phân lập LB để giữ giống vi sinh vật
- Pha môi trường LB: Cân đủ lượng các hóa chất: cao nấm men (Yeast extract grannulated): 5,0 g; Peptone: 10,0 g; NaCl: 5,0 g; thạch Agar: 20,0 g. Pha các hóa chất trên vào nước cất và định mức tới 1000 mL. Môi trường thạch sau khi pha được hấp, làm lỏng trong lò vi sóng, đổ ra đĩa petri.
- Nghiền, pha loãng vi sinh vật đã phân lập được với nước cất vô trùng. - Thực hiện nuôi cấy vi khuẩn trên đĩa petri bằng que cấy đầu tròn và thực hiện theo trình tự sau:
+ Để đĩa petri chứa môi trường thạch LB lên bàn.
+ Dùng que cấy lấy vi sinh vật đã được pha loãng với nước cất vô trùng. + Tay trái hé mở nắp đĩa petri vừa đủ để cho que cấy vào.
+ Nhẹ nhàng và nhanh chóng lướt que cấy lên mặt thạch môi trường LB theo theo hình chữ chi trên toàn bộ mặt thạch.
Quá trình cấy truyền vi khuẩn lên môi trường thạch thực hiện trong box cấy vi sinh, thiết bị que cấy vô khuẩn.
Nuôi cấy ở nhiệt độ 28oC và theo dõi trong vòng từ 24 - 48h. Quá trình này được lặp đi lặp lại liên tục để giữ giống vi sinh vật.
Chương 3
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. Lập đường chuẩn xác định nồng độ phenol tại pH = 3, pH = 4
Đo diện tích peak của các dung dịch trên ở bước sóng nm theo thứ tự: dung dịch có nồng độ từ thấp đến cao trên máy HPLC. Kết quả được ghi ở bảng 3.1 và hình 3.1 với pH = 4, bảng 3.2 và hình 3.2 với pH = 3.
Bảng 3.1: Kết quả đo diện tích peak của dung dịch phenol ở các nồng độ khác nhau tại pH = 4
C (mg/L) 0 25 50 100 150 200 250 Diện tích
peak (Area) 0 312909 450334 987750 1494475 1888250 2304519
Hình 3.1: Đường chuẩn xác định nồng độ phenol tại pH = 4
Bảng 3.2: Kết quả đo diện tích peak của dung dịch phenol ở các nồng độ khác nhau tại pH = 3 C(mg/L) 0 50 75 100 150 175 200 Diện tích peak (Area) 0 450334 730534 987750 1454475 1642843 1817013 272 y = 9241.8x + 39401 R² = 0.997 0 500000 1000000 1500000 2000000 2500000 0 50 100 150 200 250 300 Ar ea C (mg/L)
Hình 3.2: Đường chuẩn xác định nồng độ phenol tại pH = 3
Với đường chuẩn xác định nồng độ phenol ta có thể phân tích được nồng độ phenol có trong nước thải Cốc hóa trước và sau khi xử lí bằng vật liệu Fe-C (pH = 4) và vật liệu Fe-Cu (pH=3) cũng như nồng độ phenol trước và sau khi xử lí qua hệ A2O-MBBR.