Tiến hành thí nghiệm:
− Sử dụng dung dịch PBS pH 7,4 làm mơi trường phóng thích thuốc.
− Chuẩn bị mẫu như sau:
+ Đối với thuốc tự do, cân một lượng chính xác 7 mg Oxaliplatin hịa tan trong 2 mL mơi trường.
+ Đối với mẫu nano liposome nang hóa thuốc, cân 100 mg mẫu Lip-mPEG- OXP sau đông khô chứa lượng Oxaliplatin tương đương 7 mg và thêm vào 2 mL môi trường.
− Cho mẫu vào túi thẩm tách, buộc chặt hai đầu, đặt vào lọ thủy tinh chứa 18 mL mơi trường, đậy kín lọ.
− Dùng micropipette rút ra 2 mL dung dịch ngồi màng, đồng thời bổ sung 2 mL mơi trường mới ở các mốc thời gian 1, 2, 3, 4, 6, 8, 12, 16, 24 giờ sau khi bắt đầu thí nghiệm.
Chuẩn bị mẫu:
− Pha loãng 2 mL mẫu thu được trong 8 mL dung dịch HNO3 1% (độ pha loãng là 5 lần).
− Siêu âm kết hợp gia nhiệt ở 80 ºC trong 30 phút để thuốc phân tán đều trong mẫu.
Tiến hành đo:
− Đo ICP-MS, định lượng nồng độ nguyên tố Platin, qua đó gián tiếp định lượng nồng độ thuốc Oxaliplatin có trong mẫu theo đường chuẩn.
− Chế độ và điều kiện áp dụng cho phân tích ICP-MS tương tự như đã trình bày ở mục 3.4.3.
Tỷ lệ phần trăm khối lượng dược chất phóng thích tích lũy tại mỗi thời điểm, được tính theo cơng thức sau:
Trong đó:
− là khối lượng dược chất được phóng thích ra tại thời điểm lấy mẫu (t)
− là khối lượng dược chất ban đầu trong mẫu
− là nồng độ dược chất tại thời điểm lấy mẫu (t)
− là nồng độ dược chất tại thời điểm lấy mẫu trước đó (i)
− V là thể tích dung dịch ngồi màng
Xây dựng đồ thị mơ tả q trình nhả chậm thuốc, biểu thị tỷ lệ phần trăm khối lượng dược chất được phóng thích tích lũy theo thời gian.