉnh Cao Bằng
2.2.5. Tình hình mắc bệnh Dịch tả lợn châu Phi theo mùa tại tỉnh Cao Bằng
2.2.6. Tình hình mắc bệnh Dịch tả lợn châu Phi tại các địa phương của tỉnh Cao Bằng theo phương thức chăn nuôi tỉnh Cao Bằng theo phương thức chăn nuôi
2.2.7. Nghiên cứu tình hình mắc bệnh Dịch tả lợn châu Phi tại các địa phương của tỉnh Cao Bằng theo loại lợn phương của tỉnh Cao Bằng theo loại lợn
2.2.8. Xây dựng bản đồ dịch tễ lợn mắc bệnh Dịch tả lợn châu Phi tại tỉnh Cao Bằng tỉnh Cao Bằng
2.2.9. Một số đặc điểm bệnh lý của bệnh Dịch tả lợn châu Phi tại tỉnh Cao Bằng Cao Bằng
- Triệu chứng lâm sàng lợn mắc bệnh Dịch tả lợn châu Phi - Bệnh tích: đại thể của lợn mắc bệnh Dịch tả lợn châu Phi
2.2.10. Công tác phòng chống Dịch tả lợn châu Phi tại tỉnh Cao Bằng
- Công tác phòng chống dịch bệnh chung của tỉnh Cao Bằng - Thiệt hại kinh tế do dịch bệnh gây ra
2.2.11. Đề xuất biện pháp phòng chống bệnh Dịch tả lợn châu Phi tại tỉnh Cao Bằng tỉnh Cao Bằng
2.3. Phương pháp nghiên cứu
2.3.1. Phương pháp áp dụng để nghiên cứu đặc điểm dịch tễ và vẽ biểu đồ
- Phương pháp điều tra dịch tễ học hồi cứu, dựa vào số liệu của Cục thống kê, Chi cục Trồng trọt và Chăn nuôi tỉnh Cao Bằng:
+ Báo cáo tình hình chăn nuôi trên địa bàn tỉnh Cao Bằng
+ Báo cáo nhanh theo ngày, theo tháng, quý, báo cáo năm về tình hình Dịch tả lợn Châu Phi tại Cao Bằng
+ Điều tra nghiên cứu trực tiếp thông qua phiếu điều tra tại các huyện trong tỉnh Cao Bằng (mẫu phiếu điều tra theo Phụ lục 1)
- Tập hợp xử lý số liệu để xây dựng bản đồ dịch tễ
2.3.2. Phương pháp xét nghiệm mẫu
Để xác định virus DTLCP: dùng huyết thanh và mẫu bệnh phẩm (hạch lâm ba, phủ tạng như lách, thận...) của lợn nghi mắc bệnh DTLCP
2.3.2.1. Phương pháp lấy mẫu
* Phương pháp lấy mẫu huyết thanh:
- Trước khi lấy máu con vật, sát trùng vị trí lấy máu bằng cồn 70o. Dùng bơm tiêm đã được tráng chất chống đông EDTA 0,5% hoặc Heparin hút 3 ml máu từ tĩnh mạch cổ lợn đang ốm, sốt, sau đó hút pittong ra đến 5 ml, bẻ gập đầu kim và đậy nắp kim lại, đặt nằm nghiêng 45o và để yên 1 giờ đến 2 giờ ở nhiệt độ bình thường cho máu đông.
Ly tâm lạnh ống huyết thanh, tốc độ 6.000 vòng/10 phút, chắt huyết thanh sang ống eppendorf và ghi ký hiệu mẫu lên ống. Huyết thanh đạt yêu cầu phải trong, màu hơi vàng và không có hồng cầu vỡ.
- Mẫu được bảo quản ở nhiệt độ 4oC.
* Phương pháp lấy mẫu bệnh phẩm:
- Thu thập mẫu bệnh phẩm ở những con lợn chết theo hướng dẫn của Cục Thú y tại công văn số 687/TY-DT ngày 19/4/2019 và tuân thủ các quy tắc an toàn sinh học theo hướng dẫn của OIE để tiến hành xét nghiệm virus.
- Loại mẫu bệnh phẩm là các hạch lâm ba (lympho) bẹn, hạch dưới hàm hoặc phủ tạng như lách, thận.
- Mẫu được bảo quản trong túi nilon hoặc lọ đựng bệnh phẩm vô trùng, tất cả được đặt trong thùng bảo ôn và vận chuyển trong điều kiện lạnh từ 20C đến 80C. Mẫu bệnh phẩm gửi đến phòng thí nghiệm trong vòng 24 giờ sau khi lấy, kèm theo phiếu gửi bệnh phẩm, nếu quá thời gian đó, bệnh phẩm phải được bảo quản ở nhiệt độ đông băng. Huyết thanh bảo quản ở nhiệt độ từ 40C đến 80C tối đa trong 7 ngày. Lưu mẫu bệnh phẩm ở nhiệt độ -200C đến -800C
2.3.2.2. Phương pháp xét nghiệm
Để phát hiện bệnh DTLCP chủ yếu dùng phương pháp realtime PCR để phát hiện virus DTLCP (King và cs., 2003).
Các bước thực hiện được trình bày theo TCVN 8400-41:2019 Bệnh động vật - Quy trình chẩn đoán - Phần 41: Bệnh dịch tả lợn Châu Phi. Đoạn mồi và
mẫu dò được thiết kế dựa trên vùng ổn định của gen P72 (bảng 1, phụ lục 2) và được sử dụng với nồng độ thích hợp, như sau:
+ Mồi sử dụng ở nồng độ 20 µM + Đoạn dò sử dụng ở nồng độ 5 µM - Tiến hành phản ứng realtime PCR
+ Sử dụng cặp mồi đã chuẩn bị trên và bộ kít thương mại, pha hỗn hợp phản ứng (Master mix) và cài đặt chu trình nhiệt theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Có thể áp dụng kít Master mix Platinum® Quantitative PCR SuperMix – UDG, Cat. No.: 11730-017 của hãng Invitrogen (nếu áp dụng kít khác có thể thay đổi công thức master mix).
+ Lượng hỗn hợp nhân gen dùng cho 1 phản ứng được nêu trong bảng 2, phụ lục 2.
+ Sau khi chuẩn bị xong nguyên liệu Master mix tiến hành: + Cho 20 µl hỗn hợp Master mix vào ống PCR 0,2 ml.
+ Cho 5 µl DNA dương chuẩn của vi rút ASF có giá trị Ct đã biết trước vào ống PCR đối chứng dương
+ Cho 5 µl nước tinh khiết, không có nuclease vào ống PCR đối chứng âm + Cho 5 µl DNA của mẫu vừa tách chiết vào ống PCR
+ Đặt ống PCR vào máy realtime PCR
* Lưu ý: Phản ứng realtime PCR phải bao gồm: mẫu kiểm tra, mẫu đối chứng dương và mẫu đối chứng âm.
+ Chu trình nhiệt chạy phản ứng theo kít Platinum® Quantitative PCR SuperMix – UDG, Cat. No.: 11730-017 nêu trong bảng 3, phụ lục 2.
* Chú thích: Mẫu và nguyên liệu cho phản ứng realtime PCR cần đặt trong khay đá lạnh trong suốt quá trình chuẩn bị hỗn hợp phản ứng.
- Đọc kết quả
+ Kết quả của phản ứng real-time PCR được xác định dựa vào chu kỳ ngưỡng (Cycle threshold: Ct).
+ Phản ứng được công nhận khi: mẫu đối chứng dương tính (được chuẩn độ trước) phải có giá trị Ct tương đương giá trị Ct đã biết (± 2 Ct), mẫu đối chứng âm không có Ct.
+ Với điều kiện phản ứng:
Mẫu dương tính khi giá trị Ct < 40
Mẫu âm tính khi không có giá trị Ct
Mẫu nghi ngờ khi giá trị 40 ≤ Ct ≤ 45.
- Đánh giá kết quả: Mẫu có virus gây bệnh dịch tả lợn châu Phi khi kết quả real-time PCR dương tính. Với những mẫu nghi ngờ cần được thực hiện lại xét nghiệm hoặc sử dụng phương pháp xét nghiệm khác đ ể khẳng định kết quả.
* Quy định về loại lợn: Lợn nái, lợn thịt và lợn con - Mùa vụ: nghiên cứu ở 4 mùa vụ trong năm.
+ Mùa xuân: từ tháng 2 đến tháng 4 + Mùa hè: từ tháng 5 đến tháng 7 + Mùa thu: từ tháng 8 đến tháng 10
+ Mùa đông: từ tháng 11 đến tháng 01 năm sau
- Phương thức chăn nuôi: nghiên cứu ở 3 phương thức chăn nuôi lợn. + Phương thức truyền thống (nuôi chuồng hở, nuôi thả, tận dụng thức ăn thừa): hộ gia đình chăn nuôi với số lượng ít (chăn nuôi nhỏ lẻ).
+ Phương thức công nghiệp chuồng kín: chăn nuôi với số lượng lớn (chăn nuôi trang trại), điều kiện vệ sinh thú y tốt.
+ Phương thức công nghiệp chuồng hở: chăn nuôi với số lượng lớn (chăn nuôi trang trại), điều kiện vệ sinh thú y tốt.
2.3.3. Phương pháp nghiên cứu đặc điểm bệnh lý của bệnh
- Kiểm tra biểu hiện lâm sàng: Chúng tôi sử dụng phương pháp chẩn đoán cơ bản là quan sát những biểu hiện của lợn như: đo nhiệt độ, biểu hiện một số vùng da dưới ngực và bụng có màu khác thường, di chuyển không vững, tiêu chảy ...
- Phương pháp xét nghiệm máu để xác định một số chỉ số huyết học của lợn bị bệnh DTCP và lợn khỏe: Số lượng hồng cầu, bạch cầu, hàm lượng huyết sắc tố và công thức bạch cầu của lợn bệnh và lợn khỏe được xác định bằng máy PCE 210 và XP 100 tại Trung tâm kiểm soát bệnh tật (CDC) tỉnh Cao Bằng.
- Phương pháp xác định bệnh tích đại thể
+ Phương pháp xác định bệnh tích đại thể: Mổ khám lợn bị bệnh DTLCP (có biểu hiện lâm sàng của bệnh DTLCP), quan sát bằng mắt thường bệnh tích tại các cơ quan nội tạng có biểu hiện đặc trưng như: lá lách, ruột, tim, hạch..., chụp ảnh những vùng có bệnh tích điển hình.
2.3.4. Đề xuất biện pháp phòng chống bệnh DTLCP tại tỉnh Cao Bằng
- Dựa vào tình hình thực tế tại tỉnh Cao Bằng;
- Dựa vào kinh nghiệm của các nước và khuyến cáo của các tổ chức quốc tế
- Dựa vào văn bản chỉ đạo, điều hành của chính phủ, Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn
2.4. Phương pháp xây dựng bản đồ dịch tễ
- Cơ sở toán học bản đồ dịch tễ: Tỉ lệ: 1: 100.000
Ellipsoid: WGS 84
Lưới chiếu: UTM Múi chiếu: 60 Kinh tuyến trục: 107045' Hệ số ko: 0,9999
Hệ tọa độ: Quốc gia VN 2000 Hệ độ cao: Quốc gia Việt Nam
- Bản đồ nền: Bản đồ địa giới hành chính tỉnh Cao Bằng tỷ lệ 1:100.000, Bản đồ hiện trạng sử dụng đất tỉnh Cao Bằng năm 2020, tỷ lệ 1:100.000.
- Khoanh vùng nội nghiệp các khu vực dự kiến lấy mẫu xét nghiệm trên cơ sở các loại tài liệu đã thu thập như: Bản đồ địa giới hành chính tỉnh Cao Bằng tỷ lệ 1:100.000, Bản đồ hiện trạng sử dụng đất tỉnh Cao Bằng năm 2020, tỷ lệ 1:100.000.
- Điều tra ngoại nghiệp: Sử dụng máy GPS xác định vị trí cần lấy mẫu xét nghiệm, ký hiệu điểm lấy mẫu, tọa độ lấy mẫu.
- Biên tập nội nghiệp:
+ Biên tập bản đồ dịch tễ và xuất bảng biểu tổng hợp. Thu thập các loại bản đồ nền bao gồm: Bản đồ địa giới hành chính tỉnh Cao Bằng tỷ lệ 1:100.000, bản đồ hiện trạng sử dụng đất tỉnh Cao Bằng năm 2020, tỷ lệ 1:100.000. Tất cả bản đồ nền thu thập đều định dạng file .*dgn được chuyển sang môi trường làm việc của Mapinfor V17 *Tab sử dụng phần mềm FME 2013.
+ Biên tập bản đồ trên phần mềm Mapinfor V17. Xây dựng lớp thông tin chuyên đề dịch tễ bao gồm các trường thông tin như vị trí lấy mẫu, kết quả xét nghiệm mẫu...
+ Hoàn thiện, in bản đồ.
2.5. Phương pháp xử lý số liệu
Số liệu thu thập được được xử lý theo phương pháp thống kê sinh học (Trương Hữu Dũng, 2018), trên phần mềm Minitab 16, Microsoft Excel 2010.
Chương 3
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3.1. Thực trạng chăn nuôi lợn của tỉnh Cao Bằng giai đoạn 2016 - 2020
Để thấy được thực trạng chăn nuôi lợn tại tỉnh Cao Bằng, trong thời gian nghiên cứu, chúng tôi đã tiến hành thu thập dữ liệu về tình hình chăn nuôi lợn từ Cục Thống kê, Chi cục Trồng trọt và Chăn nuôi tỉnh Cao Bằng giai đoạn 2016 - 2020. Kết quả được trình bày cụ thể tại bảng 3.1.
Bảng 3.1. Thực trạng chăn nuôi lợn của tỉnh Cao Bằng giai đoạn 2016 - 2020
Năm Tổng đàn vật nuôi (con) Tổng đàn lợn (con) Tốc độ tăng trưởng (%) 2016 641.138 343.736 100,00 2017 643.469 350.631 102,01 2018 625.453 360.607 104,91 2019 3.366.050 270.772 78,77 2020 3.576.403 273.891 79,68
(Nguồn: Chi cục Trồng trọt và Chăn nuôi tỉnh Cao Bằng)
Qua bảng 3.1 cho thấy: coi tổng đàn lợn năm 2016 là 100%, trong 3 năm 2016 đến 2018 số lượng đàn lợn của tỉnh Cao Bằng có sự tăng nhẹ (năm 2016 tổng đàn lợn là 343.736 con, đến năm 2017 là 350.631 con và năm 2018 tăng thành 360.607 con). Đến năm 2019, tổng đàn lợn giảm gần 100.000 con, chỉ còn lại 270.772 con. Sự giảm này là do: năm 2019, trên địa bàn tỉnh Cao Bằng đã xảy ra dịch bệnh Dịch tả lợn châu Phi xảy ra, dịch đã lây lan nhanh chóng trên toàn tỉnh Cao Bằng, với tổng số lợn buộc phải tiêu hủy trong năm 2019 lên đến 75.993 con/9.874 ổ dịch/160 xã, phường/10 huyện, thành phố.
Sang năm 2020, trên địa bàn tỉnh số lợn mắc DTLCP có chiều hướng giảm dần, số lợn mắc bệnh rải rác ở một số huyện trên địa bàn tỉnh. Đã có
157/160 xã, phường, thị trấn qua 30 ngày không có ca bệnh phát sinh; trong đó có 144 xã, phường, thị trấn công bố hết dịch. Sở Nông nghiệp và PTNT đã chỉ đạo các đơn vị có liên quan tăng cường công tác theo dõi; giám sát dịch bệnh tại những nơi có ổ dịch cũ và nơi có nguy cơ lây nhiễm cao nhằm phát hiện sớm, ngăn chặn không để dịch lây lan ra diện rộng. Đồng thời, xây dựng văn bản hướng dẫn tái đàn đến cho địa phương nhằm từng bước khôi phục đàn lợn nuôi trên địa bàn tỉnh Cao Bằng.
Theo thống kê, năm 2020, tổng đàn lợn của cả tỉnh là 273.891 con (tăng 3.119 con so với năm 2019. Điều này chứng minh rằng việc tái đàn trên địa bàn tỉnh Cao Bằng đạt kết quả bước đầu.
Kết quả về thực trạng chăn nuôi lợn của tỉnh Cao Bằng giai đoạn 2016- 2020 được thể hiện rõ hơn qua biểu đồ hình 3.1.
Tổng đàn lợn (con) 273,891 270,772 360,607 350,631 343,736 0 50 100 150 200 250 300 350 400 2016 2017 2018 2019 2020
Hình 3.1. Biểu đồ về thực trạng chăn nuôi lợn của tỉnh Cao Bằng giai đoạn 2016 – 2020
3.2. Kết quả xét nghiệm mẫu bệnh phẩm của lợn nghi mắc bệnh Dịch tả Châu Phi Châu Phi
Để xác định được lợn mắc bệnh Dịch tả lợn châu Phi tại tỉnh Cao Bằng, trong thời gian nghiên cứu, chúng tôi đã tiến hành lấy mẫu bệnh phẩm lợn nghi mắc bệnh theo hướng dẫn của Cục Thú y.
Kết quả xét nghiệm mẫu được trình bày qua bảng 3.2.
Bảng 3.2. Kết quả xét nghiệm mẫu bệnh phẩm lợn nghi mắc bệnh Dịch tả lợn châu Phi tại Cao Bằng năm 2020 – tháng 6/2021
TT Địa phương (huyện/thành phố) Số mẫu xét nghiệm (mẫu) Số mẫu dương tính (mẫu) Tỷ lệ dương tính (%) 1 Bảo Lâm 47 41 87,23 2 Bảo Lạc 53 43 81,13 3 Nguyên Bình 40 38 95,00 4 Hạ Lang 50 36 72,00 5 Hà Quảng 59 35 59,32 6 Quảng Hòa 74 59 79,72 7 Thạch An 44 38 86,36 8 Hòa An 47 34 72,34 9 Trùng Khánh 82 52 30,48 10 Thành Phố Cao Bằng 59 35 59,32 Tổng số 555 411 74,05
(Nguồn: Chi cục Trồng trọt và Chăn nuôi tỉnh Cao Bằng)
Kết quả bảng 3.2 cho thấy: trong quá trình nghiên cứu, chúng tôi đã tiến hành lấy 555 mẫu bệnh phẩm ở các ổ dịch tại 10 huyện, thành phố của tỉnh Cao Bằng gửi đi xét nghiệm tại Trung tâm Chẩn đoán Thú y trung ương; Chi cục Thú y vùng II, kết quả trong 555 mẫu có 411 mẫu dương tính với Dịch tả lợn Châu Phi, chiếm 74,05%. Tỷ lệ dương tính biến động giữa các địa phương là 30,48% (huyện Trùng Khánh) đến 95% (huyện Nguyên Bình). Tình hình mắc bệnh dịch tả lợn châu Phi tại tỉnh Cao Bằng được thể hiện rõ hơn qua hình 3.2.
87,23 81,13 95,00 72,00 59,32 79,72 86,36 72,34 30,48 59,32 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
Bảo Lâm Bảo Lạc Nguyên Bình Hạ Lang Hà Quảng Quảng Hòa Thạch An Hòa An Trùng Khánh TP Cao Bằng Tỷ lệ dương tính (%) (Địa phương)
Hình 3.2. Kết quả xét nghiệm mẫu bệnh phẩm lợn nghi mắc bệnh Dịch tả lợn châu Phi tại Cao Bằng
Căn cứ vào kết quả xét nghiệm trên, tỉnh Cao Bằng đã đã ban hành trên 30 văn bản liên quan đề xuất các phương án phòng chống dịch bệnh tại các địa phương, trong đó, có các văn bản hướng dẫn trực tiếp công tác phòng chống và hỗ trợ khắc phục cho người chăn nuôi lợn sau dịch bệnh đến phòng chống dịch bệnh tại tỉnh. Nhờ sự chỉ đạo sát sao của các sở ban ngành liên quan, người chăn nuôi lợn tại tỉnh Cao Bằng đã nhận được sự hỗ trợ kịp thời và từng bước vượt qua khó khăn, tiếp tục tái đàn và thực hiện các biện pháp phòng chống dịch bệnh hiệu quả hơn.
3.3. Diễn biến của bệnh Dịch tả lợn châu Phi tại các địa phương của tỉnh Cao Bằng
Để thấy rõ hơn diễn biến tình hình dịch tả lợn châu Phi tại các địa phương của tỉnh Cao Bằng, chúng tôi đã thu thập dữ liệu và tổng hợp kết quả