3.2.4 .Nhiệt độ tạo phức hợp
3.3. Tạo que thử trên cơ sở phức hợp nano vàng-kháng thể để phát hiện
khuẩn tụ cầu vàng
Vai trò cũng nhƣ hiệu quả của phức hợp nano vàng-gắn kháng thể trong chẩn đoán tác nhân gây bệnh đƣợc chứng minh thông qua mô hình que thử nhanh dựa trên cơ chế sắc ký miễn dịch. Quy trình chế tạo que thử đã đƣợc mô tả chi tiết
dịch để chẩn đoán nhanh vi khuẩn tụ cầu vàng. Trong đó, hạt nano vàng đóng vai trò nhƣ chất chỉ thị, nhờ hiệu ứng cộng hƣởng plasmon bề mặt, khi các hạt nano vàng co cụm và tập trung sát nhau, màu sắc sẽ có sự thay đổi. Nhƣ vậy, khi mẫu tiếp xúc với vị trí nhận mẫu, vi khuẩn (nếu có) sẽ bắt cặp với hạt vàng thông qua các kháng thể trên bề mặt hạt nano vàng, vi khuẩn này sẽ tiếp tục di chuyển đến tấm thấm mẫu theo cơ chế mao dẫn. Trên đƣờng dịch chuyển, một lần nữa chúng bị giữ lại bởi “hàng rào” kháng thể thứ nhất đặc hiệu với vi khuẩn ở vị trí kiểm tra. Nếu không đặc hiệu, chúng sẽ tiếp tục di chuyển, nhƣng vẫn bị giữ lại bởi “hàng rào” kháng thể thứ 2 đặc hiệu với kháng thể gắn trên hạt nano vàng. Tóm lại, kết quả chỉ đƣợc coi là dƣơng tính khi xuất hiện cả hai vạch màu trên que thử, và điều kiện bắt buộc một que thử hoạt động tốt là phải xuất hiện vạch ở vị trí đối chứng. Nếu không tiến tới việc chế tạo kít thử nghiệm đối với mẫu thực tế, các nhà nghiên cứu có thể kiểm chứng hoạt tính của phức hợp nano vàng – kháng thể chỉ cần thông qua vạch mầu ở vị trí kiểm chứng (C).
Hình 3.11. Quá trình tạo que thử nhanh để phát hiện tụ cầu vàng. Chuẩn bị tấm cộng hợp nano vàng – kháng thể (a); gắn tấm cộng hợp lên trên que thử có gắn
màng nitrocellulose (b); gắn miếng thấm giữ và hút mẫu (c); và đóng gói thành que thử hoàn chỉnh (d).