Thực hiện theo Quy trình hƣớng dẫn thử hiệu lực diệt muỗi Aedes của hóa chất diệt côn trùng của Bộ Y tế năm 2013 [3]:
- Trang thiết bị vật tƣ thử nghiệm:
+ Lồng muỗi (20 cm x 20cm) có phủ vải tuyn với mắt lƣới 36 lỗ/cm2±1 + Số lƣợng: 45 lồng (gồm 20 lồng thử nghiệm và 05 lồng đối chứng). + Máy phun, nhiệt kế, ẩm kế, ống nghiệm, đồng hồ hẹn giờ.
+ Trang bị dụng cụ bảo hộ cho ngƣời phun hóa chất. - Điều kiện thử nghiệm:
+ Muỗi Ae. aegypti cái, 2 - 5 ngày tuổi nuôi từ bọ gậy bắt ở thực địa (F0) hoặc thế hệ F1 của chúng bắt ở thực địa. Chọn muỗi cái thử thử nghiệm khỏe mạnh, cơ thể nguyên vẹn, chƣa hút máu và chỉ cho hút đƣờng glucose 10% trƣớc khi thử nghiệm.
+ Nhiệt độ 27 ± 20C và ẩm độ 80 ± 10%. + Thời gian thử nghiệm: từ 6 - 8 giờ sáng.
+ Nhà thử nghiệm: Chọn ngẫu nhiên 05 nhà trong cộng đồng để thử nghiệm với diện tích 20 m2 (khoảng 50 m3). Đồng thời chọn 01 nhà đối chứng có điều kiện tƣơng đồng và đặt lồng ở các vị trí giống với các nhà thử nghiệm.
* Quy trình thử nghiệm
- Chuẩn bị 20 lồng chứa muỗi thử nghiệm, 05 lồng chứa muỗi đối chứng và mỗi lồng có 20 cá thể muỗi. Mỗi nhà thử nghiệm đƣợc treo trong nhà 04 lồng hình trụ kích thƣớc 20cm x 20cm ở các độ cao 0,5m, 1m, 1,5m và 1,8m tính từ mặt đất và đặt lồng đối chứng ở nhà không có hóa chất.
- Pha hóa chất theo các tỷ lệ thử nghiệm với dung môi là nƣớc sạch (phun ULV) và dầu diesel (phun mù nóng).
- Tiến hành sử dụng máy phun phun theo thời gian định trƣớc.
- Sau 60 phút tiếp xúc muỗi trong các lồng thử nghiệm đƣợc chuyển sang các lồng sạch đã chuẩn bị trƣớc và cho hút dung dịch đƣờng glucose 10% và đặt trong phòng có nhiệt độ từ 27 ± 20
C, ẩm độ 80 ± 10%, không có hóa chất, để muỗi nghỉ nghơi và theo dõi trong thời gian 24 giờ.
- Sau 24 giờ, đếm số muỗi chết. Tỷ lệ muỗi chết sau 24 giờ đƣợc dùng để đánh giá hiệu lực diệt của hóa chất thử nghiệm.
* Phiên giải kết quả thử nghiệm
- Ở lô đối chứng có tỷ lệ muỗi chết < 5%: giữ nguyên tỷ lệ chết của lô tiếp xúc với hóa chất.
- Ở lô đối chứng có tỷ lệ muỗi chết > 20% thì hủy bỏ thử nghiệm và làm lại thử nghiệm.
- Nếu lô đối chứng có tỷ lệ muỗi chết 5 - 20% thì tỷ lệ muỗi chết trong thử nghiệm điều chỉnh theo công thức Abbott:
% muỗi chết thí nghiệm – % muỗi chết đối chứng
Tỷ lệ muỗi chết =
100 – % muỗi chết đối chứng * Đánh giá kết quả thử nghiệm:
Sau 24 giờ, đếm số muỗi chết. Tỷ lệ muỗi chết sau 24 giờ đƣợc dùng để đánh giá hiệu lực diệt của hóa chất thử nghiệm:
+ Tỷ lệ chết từ 90 - 100%: Hóa chất có hiệu lực diệt tốt.
+ Tỷ lệ chết từ 70 - < 90%: Hóa chất có hiệu lực diệt trung bình. + Tỷ lệ chết từ < 70%: Hóa chất có hiệu lực diệt kém.