Phần 4 Kết quả và thảo luận
4.4. Ảnh hưởng của chất điều tiết sinh trưởng ba và nano bạc đến quá trình
HỐNG PHÁP
4.4.1. Ảnh hưởng của của chất điều tiết sinh trưởng BA đến quá trình nhân nhanh chồi in vitro hoa hồng Pháp nhanh chồi in vitro hoa hồng Pháp
Để đánh giá ảnh hưởng của BA đến quá trình tái sinh chồi in vitro hoa
hồng Pháp, chúng tơi tiến hành bố trí thí nghiệm với các nồng độ BA khác nhau (0; 0,5; 1; 1,5; 2 mg/l) tương ứng với 5 CT (1, 2, 3, 4, 5), trong đó cơng thức đối chứng là CT1. Sau 6 tuần theo dõi, chúng tôi thu được kết quả ở bảng 4.7 sau.
Bảng 4.7. Ảnh hưởng của của chất điều tiết sinh trưởng BA đến quá trình nhân nhanh chồi in vitro hoa hồng Pháp (sau 6 tuần)
Công thức
BA (mg/l)
Hệ số
nhân chồi Số lá/chồi
Chiều cao chồi
(cm) Đặc điểm của chồi CT1 0,0 0,73±0,45d 1,27±0,45e 0,33±0,35b Lá hơi vàng CT2 0,5 1,27±0,45c 1,93±0,36d 1,17±0,32a Lá hơi vàng CT3 1,0 1,47±0,50b 3,07±0,25c 1,67±0,48a Lá xanh đậm. CT4 1,5 2,37±0,49a 5,80±0,40a 1,83±0,38 a Lá xanh đậm. CT5 2,0 1,33±0,48c 4,83±0,38b 1,77±0,43a Lá xanh đậm. LSD0,05 0,10 0,19 0,78 CV% 3,8 3,0 3,1
So sánh các giá trị trong cùng một cột, các giá trị mang cùng một chữ cái thì khác nhau khơng có ý nghĩa, các giá trị cơng thức mang khác chữ thì khác có ý nghĩa ở mức α = 0, 05.
Kết quả phân tích thống kê ở bảng 4.7 cho thấy, khi thay đổi nồng độ BA đã gây ra những ảnh hưởng lớn và ảnh hưởng khác nhau đến hệ số nhân, sinh trưởng và phát triển chồi của chồi hoa hồng Pháp. Ở tất cả các công thức, khi tăng nồng độ BA đều có hệ số nhân chồi cao hơn công thức đối chứng. Hệ số nhân chồi và chiều cao chồi tăng tỉ lệ thuận khi tăng nồng độ BA từ 0,5–1,5 mg/l. Ở CT4 nồng độ BA là 2 mg/l thì hệ số nhân chồi và chiều cao giảm đáng kể so với các cơng thức cịn lại nhưng vẫn cao hơn công thức đối chứng.
Ở CT3 (1,5 mg/l BA), các chồi ni cấy có hệ số nhân chồi cao nhất (2,37 lần) sai khác có ý nghĩa thống kê 5% với các tất cả cơng thức cịn lại, cũng ở công thức này chiều cao chồi cao nhất (1,83 cm) sai khác khơng có ý nghĩa thống kê 5% với cơng thức cịn lại. Ở CT1 (0 mg/l BA), các chồi ni cấy có hệ số nhân chồi thấp nhất (0,73 lần), chiều cao chồi thấp nhất (0,33 cm). Ở CT5 (2 mg/l BA) có hệ số nhân chồi giảm đáng kể, thấp hơn CT2 (0,5 mg/l BA) và CT3 (1 mg/l BA) nhưng số lá nhiều và chiều cao lớn chỉ sau CT4 (1,5 mg/l BA).
Qua thí nghiệm trên có thể thấy được nồng độ BA ảnh hưởng đáng kể đến hệ số nhân, chiều cao, số lá trung bình. Khi tăng nồng độ BA kéo theo các chỉ tiêu hệ số nhân, chiều cao, số lá cũng tăng theo. Tuy nhiên, khi hàm lượng BA tăng đến một mức độ nhất định thì nó lại dẫn đến sự ức chế sự nhân lên của chồi
cấp 1, làm giảm các chỉ tiêu này (ở nồng độ 2 mg/l). Trong nghiên cứu của Nosheen Hameed et al. (2006) trên đối tượng Rosa indica L. cũng đề cập đến ảnh hưởng của BA đến hệ số nhân, sinh trưởng, phát triển của chồi, cụ thể là với nổng độ 1,5 mg/l BA thì chồi phát triển tốt nhất với hệ số nhân cao nhất 2,1 lần. Kết quả này cũng tương tự với kết quả của Nguyễn Thị Phương Thảo và cs. (2015) ở nồng độ 1,5 mg/l BA cho hệ số nhân chồi cao nhất 27,3 lần ở hoa hồng cơm (Rosa sericea LINDL). Như vậy, nồng độ bổ sung BA thích hợp nhất cho nhân chồi hoa hồng Pháp là 1,5 mg/l.
Tóm lại, nồng độ BA tối ưu nhất cho sự sinh trưởng và phát triển của chồi cấp in vitro hoa hồng Pháp là 1,5 mg/l (M3). CT1 0mg/l BA CT2 0,5mg/l BA CT3 1mg/l BA CT4 1,5 mg/l BA CT5 2 mg/l BA Hình 4.5. Ảnh hưởng của chất điều tiết sinh trưởng BA đến quá trình nhân
nhanh chồi in vitro hoa hồng Pháp (sau 6 tuần)
4.4.2. Ảnh hưởng của nano bạc đến quá trình nhân nhanh chồi in vitro hoa hồng Pháp hồng Pháp
Thí nghiệm nhằm đánh giá ảnh hưởng của nano bạc đến quá trình nhân nhanh chồi in vitro, chúng tơi tiến hành bố trí thí nghiệm với 5 cơng thức (1, 2, 3, 4, 5) tương ứng với 5 nồng độ nano bạc khác nhau (0, 2, 4, 6, 8 ppm) trong đó cơng thức đối chứng là CT1 (0 ppm). Thí nghiệm được theo dõi sau 6 tuần và thu được kết quả như sau.
Bảng 4.8. Ảnh hưởng của nồng độ nano bạc lên quá trình nhân nhanh chồi in vitro hoa hồng Pháp (sau 6 tuần)
Công thức
NS (ppm)
Hệ số
nhân chồi Số lá/chồi
Chiều caochồi
(cm)
Đặc điểm của chồi
CT1 0 2,37±0,49e 3,37±0,49bc 1,83±0,38b Lá xanh CT2 2 5,77±0,45a 6,37±0,49a 2,67±0,45a Lá xanh CT3 4 5,23±0,45b 4,13±0,38b 1,87±0,34b Lá xanh CT4 6 4,33±0,48c 3,23±0,43bc 1,73±0,45c Một số lá vàng CT5 8 2,87±0,34d 2,67±0,46bc 1,37±0,49d Lá vàng LSD0,05 0,10 0,97 0,08 CV% 1,3 1,3 2,4
So sánh các giá trị trong cùng một cơt, các giá trị mang cùng một chữ cái thì khác nhau khơng có ý nghĩa, các giá trị cơng thức mang khác chữ thì khác có ý nghĩa ở mức α = 0, 05.
Từ bảng số liệu 4.8 cho thấy, ở nồng độ 2 ppm cho tỷ lệ vượt trội về hệ số nhân chồi 5,77, sai khác là 5% so với các cơng thức cịn lại, ở CT3 (4 ppm) có hệ số nhân chồi cũng cao 52,3 lần, ở CT4 (6 ppm) cho hệ số nhân chồi là 4,33 lần còn ở CT5 (8 ppm) có hệ số nhân chồi là 2,87 lần. Cả 3 CT2, 3, 4, 5 đều cho hệ số nhân chồi cao hơn so với đối chứng là CT1 (0ppm). Số lá ở CT2 (2ppm) là 6,73, khác biệt 5% so với các cơng thức cịn lại, trong khi đó số lá ở CT1, 3,4,5 khơng có sự sai khác giữa các cơng thức, ở CT5 có sự sai khác với CT3. Chiều cao của chồi cao nhất là ở CT2 khác biệt 5 % so với các cơng thức cịn lại, trong khi đó các CT1 và 3 khơng có sự khác biệt nhau. Như vậy khi so sánh các công thức khác nhau ở từng chỉ tiêu thấy ở CT2 (2 ppm) cho hệ số nhân chồi cao nhất, số lá/chồi chiều nhất và chiều cao của chồi lớn nhất, thứ 2 là CT3 (4 ppm), ở CT4, 5 có hệ số nhân chồi cao hơn CT1 nhưng chiều dài của chồi ngắn hơn và lá có màu vàng. Sở dĩ có kết quả như vậy, theo chúng tôi khi nồng độ nano cao sẽ ức chế quá trình nhân chồi in vitro hoa hồng Pháp. Một số nghiên cứu khác về ảnh hưởng của nano như: Nghiên cứu của Ali Sorooshzadeh et al. (2012) đã nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ nano đến khả năng sinh trưởng của cây nghệ tây ở vùng ngập úng cho thấy dưới điều kiện ngập úng, phun nano bạc vào lá ở nồng độ 50 ppm hoặc 100 ppm làm tăng chiều cao cây và số mầm, hay theo Hediat M. H. Salama (2012) nghiên cứu ảnh hưởng của nano bạc trong khử trùng mẫu lạc và ngô. Khi bổ sung vào môi trường nuôi cấy hạt
nồng độ nano bạc 20, 40, 60, 80, 100 ppm thấy từ nồng độ 20 đến 60 ppm làm tăng chiều dài của chồi, diện tích bề mặt lá, hàm lượng prôtêin và cacbohidrat. Ở nồng độ 40 - 60 ppm làm tăng tuổi thọ của cành và gốc.
Như vậy nano có tác động lớn đến q trình phát triển của các loại cây trồng, mỗi loại cây hay vật liệu nuôi cấy in vitro khác nhau sự tác động của nồng độ nano khác nhau. Nano có ảnh hưởng lớn tới q trình nhân nhanh chồi in vitro của hoa hồng Pháp, khi bổ sung nano đã tác động đến hệ số nhân chồi tốt hơn so với không bổ sung nano, tuy nhiên ở nồng độ nano cao gây ức chế sự phát triển chiều cao của chồi và màu sắc của lá. Như vậy, ở nồng độ nano 2 ppm là nồng độ thích hợp nhất để bổ sung vào môi trường nhân nhanh chồi in vitro hoa hồng Pháp.
Tóm lại, ở hoa hồng Pháp khi bổ sung vào môi trường nồng độ chất điều tiết sinh trưởng 1,5 mg/l BA và 2 ppm/l nano bạc là thích hợp nhất cho sự nhân nhanh chồi cấp in vitro hoa hồng Pháp.
CT1 0 ppm NS CT2 2 ppm NS CT3 4 ppm NS CT4 6 ppm NS CT5 8 ppm NS Hình 4.6. Ảnh hưởng của nano bạc đến quá trình nhân nhanh chồi in vitro
hoa hồng Pháp (sau 6 tuần)