Chức năng của protein ESCRT trong sự hình thành Exosome được đề xuất bắt đầu từ việc nghiên cứu proteomic thấy sự hiện diện của TSG101 và ALIX trong Exosome tiết từ nhiều loại tế bào khác nhau. ALIX cũng liên quan đến tiết Exosome trong hồng cầu lưới, khi liên kết với tế bào chất của TfR, ALIX cạnh tranh gắn kết với HSC70 và thúc đẩy thụ thể transferrin (transferrin receptor (TfR)) biểu hiện lên ILVs. Vào năm 2012 Baiettietal đã chứng minh Exosome được tiết từ khối u cĩ chứa syndecan, syenin và ALIX. Sự biểu hiện quá mức của syenin gây ra việc tăng tiết Exosome phụ thuộc ALIX, bao gồm sự tăng của các marker nội bào CD63 và HSP70, trong khi giảm biểu hiện của syndecan, syenin, hoặc ALIX dẫn đến việc giảm tiết Exosome. Bằng kỹ thuật sinh học phân tử phân tích RNA, Exosome được xác đ nh là túi tiết ngoại bào đồng kích thích mang đồng thời hai protein là CD63 và MHC class II. Khi bất hoạt các gene ESCRT-0 (HGS, STAM1) hoặc gen ESCRT-1 thì TSG101 giảm tiết và các Exosome tiết ra chứa ít CD63 và MHC lớp II trong khi đĩ bất hoạt VPS4B làm tăng tiết Esoxome mà khơng thay đổi thành phần trên [20]. Mặc dù mối liên hệ giữa sự hình thành các Exosome phụ thuộc vào ESCRT và các kênh vận chuyển chưa được xác đ nh rõ ràng nhưng gợi ý rằng TSG101 và STAM1 tham gia vào quá trình vận chuyển xuyên màng trong Exosome.
Hình 1.8: Cơ chế hình thành Exosome theo con đƣờng phụ thuộc ESCRT[20]
Exosome được tiết theo nhiều con đường khác nhau. Đối với sự tiết phụ thuộc vào thể đa bào MBV, các protein liên kết với Ras trong họ RAB: RAB11, RAB35, RAB7, và RAB27 thúc đẩy sự tiết Exosome theo đường nội tiết. Đối với các Exosome nguồn gốc từ màng tế bào, yếu tố ARF6 là một thành phần quan trọng trong hình thành sự nảy chổi (bao gồm cả ALIX và
TSG101). Viết tắt: ALIX, ALG2-interacting protein X; PLP, proteolipid protein; TSG101, tumor susceptibility gene 101; Wnt, Wingless/Int-1 family of proteins