3. Ý nghĩa của đề tài
2.3.3. Phương pháp nghiên cứu cụ thể
Nội dung 1: Nghiên cứu đặc điểm sinh học của cây Đẳng sâm bắc
* Phương pháp điều tra, khảo sát cây Đẳng sâm bắc tại tỉnh Vị Xuyên
Để khảo sát toàn bộ vùng dược liệu có cây Đẳng sâm bắc trên địa bàn huyện Vị Xuyên, tỉnh Hà Giang đề tài đã thực hiện các bước như saụ
ạ) Nội dung khảo sát gồm
- Xác định sự phân bố cây Đẳng sâm bắc như: Vị trí, diện tích, mặt bằng, độ dốc, độ che phủ, độ ẩm.
- Xác định, nhận dạng loài Đẳng sâm bắc: Lấy mẫu tươi tại các địa điểm điều trah, ép các mẫu thu được cố định bằng cồn 700.
- Chụp ảnh tư liệu cây Đẳng sâm bắc ngoài hiện trường.
b.) Các chỉ tiêu sử dụng để phân loại, định danh
- Các đặc điểm của lá (cách mọc lá, màu sắc, số lá chét, chiều dài, chiều rộng, cuống là, lông trên lá, lá kèm...) và các đặc điểm của tua cuốn.
- Các đặc điểm của hoa (mùa ra hoa, màu sắc, số lượng và tính chất của nhị, nhụy, bao phấn, số lượng hoa, kiểu hoạ..) và đặc điểm của quả.
- Các đặc điểm của thân (màu sắc, chiều dài, hình dạng, kích thước, kiểu phân nhánh...) và đặc điểm của rễ câỵ
Nội dung 2: Nghiên cứu đặc điểm sinh thái học của cây Đẳng sâm bắc
* Phương pháp điều tra cấu trúc rừng có Đẳng sâm bắc phân bố tự nhiên
- Điều tra theo tuyến: Dựa vào kết quả điều tra sơ bộ, lập 9 tuyến điều
tra với độ rộng của tuyến điều tra là 3 mét theo các dạng sinh cảnh khác nhau: Rừng tự nhiên, rừng trồng, rừng phục hồi, trảng cỏ, nương rẫỵ Trên các tuyến điều tra tiến hành thu thập các thông tin về số lượng các thể, tình hình sinh trưởng, phát triển và các yếu tố sinh tháị
- Điều tra theo OTC: Để thu thập số liệu ngoài hiện trường, đề tài áp
dụng phương pháp điều tra thực nghiệm sinh thái thông qua hệ thống ô tiêu chuẩn tạm thời và bán định vị được bố trí trên các điều kiện lập địa, địa hình, độ dốc khác nhau để nghiên cứu đặc điểm cấu trúc và tái sinh tự nhiên các trạng thái rừng có loài Đẳng sâm bắc xuất hiện. Tại khu vực nghiên cứu, tiến hành lập 9 OTC tạm thời theo vị trí (chân, sườn, đỉnh), mỗi OTC có diện tích 1.000 m2 (25x40m). Trong ô tiêu chuẩn, tiến hành xác định độ dốc, độ cao và định vị bằng máy GPS. Trong mỗi ô tiêu chuẩn, tiến hành điều tra tầng cây gỗ với D > 6cm để xác định cấu trúc tổ thành loài cây của lâm phần. Ngoài ra tiến hành điều tra về số lượng cá thể Đẳng sâm bắc, tình hình sinh trưởng của các cá thể trưởng thành và đặc điểm tái sinh đề tài sử dụng phương pháp điều tra bằng ô thứ cấp 25m2 (5x5m), trong đó:
- Những cây có chiều cao các nhánh dưới 1m được coi là cây tái sinh. Với các cây này tiến hành đếm số nhánh/cây, phân cấp theo chiều cao và chất lượng cây tái sinh, giá thể leọ
- Những cây trưởng thành tiến hành đo đếm về số nhánh/cây, phân cấp chất lượng sinh trưởng, giá thể leo, đặc điểm vật hậụ
- Xác định các chỉ tiêu:
+ Chiều cao cây tái sinh: Đo bằng thước dâỵ
+ Chất lượng sinh trưởng của cây được phân thành 4 cấp: A, B, C, D. Trong đó: Cây cấp A là những cây có thân và nhánh phát triển tốt, lá xanh tươi, không bị sâu bệnh; Cấp B là những cây thân cành, lá phát triển bình thường, cây trung bình; Cây cấp C là những cây còi cọc, bị sâu bệnh nhưng không chết; Cây cấp D là những cây thân, nhánh, lá vàng úa, còi cọc và bị sâu bệnh nặng sẽ chết.
- Thu thập lấy mẫu cây Đẳng sâm bắc: Cây trong ô tiêu chuẩn được định vị, thu thập các thông tin về đặc điểm phân bố và tiến hành lấy mẫu để xác định đặc điểm hình thái (thân, tua, lá, hoa và quả), cách thu mẫu như sau: Cắt 1 đoạn thân có chiều dài từ 30-40cm nên chọn đoạn thân bánh tẻ, sau đó được ép vào giấy báo theo phương pháp ép khô mẫu tiêu bản. Trên mẫu ép được ghi tên loài Đẳng sâm bắc, thứ tự mẫu, nguồn gốc, ngày điều tra, người điều trạ Sau đó, mẫu được bảo quản trong phòng thí nghiệm ở nhiệt độ bình thường.
* Phương pháp điều tra về lập địa/đất: Xác định điều kiện lập địa mỗi
ô tiêu chuẩn bằng cách đào 1 phẫu diện đất, từ mô tả theo hướng dẫn trong giáo trình Đất Lâm nghiệp của trường Đại học Lâm nghiệp Việt Nam.
* Phương pháp phỏng vấn người dân về kinh nghiệm thu hái, sử dụng
Đối tượng được phỏng vấn là những người dân trong cộng đồng có sự hiểu biết, kinh nghiệm thu hái, chế biến, bảo quản cây Đẳng sâm bắc. Trong phỏng vấn, chúng tôi sử dụng hai phương pháp là PRA và RRA thông qua bộ câu hỏị
3.1. Chọn hom và kỹ thuật cắt hom
a) Chuẩn bị hom giâm: Hom trong các thí nghiệm được lấy từ cây Đẳng
sâm bắc được trồng tại Vườn giống gốc của Viện nghiên cứu và Phát triển Lâm nghiệp, trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên. Thời điểm lấy hom khi cây con trên 12 tháng tuổi, có chiều cao từ 1,8-2,2m, sinh trưởng tốt, không bị sâu bệnh. Hom được cắt vào buổi sáng, cành lấy hom là cành bánh tẻ.
b) Xử lý hom giâm: Dùng dao hoặc kéo sắc cắt cả cành dài từ 10-15cm,
chọn những cành là cành chồi vượt có các đoạn hom mập và mọc thẳng đứng. Cành mang hom đã cắt được ngâm ngay vào nước và để ở nơi râm mát. Khi cắt cành phải để lại ít nhất 2 lá hoặc 2 chồi ngủ. Phần gốc hom được cắt nghiêng một góc 450. Hom sau khi cắt được ngâm ngay trong dung dịch Benlat nồng độ 0,15% trong 15 phút để diệt nấm. Sau đó bó các hom lại rồi nhúng phần gốc hom vào chất điều hòa sinh trưởng có nồng độ khác nhau trong thời gian 15 phút.
c) Cắm hom: Trước khi cắm hom cần tưới nước đủ ẩm cho giá thể,
dùng que nhỏ chọc lỗ có độ sâu 2-3cm để đặt hom vàọ
d) Chăm sóc hom sau khi giâm: Sau khi giâm hom, tiến hành phủ kín
luống giâm bằng nilon trắng để giữ ẩm, tránh sự thoát hơi nước của hom mới giâm. Hàng ngày tưới nước bằng bình phun sương tạo ẩm 2 lần vào buổi sáng và chiều tối, những ngày nắng nóng có thể tưới đến 3-4 để đảm bảo độ ẩm đạt trên 90%. Nước dùng để tưới phải sạch, không mang nấm bệnh.
3.2. Kỹ thuật nhân giống cây Đẳng sâm bắc
* Ảnh hưởng của giá thểđến hình thành cây con Đẳng sâm bắc
Để đánh giá ảnh hưởng của giá thể đến tỷ lệ sống và sinh trưởng của cây con Đẳng sâm bắc, bố trí 6 công thức thí nghiệm theo khối ngẫu nhiên đầy đủ 3 lần lặp, 30 hom/công thức/lần lặp, từ đó chọn được giá thể trội nhất. Tổng số cây thí nghiệm 540.
- Công thức 1: 70% đất tầng A + 30% sơ dừạ - Công thức 2: 50% đất tầng A + 50% sơ dừạ - Công thức 3: 70% đất tầng A + 30% cát sông.
- Công thức 4: 50% đất tầng A + 50% cát sông. - Công thức 5: 100% đất tầng Ạ
- Công thức 6: 100% cát sông.
Sau khi cắt, hom được cấy trực tiếp vào giá thể theo công thức thí nghiệm đã bố trí. Trong thời gian bố trí thí nghiệm, các công thức thí nghiệm được sử dụng biện pháp kỹ thuật chăm sóc như nhau, cây được giâm trong vườn ươm có độ che sáng 50%, tưới nước bằng bình phun sương đảm bảo cây đủ nước. Định kỳ theo dõi phòng trừ cỏ dại và sâu bệnh. Số liệu được thu thập 15 ngày/lần xác định tỷ lệ hom sống (chết), tỷ lệ hom ra rễ, số rễ/hom. Từ đó chọn loại giá thể có ảnh hưởng tốt nhất đến cây hom.
* Ảnh hưởng của loại hom đến hình thành cây con Đẳng sâm bắc
Thí nghiệm được bố trí theo khối ngẫu nhiên đầy đủ 3 lần lặp, 30 hom/công thức/lần lặp. Tổng số hom thí nghiệm là 270.
- Công thức 1: Hom non. - Công thức 2: Hom bánh tẻ. - Công thức 3: Hom già.
Trong thời gian bố trí thí nghiệm, các công thức thí nghiệm được sử dụng biện pháp kỹ thuật chăm sóc như nhau, cây được giâm trong vườn ươm có độ che sáng 50%, tưới nước bằng bình phun sương đảm bảo cây đủ nước. Định kỳ theo dõi phòng trừ cỏ dại và sâu bệnh. Số liệu được thu thập 15 ngày/lần xác định tỷ lệ hom sống (chết), tỷ lệ hom ra rễ, số rễ/hom. Từ đó chọn loại giá thể có ảnh hưởng tốt nhất đến cây hom.
* Ảnh hưởng của chất kích thích hình thành cây con Đẳng sâm bắc
Để đánh giá ảnh hưởng của loại chất và nồng độ tới kết quả giâm hom cây Đẳng sâm bắc, thí nghiệm đã sử dụng 2 loại chất kích thích ra rễ là: IBA (axit indol butiric) và NAA (axit naphtalen axetic). Mỗi chất kích thích ra rễ thí nghiệm với 5 nồng độ khác nhau tương ứng với 10 công thức thí nghiệm và 1 công thức đối chứng không sử dụng chất kích thích như trên:
- Công thức 1: Sử dụng IBA nồng độ 100 ppm. - Công thức 2: Sử dụng IBA nồng độ 200 ppm.
- Công thức 3: Sử dụng IBA nồng độ 300 ppm. - Công thức 4: Sử dụng IBA nồng độ 400 ppm. - Công thức 5: Sử dụng IBA nồng độ 500 ppm. - Công thức 6: Sử dụng NAA nồng độ 100 ppm. - Công thức 7: Sử dụng NAA nồng độ 200 ppm. - Công thức 8: Sử dụng NAA nồng độ 300 ppm. - Công thức 9: Sử dụng NAA nồng độ 400 ppm. - Công thức 10: Sử dụng NAA nồng độ 500 ppm. - Công thức đối chứng: Không sử dụng hóa chất.
Các thí nghiệm được bố trí theo khối ngẫu nhiên đầy đủ 3 lần lặp, 30 hom/công thức/lần lặp. Các công thức thí nghiệm được tiến hành trong cùng một điều kiện môi trường. Tổng số hom thí nghiệm là 990. Số liệu được thu thập 15 ngày/lần xác định tỷ lệ hom sống (chết), tỷ lệ hom ra rễ, số rễ/hom. Từ đó chọn loại thuốc có nồng độ tốt nhất để thực hiện công tác nhân giống cho loài cây nàỵ
* Ảnh hưởng của thời vụ giâm hom đến hình thành cây con Đẳng sâm bắc
Thí nghiệm được bố trí theo khối ngẫu nhiên đầy đủ 3 lần lặp, 30 hom/công thức/lần lặp. Tổng số hom thí nghiệm là 360.
+ Công thức 1: Vụ Xuân + Công thức 2: Vụ Hè + Công thức 3: Vụ Thu + Công thức 3: Vụ Đông
Trong thời gian bố trí thí nghiệm, các công thức thí nghiệm được sử dụng biện pháp kỹ thuật chăm sóc như nhau, cây được giâm trong vườn ươm có độ che sáng 50%, tưới nước bằng bình phun sương đảm bảo cây đủ nước. Định kỳ theo dõi phòng trừ cỏ dại và sâu bệnh. Số liệu được thu thập 15 ngày/lần xác định tỷ lệ hom sống (chết), tỷ lệ hom ra rễ, số rễ/hom. Từ đó chọn loại giá thể có ảnh hưởng tốt nhất đến cây hom.