5. Những điểm mới của đề tăi
1.3.3. Đặc điểm của virus lở mồm long móng
1.3.3.1. Hình thâi, kích thước, cấu trúc
Virus LMLM lă loại virus RNA nhỏ nhất trong câc loại virus qua lọc [57]. Kích thước 20 - 30nm, có thể qua được câc mây lọc Berkefeld, Chamberland vă măng lọc Seizt [30].
Hạt virus chứa 30% acid nucleic, đó lă một đoạn RNA chuỗi đơn, có khối lượng phđn tử lă 8,6kDa, hợp thănh bởi 8000 nucleotide vă có hệ số sa lắng lă 35S, không có tính sinh khâng thể vă đặc tính khâng nguyín nhưng có vai trò trong quâ trình gđy nhiễm [49].
Vỏ capside của virus có hơn60 đơn vị (capsomer). Mỗi capsomer có 4 loại protein cấu trúc giống nhau lă VP1, VP2, VP3 vă VP4. VP1, VP2 vă VP3 tạo nín một bề mặt của khối 20 mặt đối xứng với đường kính khoảng 23 nm còn VP4 lă protein ở bín trong capsid, kết dính RNA virus với mặt trong của capsid [39]. VP1 ở ngoăi cùng tham gia văo việc cố định virus trín tế băo, đóng vai trò quan trọng nhất trong việc gđy bệnh, đồng thời lă khâng nguyín chính tạo ra khâng thể chống lại virus LMLM. Vì
thế, người ta đê tiến hănh giải trình tự 1 phần hoặc toăn bộ gen mêhoâ VP1 để phđn chia chúng thănh câc serotype vă câc subtype [43].
Hình thâi vă cấu trúc của virus LMLM được trình băy ở hình 1.3.
A. Virus LMLM dưới kính hiển vi điện tử
B. Cấu trúc khâng nguyín virus LMLM(Nguồn:http://www.biochemsoctra
ns.org/bst/035/0594/bst0350594f01.htm)
C. Hạt virion của virus LMLM(Nguồn:http://www.virology.
w
isc.edu/virusworld/images/fmdv- 1qgc.jpg)
D.Cấu tạo khâng nguyín
E. Sơ đồ cấu trúc gen của virus LMLM
Về mặt khâng nguyín, virus LMLM không đồng nhất, điều năy xảy ra trong câc serotype mă mỗi serotype đó có thể có dưới type vă câc biến chủng hoặc câc biến chủng năy lại khâc nhau về mặt huyết thanh học. Hệ gen của virus LMLM bao gồm phần không mê hóa cho protein đầu 5’ (5’ UTR) vă đầu 3’ (3’ URT); phần gen mê hóa cho protein cấu trúc P1 (VP4, VP3, VP2, VP1) vă phần gen mê hóa cho protein phi cấu trúc P2 (2A, 2B, 2C) vă P3 (3A, 3B, 3C, 3D) [13].
Kích thước toăn bộ genome của virus LMLM có chiều dăi 8.000 - 8.500 bazơ [47], [54], [56]. Do đặc điểm cấu trúc của virus RNA sợi đơn dương nín có tính đột biến rất mạnh nín trong cùng một serotype, câc chủng phđn lập ở câc vùng địa lý khâc nhau có mức độ tương đồng về thănh phần nucleotide vă acid amin cũng khâc nhau [46]. Sự sai khâc về bộ gen lă nguyín nhđn tạo ra câc biến chủng, đặc biệt lă sự đa dạng của protein cấu trúc VP1 [13].
1.3.3.2. Phđn loại
Virus LMLM có đặc tính đặc biệt liín quan đến dịch tễ học, đó lă tính đa type vă tính dễ biến đổi khâng nguyín.
Năm 1922, hai nhă khoa học Phâp lă Vallĩe vă Carrĩ lần đầu tiín phât hiện ra sự tồn tại của hai type virus gđy bệnh LMLM ở bò. Năm 1926, hai nhă khoa học Đức lă Waldman vă Traut - Wein níu thím một type virus gđy bệnh LMLM thứ 3. Hiện nay, câc type virus LMLM do hai nhă khoa học Phâp phât hiện được gọi lă type A vă O, còn virus mă hai nhă khoa học Đức phât hiện được gọi lă type C. Ba type O, A, C được gọi lă câc type chđu Đu. Văi năm sau, 3 type virus LMLM khâc được phât hiện ở miền Nam chđu Phi vă được đặt tín lă SAT1, SAT2, SAT3. Tiếp theo, câc phòng thí nghiệm virus LMLM của Anh phđn lập được type virus thứ 7 ở tại nhiều nước chđu  vă đặt tín lă type Asia1. Hiệnnay, câc subtype của virus được kýhiệu thống nhất. Tính đa loại của virus được thể hiện khi gia súc đê khỏi bệnh, tính miễn dịch thu được không đều có khilại không còn nữa. Virus LMLM biến dị mạnh, một số subtype về mặt miễn dịch học hoăn toăn khâc với type “bố mẹ”, thường xuất hiện cuối một ổ dịch [33].
Đến nay, theo câc tăi liệu nghiín cứu, virus gđy bệnh LMLM được chia thănh 7 type virus LMLM lă: A, O, C, SAT1, SAT2, SAT3 vă Asia1. Dưới câc type lă những biến chủng virus gọi lă phđn type vă hiện nay đê phât hiện hơn 70 phđn type virus [21].
Những virus năy dường như biến hóa không ngừng thănh những serotype mới phđn biệt về tính khâng nguyín, tồn tại bền vững. Vì vậy, phải thường xuyín chẩn đoân định chủng virus chính xâc qua xĩt nghiệm tại phòng thí nghiệm để chọn được loại vacxin thich hợp để tiím phòng cho từng vùng trong từng thời kỳ. Trong 7 type thì type O lă phổ biến nhất, sau đó lă type A, type C ít gặp nhất [7].
Câc subtype mới xuất hiện ngăy căng nhiều vă mang tính ngẫu nhiín, không theo quy luật. Tuy vậy, tại một thời điểm cụ thể, chỉ có một subtype nhất định gđy bệnh tại câc khu vực bệnh LMLM [58].
Một ổ dịch xảy ra do câc type hoặc câc subtype vă cũng có thể lă do cả hai hoặc đơn lẻ từng type hoặc subtype.
Virus LMLM vẫn thường giữ được câc đặc tính của nó khi sinh sảnnhưng cũng có thể trong quâ trình nhđn lín cao độ trong một ổ dịch, một sự biến dị lăm nảy sinh một biến chủng mới. Một số tâc giả đê quan sât sự biến đổi từ một type năy sang type khâc (Manig vă Lazlo thấy type A, C biến thănh type O, Dimnit thấy type O biến thănh type C, Malzarot thấy type O biến thănh type A5). Do tính chất đa loại năy mă có những con vật đê lănh bệnh rồi lại mắc bệnh sau một thời gian ngắn, đê có những trường hợp trđu, bò mắc bệnh lại sau 10 ngăy, có khi mắc bệnh 3 lần trong một tuần [23].
1.3.3.3. Đặc tính nuôi cấy
Virus LMLM lă virus có tính hướng thượng bìnín có thểnuôi cấy trín tổ chức da sống như tổ chức da của thai lợn, thai bò còn sống, chuột non [24]; trín chuột chưa cai sữa, trín phôi gă con 1 ngăy tuổi [10];trín động vật thí nghiệm như thỏ, chuột lang, chuột nhắt trưởng thănh thì virus hay bị biến đổi vă thường mất đặc tính gđy bệnh [18].Tổ chức để nuôi cấy thích hợp nhất cho virus LMLM lă thượng bì lưỡi bò trưởng thănh. Lưỡi phải lấy ngay khi mổ bò, giữ lạnh ở 2-3oC vă chỉ sử dụng được trong vòng 8 ngăy. Phương phâp năy cho kết quả tốt, ưu điểm lă độc lực của virus sau nhiều lần tiếp đời vẫn cao đối với bò vă động vật thí nghiệm. Do đó, người ta thường dùng phương phâp năy để chế vacxin vô hoạt.
Ngoăi ra, có thể nuôi cấy virus LMLM trín môi trường tế băo. Tốt nhất lă tế băo lấy từ tuyến yín của bò hoặc của lợn, thận bí hoặc cừu non hoặc câc dòng tế băo có độ nhạy tương đương như tế băo của chuột Hamster non gọi tắt lă tế băo BHK (Baby Hamster Kidey). Sau khi cấy virus LMLM văo câc môi trường tế băo năy, để tủ ấm 37o
C trong 24, 48, 72 giờ, virus sẽ lăm hủy hoại tế băo nuôi [31].
1.3.3.4. Độc lực
Độc lực của viruslă đại lượng dùng để đo lường độc tính, khả năng gđy bệnh lđm săng hay mức độ gđy bệnh của virus.
Đối với virus LMLM, mọi chủng virus đều được coi lă cường độc, không có chủng nhược độc. Về mặt lđm săng, gia súc nhiễm virus LMLM có biểu hiện dưới nhiều mức độ khâc nhau, từ bệnh rất nghiím trọng đến dạng thể ẩn [11].
Cũng giống như câc virus RNA khâc, virus LMLM có khả năng biến chủng rất cao vă mỗi biến chủng đều có “dấu ấn” khâng nguyín riíng của nó. Protein VP1 được
mê hóa bởi gen VP1 lă một gen cấu trúc hay biến đổi nhất vă có liín quan đến độc lực của virus. Sự biến đổi của gen VP1 sẽ dẫn đến sự xuất hiện câc biến chủng mới của virus LMLM. Vì vậy, những nghiín cứu về dịch tễ học phđn tử của virus LMLM thường tập trung văo gen VP1 [52].
1.3.3.5. Sức đề khâng
Virus LMLM lă virus không có vỏ bọc, do đó chúng có sức đề khâng cao với dung môi hữu cơ (cồn, ete...) nhưng lại mẫn cảm với ânh sâng mặt trời, acid, formon...[11]. Vì vậy, có thể dùng câc loại acid nhẹ để tiíu diệt virus trín cơ thể con vật như: dấm ăn, phỉn chua, chanh, khế, acid citric, acid axetic 5%... nhưng để tiíu độc chuồng trại nín dùng NaOH 0,8%. Trong thực tiễn, người ta thường dùng NaOH 0,5% để sât trùng thđn thể gia súc vă cho người, còn dung dịch 1% để sât trùng dụng cụ, khi dùng nín cho thím dung dịch nước vôi 5%.
Virus LMLM có sức đề khâng tương đối cao đối với ngoại cảnh. Ở nhiệt độ 30 - 370C, virus LMLM sống được 4 - 9 ngăy. Ở 500C, virus LMLM nhanh chóng bị bất hoạt. Ở điều kiện nhiệt độ cao, virus dễ bị tiíu diệt, cụ thể: ở 60-70C, virus chết sau 5- 15 phút, đun sôi 100Cchết ngay lập tức. Ở nhiệt độ lạnh, virus tồn tại được lđu hơn: trong tủ lạnh, virus sống được 425 ngăy.
Virus có thể tồn tại được khoảng 5-10 tuần ở những nơi thời tiết mât, đặc biệt lă ở câc mô băo hoặc ở câc tổ chức ngoăi cơ thể với điều kiện pH không thấp hơn 6,5. Tại chuồng của trđu bò virus có thể duy trì khoảng 14 ngăy, ở trong đồ phế thải của động vật được khoảng 39 ngăy, trín bề mặt của phđn ở mùa thu được 28 ngăy vă ở mùa đông được 67 ngăy. Virus có thể sống lđu hơn ở trong thức ăn, ở lông trđu bò được 4 tuần, trong nước thải được trín 130 ngăy. Trong câc sản phẩm của động vật, virus bị bất hoạt khi có sự axit hóa của sữa vă thịt.
Đối với ânh sâng tâc động yếu: Trín mặt đồng cỏ, virus sống ít nhất 2 thâng về mùa đông, 3 ngăy về mùa thu, virus còn hoạt lực 4 tuần lễ trín lông bò. Trong đất ẩm ướt,virus có thể sống hăng năm.
Sức đề khâng của virus phụ thuộc phần lớn văo chất chứa nó. Virus có sức đề khâng tương đối mạnh khi nó dính văo những chất khô hay những chất protein, ví dụ trong cỏ khô virus sống được 8-15 tuần; trong tủy xương dăi, phủ tạng virus có thể sống 40 ngăy. Ở trong tổ chức vă mô băo virus có sức đề khâng mạnh với những chất hóa học sât trùng có thể giết được vi khuẩn khâc [20].
Virrus có thể tồn tại ở pH từ 6,7 - 9,5 nhưng bền vững nhất pH 7,2 - 7,6. Virus bị vô hoạt nhanh ở pH < 5 vă pH > 11 [10], [11].
Virus có sức đề khâng với môi trường bín ngoăi vă câc thuốc sât trùng. Virus LMLM có thể tồn tại hơn một năm ở chuồng gia súc mắc bệnh, hơn 1 thâng ở lông, 10 - 12 tuần ở quần âo vă thức ăn. Virus đặc biệt mẫn cảm với sự thay đổi pH cao hoặc thấp, ânh sâng mặt trời diệt virus nhanh chóng nhưng có thể tồn tại lđu trín đồng cỏ ở nhiệt độ thấp. Virus có thể sống ít nhất 1 thâng trong tinh bò đông viín -790C. Thuốc sât trùng tốt lă xút 2%, formol 2%, crezin 5%, nước vôi 20%, vôi bột… [7].