5. Những điểm mới của đề tăi
2.3.1. Trang thiết bị, dụng cụ, nguyín liệu, hóa chất nghiín cứu
2.3.1.1. Trang thiết bị
- Mây đọc ELISA, mây rửa đĩa ELISA, mây lắc ủ đĩa ELISA. - Mây li tđm lạnh.
- Mây Vortex, mây Spin. - Tủ lạnh -80oC, -20oC vă 4oC.
- Mây chiết tâch chđn không.
- Mây Realtime PCR (Smart Cycler). - Buồng an toăn sinh học cấp II. - Mây tính.
2.3.1.2. Dụng cụ thí nghiệm
- Micropipet một kính lấy được thể tích từ 25-50µl, 100-1000µl. - Micropipet đa kính lấy được thể tích từ 25-50µl, 50-300µl.
- Đĩa nhựa chữ U 96 giếng; nắp đậy đĩa; tip phù hợp với micropipet. Reservoirs (mâng chứa nguyín liệu); lọ nhựa hoặc thủy tinh 20ml, 50ml, 100ml, 200ml.
- Dụng cụ lấy mẫu:bơm tiím, kim tiím 18, dụng cụ lấy mẫu probang, ống nhựa có nắp vặn 15ml bảo quản mẫu probang, ống chắt huyết thanh 2ml, hộp xốp, bình ni tơ lỏng, dụng cụ bảo hộ lao động.
2.3.1.3. Nguyín liệu vă hóa chất thí nghiệm
- Mẫu giâm sât: Mẫu huyết thanh, mẫu probang (dịch hầu họng), mẫu bệnh phẩm biểu mô).
- Kit xĩt nghiệm phât hiện khâng thể lở mồm long móng 3ABC bằng phương phâp ELISA: PrioCHECK® FMDV NS.
- Môi trường tế băo BKH-21.
- Kit định type khâng nguyín virus LMLM bằng ELISA.
- Nguyín liệu xĩt nghiệm virus LMLM bằng realtime RT- PCR.
- Môi trường bảo quản mẫu probang MEM (Modified Eagles Medium). - Na2HPO4; Na2HPO4.H2O; NaCl; HCl; NaOH.
- Nước dùng cho sinh học phđn tử không có men Rnase. - Ethanol tuyệt đối.
- Kit chiết tâch RNA Qiagen® RNeasy Extraction Kit (Cat No: 74106)
- Nguyín liệu nhđn gen Invitrogen One-step RT-PCR Kit (Cat No.11732-020). - Primer vă Probe:
FMD (5’-3’)
Probe
FAM-AAACACGGACCCGACTTTAACCG-
BHQ1 FAM BHQ1
Forward AGATGCAGGARGACATGTCAA None None
Reverse TTGTACCAGGGYTTGGCYT None None