C không chuyển màu)
3.6.1 Đánh giá khả năng phòng bệnh của VKNS BGCSL1-2 và BGCR1-4 trên lát cắt khoai tây với vi khuẩn gây bệnh Ecc.
trên lát cắt khoai tây với vi khuẩn gây bệnh Ecc.
Dựa vào đặc tính phân hủy AHLs của VKNS làm giảm hoặc ức chế tính độc của vi khuẩn gây bệnh Ecc, từ đó làm giảm trọng lượng mô thối hoặc ngăn chặn hoàn toàn khả năng gây thối tùy mức độ mạnh hay yếu của chủng VKNS. Qua đó tiến hành kiểm tra đánh giá khả năng phòng bệnh của 2 chủng VKNS BGCSL1-2 và BGCR1-4 trên lắt cắt khoai tây.
Thí nghiệm được tiến hành bởi 3 cách lây nhiễm:
+ Lây nhiễm đồng thời vi khuẩn nội sinh và vi khuẩn gây bệnh (Ecc+VKNS)
+ Lây nhiễm vi khuẩn nội sinh trước 24h sau đó lây nhiễm vi khuẩn gây bệnh (VKNSEcc)
+ Lây nhiễm vi khuẩn gây bệnh trước 24h sau đó lây nhiễm vi khuẩn nội sinh (EccVKNS)
Hình 3.6: Ảnh hưởng của lây nhiễm VKNS đối với kiểm soát bệnh thối nhũn củ khoai tây (* và **: sai khác giữa công thức xử lý VKNS với đối
chứng có ý nghĩa thống kê P≤0,05 và P≤0,0001)
Hình 3.7: Lát cắt khoai tây lây nhiễm với VKNS và Ecc a. Đối chứng (-): H2O b. Đối chứng (+): Ecc+H2O c. Nhiễm VKNS trước d. Nhiễm VKNS sau
** * * * * * * a b c d
Từ kết quả thu được cho thấy: lây nhiễm VKNS làm giảm đáng kể trọng lượng mô thối củ khoai tây so với đối chứng chỉ nhiễm vi khuẩn gây bệnh Ecc. Trọng lượng mô thối trung bình dao động từ 2,1 g đến 4,1 g so với đối chứng chỉ nhiễm vi khuẩn gây bệnh Ecc (5,4 g) (Bảng 3.3).
Bảng 3.3: Khối lượng mô thối nhũn của 2 chủng VKNS BGCSL1-2 và BGCR1-4 sau khi lây nhiễm theo 3 phương pháp.
TT Ký hiệu Khối lượng trung bình mô thối nhũn (Đơn vị tính: gram) Phương pháp nhiễm trộn Phương pháp nhiễm VKNS trước Phương pháp nhiễm VKNS sau 1 Ecc + H2O 5.4 ± 0.79 5.4 ± 0.79 5.4 ± 0.79 2 BGCSL1-2 + H20 0 0 0 3 BGCR1-4 + H20 0 0 0 4 BGCSL1-2 + Ecc 3.33 ± 0.24 2.16 ± 0.26 4.13 ± 0.13 5 BGCR1-4 + Ecc 3.23 ± 0.60 2.86 ± 0.14 3.2 ± 0.25
Như vậy, trọng lượng mô thối trung bình của củ khoai tây khi lây nhiễm VKNS trước và Ecc sau đã giảm hơn 50% so với công thức đối chứng chỉ nhiễm vi khuẩn Ecc. Điều này cho thấy các chủng VKNS này phân hủy phân tử tín hiệu AHLs và qua đó làm giảm tính độc của vi khuẩn gây bệnh trên lát cắt khoai tây. Hiệu lực ức chế của chủng BGCSL1-2 có tính ổn định cao hơn chủng BGCR1-4.
Qua biểu đồ so sánh kết quả lây nhiễm VKNS và Ecc sử dụng 3 phương pháp lây nhiễm cho thấy: So sánh các công thức xử lý sử dụng cùng một phương pháp lây nhiễm cho thấy công thức xử lý VKNS cho hiệu quả ức
chỉ nhiễm vi khuẩn gây bệnh Ecc. Khi so sánh các phương pháp lây nhiễm khác nhau thì phương pháp nhiễm VKNS trước và sau đó nhiễm Ecc cho hiệu quả phòng trừ cao nhất, mặc dù không có sự sai khác có ý nghĩa giữa các công thức xử lý sử dụng các phương pháp lây nhiễm khác nhau (P>0,05). So với cách nhiễm trộn đồng thời VKNS và Ecc thì phương pháp lây nhiễm VKNS trước sau đó lây nhiễm Ecc là cách giúp xác định chắc chắn hơn khả năng phòng bệnh trên lát cắt khoai tây. Vì trong tự nhiên, vi khuẩn nội sinh tồn tại bên trong mô cây chủ và không gây triệu trứng bệnh cho cây. Việc lây nhiễm VKNS trước lên lát cắt khoai tây giúp chúng có thời gian xâm nhập, thích ứng và phát triển tốt hơn, nâng cao khả năng phòng bệnh cho khoai tây khi có vi khuẩn gây bệnh xâm nhập.
Một số nghiên cứu cũng đã công bố kết quả tương tự chứng minh rằng khả năng phân hủy AHL của vi khuẩn nội sinh có quan hệ mật thiết với hiệu quả phòng trừ bệnh thối nhũn khoai tây. Han và cs (2010) đã phân lập được một chủng vi khuẩn Bacillus marcorestinctum từ đất. Chủng này có khả năng phân hủy AHL tổng hợp chỉ sau 1h. Đồng thời, kết quả đồng nhiễm chủng vi khuẩn này với vi khuẩn gây bệnh thối nhũn P. carotovorum (E. carotovora) cho thấy trọng lượng mô thối củ khoai tây đã giảm đáng kể. Điều này chứng minh rằng chủng vi khuẩn B. marcorestinctum có tác dụng bất hoạt AHL do vi khuẩn gây bệnh sản sinh và do đó làm giảm triệu chứng thối củ khoai tây. Một nghiên cứu khác của Molina và cs (2003) sử dụng ba phương pháp lây nhiễm khác nhau để chứng minh hiệu quả phòng trừ bệnh thối nhũn khoai tây của vi khuẩn phân hủy AHL. Bằng cách thay đổi trình tự lây nhiễm vi khuẩn phân hủy AHL và vi khuẩn gây bệnh Ecc, họ đã phát hiện được ngay cả khi lây nhiễm vi khuẩn gây bệnh Ecc 2 ngày trước khi nhiễm vi khuẩn phân hủy AHL thì triệu chứng bệnh thối nhũn bị ức chế đáng kể. Đây là một trong
những ví dụ điển hình về hiệu quả “trừ bệnh” (curative) của vi khuẩn phân hủy AHL. Các chủng vi khuẩn này có tiềm năng ứng dụng rất cao trong thực tiễn kiểm soát bệnh thối nhũn khoai tây.